瑶药金线风提取物抗肿瘤成分筛选研究
2013-03-02兰太进李星宇文志云
刘 瑛 刘 元 兰太进 李星宇 文志云
1.广西中药质量标准研究重点实验室,广西 南宁 530022;2.广西壮族自治区中医药研究院,广西 南宁 530022
瑶药金线风为防已科轮环藤属植物粉叶轮环藤Cyeleahypo lauca(Schauer)Diels的干燥根,为传统瑶药“七十二风”中的“金线风”[1]。民间用于治疗喉痛、腹痛、毒蛇咬伤、疖痛等症[2]。根据其乙酸乙酯提取物中含有生物碱成分,本研究采用动物移植性肿瘤模型,通过灌胃给药途径,观察金线风乙酸乙酯提取物的体内抗肿瘤作用,为金线风抗肿瘤活性成分的提取及金线风的抗肿瘤作用研究提供药理学依据。
1 材料
1.1 药物 金线风乙酸乙酯提取物,每克膏含64.26g药材,试验时以5%吐温助溶配成所需浓度使用,由本院药理所提供。
1.2 瘤株 H22肝癌、S180肉瘤种鼠购自中山大学肿瘤研究所,本实验室传代保存。
1.3 动物 健康昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由广西医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK桂2009-0002。
1.4 试剂 环磷酰胺,Endoxan,Baxter Oncology GmbH,批号:20101023,规格0.2g/支。
2 方法[3]与结果
2.1 金线风提取物对小鼠移植肝癌 (H22)的抑制作用
2.1.1 方法 选取昆明种小鼠50只,随机分成5组:荷瘤对照组、溶媒组 (5%吐温)、环磷酰胺组 (20mg/kg)、金线风提取物高剂量组 (5.16g/kg)、金线风提取物低剂量组 (2.58g/kg),每组10只。无菌取腹腔内传代7天的H22肉瘤细胞,将细胞浓度调整为5×106/ml,按0.2ml/只接种于各组老鼠右腋皮下。接种24h后,各试验组按20ml/kg灌胃体积给予相应药物,荷瘤对照组给予生理盐水。连续给药7天,末次给药后3h,处死小鼠,剥离完整肿瘤组织,电子天平称量瘤体湿重,与荷瘤对照组比较,计算平均瘤重,用t检验进行统计分析。
2.1.2 结果 金线风提取物2.58g/kg对H22实体瘤有明显的抑制作用,见表1。
表1 金线风提取物对H22实体瘤的影响 (n=10,±s)
表1 金线风提取物对H22实体瘤的影响 (n=10,±s)
注:与荷瘤对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
?
2.2 金线风提取物对小鼠腹水瘤S180的抑瘤作用
2.2.1 方法 选取昆明种小鼠50只,随机分成5组:荷瘤对照组、溶媒组(5%吐温)、环磷酰胺组(20mg/kg)、金线风提取物高剂量组 (5.16g/kg)、金线风提取物低剂量组 (2.58g/kg),每组10只。无菌取腹腔内传代7天的S180肉瘤细胞,将细胞浓度调整为1×106/ml,各组老鼠按0.2ml/只进行腹腔注射。接种24h后,各试验组按20ml/kg灌胃给予相应药物,荷瘤对照组给予生理盐水。连续给药7天,停药后次日称重,试验观察直到小鼠死亡。每天固定时间检查死亡例数,确定其存活时间。各组试验小鼠全部死亡后,计算各组小鼠存活天数,与荷瘤对照组比较,用t检验进行统计分析。
2.2.2 结果 金线风提取物2.58g/kg能明显延长S180腹水癌小鼠的生存时间,见表2。
表2 金线风提取物对S180腹水瘤小鼠生存时间的影响 (n=10,±s)
表2 金线风提取物对S180腹水瘤小鼠生存时间的影响 (n=10,±s)
注:与荷瘤对照组比较,*P<0.05。
?
3 结论
本文首次用移植性动物模型对金线风提取物的体内抗肿瘤作用进行了探讨,结果显示,2.58g/kg金线风提取物经灌胃给药能明显抑制小鼠实体肝瘤H22的生长、延长S180腹水型小鼠的生存时间,为金线风的抗肿瘤作用研究提供了初步的实验数据,其抗肿瘤活性成分提取及筛选可进一步深入研究。
[1]戴斌,李钊东,丘翠嫦,等.“虎牛钻风”类传统瑶药的调查研究[J].中国民族民间医药杂志,1998,31(2):28~34.
[2]广西实用中草药新选,140页,1969.
[3]李仪奎,王钦茂.中药药理实验室方法学[M].上海:上海科技学技术出版社.1991:512~520.