鹅不食草醇提取物抑菌作用研究
2013-03-04李吉华
李吉华
山东中医药大学实验中心，山东 济南 250355
鹅不食草醇提取物抑菌作用研究
李吉华
山东中医药大学实验中心，山东 济南 250355
目的：通过抑菌试验了解中药鹅不食草乙醇提取物的抗菌活性。方法：试验采用纸片扩散法测定乙醇提取物对福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、藤黄微球菌、酿酒酵母的抗菌活性。采用试管比浊法测定其最小抑菌浓度。结果：鹅不食草提取物除福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、酿酒酵母无抑菌活性外，对其余菌株均有抑菌作用，尤其对金黄色葡萄球菌的抑菌活性显著。结论：鹅不食草有较好的抑菌效果，在临床抗菌消炎方面有极大地优势。
鹅不食草；醇提物；抑菌
1 概述
鹅不食草为菊科植物鹅不食草Epaltes aistralis Less.的干燥全草，收载于 《中国药典》2005版Ⅰ部。又名石胡荽、食胡荽、鸡肠草［1］。系一年生小草本，生于水边湿地荒，野荫湿地，公园温室，花盆潮湿处等，分布于全国各省区，为常用药材。在 《品汇精要》中就对鹅不食草有所描绘 “此草鹅皆不食，故名鹅不食草。”本品味苦，微辛，属传统解表类中药，具有祛风散寒、通鼻利窍、明目去翳止咳化痰等功效，临床主要用于治疗风寒头痛、咳嗽、跌打扭伤、百日咳、疟疾、急慢性鼻炎、过敏性鼻炎等症［2］。鹅不食草化学成分复杂，主要为挥发油、甾醇类、黄酮类、三萜类化合物等［3］。鹅不食草具有广泛的药理作用，包括抗过敏、抗炎、抗诱变、抗癌等［4］。资源丰富，应用广泛，具有较高的药用和研究价值。为了更深入的研究鹅不食草的抑菌活性，本文对鹅不食草的乙醇提取物的抗菌性进行试验，旨在了解其抗菌活性，为其临床使用和质量控制提供理论依据。
2 材料与方法
2.1 提取物的制备［5－7］称取鹅不食草全草干粉300g，于烧杯中加60%乙醇4200m l，在超声波中50℃处理30 m in，重复操作2次，抽滤后合并滤液，将滤液用RE－ 540旋转蒸发仪在40℃下恒温下蒸发至无乙醇，于真空冷冻干燥机内处理后置冰箱保存，待用。使用时取鹅不食草提取物，用60%乙醇溶解，配置不同浓度溶液即可。
实验中所用福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、藤黄微球菌、酿酒酵母等由山东中医药大学基础医学院微生物学实验室提供。
2.2 鹅不食草乙醇提取物的抗菌活性测定 用纸片扩散法进行试验，药敏纸片和培养基的制备按照参考文献［8］的方法进行。把鹅不食草的乙醇提取物配成500 mg/ml的供试液，将提前制备好的纸片放入供试液中浸泡2h，取出纸片放入40℃的烘箱中烘干。将浓度为106ml－1的福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、藤黄微球菌、酿酒酵母分别均匀的涂抹在琼脂培养基上。然后，将制备好的药敏片均匀贴于培养基的3个位点，把培养基置于37℃恒温箱中培养18小时。分别测定抑菌圈的直径，最后取3个重复的平均值为最终结果。
用无菌水做对照，其中阳性对照为各菌株对应的抗生素 （表1）。
表1 不同菌株所用的抗生素
2.3 最低抑菌（MIC）浓度测定 采取试管比浊法［9，10］。简言之，配制系列肉汤培养基，分别加入50μL细菌的悬浊液，最后一管补加50μL肉汤。对各管进行比浊后，将未见细菌生长的试管内肉汤转移到干净的培养基上继续培养（37℃条件下培养18～24h）。培养基上未见细菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度。
3 结果与讨论
鹅不食草乙醇提取物的抗菌活性进行试验 （表2）。
表2 鹅不食草乙醇提取物对8种菌的抑菌环活性（mm）
鹅不食草醇提取物对福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、酿酒酵母无抑菌活性，对另外5种菌均有抑菌活性，抑菌圈直径：金黄色葡萄球菌＞藤黄微球菌＞大肠埃希菌＞枯草芽胞杆菌＞变形杆菌。最小抑菌浓度由小到大为：金黄色葡萄球菌＝藤黄微球菌＝枯草芽胞杆菌＜变形杆菌＝大肠埃希菌。有表可知鹅不食草提取物对福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、酿酒酵母无抑菌活性。此外，鹅不食草醇提物的最低抑菌浓度为0.125mg/ml（表2）。综合鹅不食草的抑菌直径和最低抑菌浓度，我们认为鹅不食草对金黄色葡萄球菌抑菌活性显著。
3.2 讨论 鹅不食草广泛用于治疗治疗过敏性鼻炎，有明显的减轻鼻塞的功效［11］，临床上把鹅不食草做成喷雾剂来治疗鼻炎，使药直接作用在病变部位［12］。试验显示，鹅不食草醇提物的MIC为0.125mg/ml，说明了鹅不食草有较好的抑菌效果，由于鹅不食草含有多种化学成分如三萜类成分、挥发油、黄酮类、氨基酸、豆甾醇、有机酸等［13］，据此推测鹅不食草在临床抗菌消炎方面有极大地优势。纸片扩散法测定醇提物抗菌活性试验中，醇提物对福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、酿酒酵母无抑菌活性，但对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌、变形杆菌有明显的抑菌圈，抑菌活性明显，尤其是对临床常见菌株金黄色葡萄球菌的活性表明，鹅不食草具有良好的抑菌效果，临床药用价值可待。
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Antibacterial activities of ethanol extract from Centipeda minima
Li Jihua
Experimental center of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan，250355
Objective：To explore the antimicrobial activity of traditional Chinese medicine（TCM）Centipeda using bacteriostatic test.Methods：The antimicrobial activity of Centipeda ethanol extraction to to Shigella bacteria，Staphylococcus aureus，Proteusbacillus vulgaris，Bacillus subtilis，Pseudomonas aeruginosa，Escherichia coli，Micrococcus luteus and Saccharomyces cerevisiae were studied by means of the disc diffusion.The minimum inhibitory concentration（MIC）was analyzed by tube nephelometry.Results：Centipeda ethanol extractions have bacteriostasis except to Shigella bacteria，Pseudomonas aeruginosa，Saccharomyces cerevisiae and have significant antibacterial activity to staphylococcus aureus.ConclusionCentipeda：minima has better bacteriostasis effect，and has great advantages in the clinical antibacterial anti－inflammatory.
Centipeda minima；Alcohol extract；antibacterial activity
R284.1
A
1007－8517（2013）14－0028－02
2013.05.23）
李吉华 （1965－），男，现任山东中医药大学实验室管理处处长、实验中心主任，副主任药师。主要研究方向为中药制剂和药物成分分析。Email：ljh＿sdutcm＠126.com
