马齿苋提取液抗磷酸组胺致大鼠足痒阈实验研究

胡一梅 钟振东

1.成都中医药大学临床医学院，四川 成都 610075;2.四川省医学科学院·四川省人民医院，四川 成都 610072

急性湿疹是临床常见的皮肤病，发病率高，因其常伴有瘙痒症状，所以严重影响患者生活质量。在西药的外用品中，主要集中在激素和抗组胺类药物的对症治疗，但急性湿疹的发病机制复杂，加上这类药物反复使用的副作用较明显，如何合理有效的控制瘙痒成为目前临床主要用药思路和和研究方向，而研究疗效肯定且副作用较小的中医药的外用药品的研发就成为了临床的迫切需求。

临床上使用马齿苋提取液治疗急慢性湿疹收到显著疗效，副作用少，值得临床推广应用［1］，但我们必须对马齿苋提取物的作用机制有足够的认识，才能够更好的应用于临床。本实验采用大鼠磷酸组胺致痒法，观察马齿苋提取液对大鼠足痒阈的影响，探讨马齿苋提取液对急性湿疹的止痒作用，并为进一步药学研究提供部分实验依据。

1 实验材料

1.1 实验动物 SD大鼠，SPF级，♂，体重180～220g，由成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物合格证号: scxk(111)2008－24。

实验动物按4只/笼饲养于四川省医学科学院·四川省人民医院屏障级实验动物实验室，独立通气笼具 (Inde-Pendent Ventilative Cage，IVC)系统内。该IVC系统的使用许可证号:109(2006年核发，使用期5年)。饲养温度: 22±1℃，湿度:59% ～61%，每天光照与黑暗时间各为12h。所用笼具、饲料、垫料、饮水均高压灭菌 (15磅、20min)。实验期间的灌胃、换水、添加饲料等操作均在超净工作台内进行，由专人管理。

1.2 受试药物 ▲马齿苋提取液:新鲜马齿苋茎叶约500g，用自来水洗净泥沙及杂草，再用蒸馏水浸泡冲洗3次，每次5min;取出放置于消毒过的手术隔离单上晾干;放于消毒柜内，用巴氏低温消毒法消毒 45min;榨汁机用75% 酒精消毒后，用蒸馏水反复冲洗3次;将新鲜马齿苋约500g，放于榨汁机内榨取约400mL新鲜马齿苋粗汁;用无菌纱布5层过滤，获得浅绿色马齿苋提取液，盛放在消毒处理的玻璃瓶内，置于7℃保存。

▲组胺磷酸盐:批号F20080505，国药集团化学试剂有限公司

▲阳性药:复方黄柏液，功能主治:神经性皮炎、接触性皮炎、慢性湿疹等。用法用量:外用，一日1～2次，取少量涂于患处，轻柔片刻。江西康瑞堂实业有限公司生产，生产批号:WS3－517(Z－076)－2002(Z)。［2］

2 实验方法

2.1 实验分组 取大鼠50只，随机分为5组即正常对照组，阳性对照组，马齿苋低剂量组、中剂量组、高剂量组。把临床成人用药剂量的1、2、4倍分别按“人和动物间按体表面积折算的等效剂量比率表”折算成大鼠用量的高、中、低三个剂量组。成人的体重按70kg，人用临床剂量为每日生药1.4mg/kg计算。马齿苋提取物高 (4倍等效量)、中(2倍等效量)、低(等效量)3个剂量组。故低剂量组给药 0.008mg/kg，中剂量为 0.016mg/kg，高剂量为0.032mg/kg。

2.2 造模、给药 各组按规定的剂量外用给药，正常对照组组给予等量的蒸馏水，每组都外用相应药物一次，0.lml/足，每天二次，连续三天。实验当日，用O号砂纸擦伤大鼠剃毛处，擦任程度以损伤表皮、不伤真皮、皮肤轻度渗血为度，面积约1cm2，局部再涂各组相应药物1次，末次涂药后 10min，开始于创面处滴 0.01%磷酸组胺每只0.05mL，此后每隔 3min依 0.01%，0.02%，0.03%，0.04%…浓度递增，每次均为每只0.05mL，每一浓度滴加后观察3min内大鼠是否回头舔右后足背，如未出现舔右后足背现象，则继续滴加下一较高浓度磷酸组胺溶液，直至出现舔右后足背现象为止，以此时所给子的磷酸组胺总量为致痒阈，若磷酸组胺溶液浓度提高到0.3%时大鼠仍未出现舔右后足背反应则不再增加浓度，按此时磷酸组胺总量计算致痒阂［3］。

2.3 观察指标 观察并记录各组大鼠回头舔足时所予以的磷酸组胺不同浓度的滴数及磷酸组胺的总量。

3 统计方法

实验数据用SPSS18.0统计软件进行统计分析。计量数据均用(±s)表示，组间比较用t检验;计数资料用χ2检验。

4 结果

由表1可知，与空白对照组比较，马齿苋提取物高、中剂量组大鼠致痒阈均有极显著增大 (P＜0.01)，低剂量组有显著增大 (P＜0.05)，表明马齿苋具有显著止痒作用。

表1 药物对大鼠致痒阈的影响 (±s，n=10)

表1 药物对大鼠致痒阈的影响 (±s，n=10)

与正常对照组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与阳性对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

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5 讨论

急性湿疹的发病是一个急性过程，可发生于身体任部位，全身泛发或局限于一处，常对称分布。皮疹呈多形性，集成片状，边界不清。病处轻度肿胀，红斑，丘疹，水疱，瘙痒明显，因搔抓常引起糜烂结痂等，渗出明显。有部分研究表明［4］，皮肤局限性瘙痒是由多种因素相互作用的结果，许多炎性介质和特异的神经传导通路参与瘙痒的发生，因此，局部抗炎与神经传导调控对治疗局限性皮肤瘙痒有积极作用。

《本草拾遗》中描述马齿苋有“诸肿揍疣目，捣揩之;破壬痫，止消渴。”之功效，即清热解毒，散血消肿。陆霄鹤［5］等人也曾报道，灌胃给予10，20g/kg马齿苋水提取物可明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，20g/kg马齿苋水提取物可抑制巴豆油所致小鼠耳廓肿胀，提示马齿苋水提取物可有效抑制二甲苯及巴豆油所致小鼠耳廓肿胀，具有消炎作用。现代药理分析，马齿苋含有去甲肾上腺素，与血管内皮α受体结合，使血管收缩，血流量减少，从而减少动脉性充血，静脉血管显著收缩可使血管外周阻力增加，亦可减轻瘀血，抑制毛细血管通透性，从而抑制炎性肿胀［6］。这些报道部分证明了马齿苋提取物可以有效治疗急性湿疹的机理。

本实验结果表明，马齿苋提取液具有显著的止痒作用。因此，我们推测其止痒作用机理可能就是通过抗炎、抗过敏作用而起到调节神经传导通路的作用。目前大量急性湿疹的止痒作用研究是针对马齿苋溶液的临床试验展开，我们的下一步实验将会从细胞学角度来探讨其止痒的机制，从药理学角度出发，将其与抗过敏机制进行研究及论述。

［1］胡一梅.鲜马齿苋治疗急性湿疹40例［J］.中医杂志，2012，53 (18):1592－1593.

［2］冯桂英，李子英.黄柏洗剂外用治疗湿疹及护理［J］.中国民间疗法，2007，15(12).

［3］王彦礼，包旭宏，王怡薇.青鹏膏剂对大鼠瘙痒及湿疹模型的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17(14):233－236.

［4］尹斌，周光.华佗外敷麻药神方加减方对磷酸组胺大鼠致痒阈的影响研究［J］.新疆中医药，2011，29(1):14－15.

［5］陆霄鹤等.马齿苋及鱼腥草水提取液体外抑菌实验［J］.抗感染药学，2010，7(1).

［6］范红艳，关丽萍，张红英.马齿苋水提取物对小鼠急性炎症的影响［J］.延边大学医学学报，2006，29(3).