破格救心汤对离体蟾蜍心脏功能的影响

李旭伟 姜黛雪 王 欢 王嘉聆 周 伟 应 淞 王飞鸿

川北医学院基础医学院机能实验中心，四川 南充 637000

破格救心汤为山西省中医名家李可老先生经40年临证实践创制，本方重用附子破阴回阳;人参大补元气，滋阴和阳，益气生津;干姜通心助阳，辅助附子回阳救逆之功，减低附子毒性;大量甘草既能解附子之毒，蜜炙后又具扶正作用;山茱萸肉能收敛元气，固摄滑脱，兼具条畅之性;龙骨、牡蛎二药有固肾摄精，收敛元气之功;活磁石吸纳上下，维系阴阳;麝香为急救醒神要药，组方严谨，诸药合用，主要用于难治性心力衰竭的治疗，具有回阳救逆、扶正固脱、活血化瘀、开窍醒神之功［1］。本试验通过观察破格救心汤对离体蟾蜍心脏功能的影响，旨在提示其对心脏作用规律，为临床应用和新药开发提供试验数据。

1 材料与方法

1.1 动物 选用体重 (170±10)g中华大蟾蜍8只，雌雄兼用，由川北医学院实验动物中心提供。

1.2 仪器 联想启天M7370电子计算机;BL－420F生物机能实验系统 (四川成都泰盟科技有限公司);JH－2型张力传感器(北京航空医学研究所);电子天平 (上海力能电子仪器公司)。

1.3 药材与试剂 任氏液:每1000ml中含NaC1 6.5g、KC1 0.14g、NaH2PO40.01g、CaCl20.12g、NaHC030.20g、葡萄糖2.0g，所用试剂均为化学纯，购自成都科龙化工试剂厂;破格救心汤:熟附子60g，干姜60g，炙甘草60g，高丽参30g，山茱萸肉60g，生龙骨30g，生杜蛎粉30g，活磁石粉30g，麝香0.5g。购于川北医学院附属医院，将上述药材置于砂锅中，加2000ml任氏液文火煮取两小时浓缩、过滤、定容至500ml(相当于0.12g.ml－1附子生药)，取50ml汤剂以任氏液分别稀释至0.015 g·ml－1，0.0075 g·ml－1，0.00375 g·ml－1，0.0019 g·ml－1，0.001 g·ml－1，备用。

1.4 离体蛙心标本的制备 采用斯氏法，取蟾蜍1只，破坏脑和脊髓，以四肢软软为度，仰卧固定于蛙板上，粗剪刀剪开腹胸部皮肤和肌肉，剪除胸骨，充分暴露心脏，蛙心直接结扎右主动脉，在主动脉干下穿一根线，打一松节作为备用，在左主动脉干远端穿线并结扎线扣。心脏插管:持眼科剪在左主动脉根部剪一“V”字形切口，左手将结扎线提起，右手将盛有任氏液的蛙心插管沿血管方向由切口插入，当插管头刚到动脉圆锥时，向右转动45℃左右至心室中央，并轻轻转动插管，左手松开结扎线将心脏固定，用食指轻轻抬起心脏，用右手将插管缓慢向前推进。待心室收缩主动脉瓣打开时插入心室，此时可见插管内液面上下浮动 (插管成功)，立即将备用线结扎在插管上并套在插管的侧钩上固定，剪断各血管使心脏离体，用新鲜任氏液冲洗插管3～5次，并保持蛙心套管内液面高度的恒定 (约2cm)［2］。

1.5 观察指标 采用BL－420F生物机能实验系统检测蛙心收缩力峰峰值及心率，记录实验数据。先在蛙心套管内加入2ml任氏液，观察离体蛙心在正常情况下的自主收缩5min，记录曲线以此作为对照，依次加入不同浓度药液2ml，观察并记录每次加药及冲洗后蛙心收缩力峰峰值及搏动频率变化。

1.6 统计学处理 应用SPSS 11.5统计软件，数据以 (±s)表示，组间比较用配对t检验。

2 实验结果

破格救心汤在高浓度0.015 g·ml－1时抑制心收缩力明显，具有统计学意义 (P＜0.05);而在低浓度0.0075 g· ml－1，0.00375 g·ml－1，0.0019 g·ml－1，0.001 g·ml－1时增强收缩力作用明显 (P＜0.05)，以0.00375 g·ml－1最为显著 (P＜0.01);在低浓度0.0075 g·ml－1，0.00375 g ·ml－1时，对心自律性正性影响较大，具有统计学意义，其他浓度差异未达统计意义，见表1。

表1 破格救心汤对离体蟾蜍心脏心率及收缩力的影响 (±s)

表1 破格救心汤对离体蟾蜍心脏心率及收缩力的影响 (±s)

*P＜0.05，＊＊p＜0.01;n=8。

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3 讨论

破格救心汤中重用君药附子，以达回阳救逆、助阳行水之功。历代医家对附子的运用总结了丰富经验，《神农本草经》、《伤寒论》、《伤寒六书》、《魏氏家藏方》、《本草汇言》对附子临床应用均有记载，李可名老中医经四十年实践创制破格救心汤亦重用制附子破阴回阳。

附子临床实践时应在辨证论治的基础上，准确把握影响附子毒性的诸多因素，控制煎煮时间、剂量、炮制方法、适应病症、配伍应用、服用方法等因素，才能安全有效地运用附子。附子主要含次乌头碱、乌头碱、新乌头碱、川乌碱甲、川乌碱乙等多种生物碱，其主要毒性成分为乌头碱，乌头碱对神经和心脏都有损害［3］。附子入汤剂宜先煎，久煎30～60min，乌头碱经加热水解后变为毒性较小的苯甲酰乌头胺，再继续水解则生成乌头原碱，有研究证实，乌头碱水解产物乌头原碱的毒性仅为原生物碱的1/2000～1/ 4000［4］。《中华人民共和国药典》(2005版)规定附子的用量为3～15 g，若因治疗需要可用至15～30g，而破格救心汤用量达30～200～300g，本研究表明附子以15g单剂一次服用为最佳(4200ml血液计)。

附子强心作用与去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱、氯化甲基多巴胺、尿嘧啶有密切关系［5］。其中以去甲乌药碱活性最强，将其稀释至10－9浓度，仍然体现强心作用，强心的主要机理是兴奋和激动β受体，小鼠动物实验表明去甲乌药碱对β受体有上调作用［6－7］。

破格救心汤始创于60年代初期，经40年临证实践，逐渐定型。本方脱胎于《伤寒论》四逆汤类方，四逆汤合参附龙牡救逆汤及张锡纯氏来复汤，破格重用附子、山萸肉加麝香而成。方中四逆汤为中医强心主剂，临床应用1700余年，救治心衰疗效卓著。心衰病人病情错综复杂，不但阳气衰微，而且阴液内竭，故加人参，成为四逆加人参汤，大补元气，滋阴和阳，益气生津，使本方更臻完善。历代用伤寒方，剂量过轻，主药附子，仅10g左右。之所以不敢重用附子，乃因畏惧附子之毒性。古今本草，已有定论，附子有大毒。但附子为强心主将，其毒性正是其起死回生药效之所在。当心衰垂危，病人全身功能衰竭，五脏六腑表里三焦，已被重重阴寒所困，生死存亡，系于一发之际，阳回则生，阳去则死。非破格重用附子纯阳之品，大辛大热之性，雷霆万均之力，不能斩关夺门，破阴回阳，挽救垂绝之生命［8］。

［1］陈南官，周智文，李建汉.不同附子剂量破格救心汤治疗难治性心衰的临床研究［J］.中国中医急症，2012，21(1):8－9.

［2］林平，攀慧，苏付荣.离体蛙心灌流实验方法的比较研究［J］.中国病理生理杂志，2005，21(7):1455－1456.

［3］黎明.中国医药指南杂志.附子的毒性与临床应用［J］.2011，9 (14):116－117.

［4］杜贵友，方文贤.有毒中药现代研究与合理应用［M］.北京:人民卫生出版社，2003:561－561.

［5］考玉萍，刘满军，袁秋贞.附子的化学成分与药理作用［J］.陕西中医，2010，31(12):1658－1660.

［6］向荣，徐江涛，易宁育.去甲乌药碱的药理作用与心脏β—AR关系的初步研究［J］.中国药理学通报，1995，11(2):113－115.

［7］周远鹏.附子及其主要成分的药理作用和毒性［J］.药学学报，1983，13(5):394－396..

［8］李可.李可老中医急危重症疑难病经验专辑［M］.太原:山西科学技术出版社，2004:1－17.