罗田县两种金银花中绿原酸含量比较

向 福，郭文韬，袁 婷，张明菊，刘 亮，项 俊

(1.黄冈师范学院 经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室，湖北 黄州438000;2.中国长江三峡集团公司 中华鲟研究所，湖北 宜昌443100)

金银花(Lonicera JaponicaThunb)为忍冬科植物的花蕾，具有广泛的药用价值，可以清热解毒、凉血化淤，主治外感风热、瘟病初起、疮疡疔毒、红肿热痛、便脓血、增强免疫功能等。

湖北罗田县位于大别山南麓，具有典型的山地气候特征，野生金银花资源丰富。罗田金银花香气浓郁，有效成分高，获中国地理标志产品保护。截至2011 年，罗田金银花种植面积已达2.1 万亩，金银花产业前景看好。

绿原酸是中国药典规定的金银花质量控制指标之一。笔者搜集了罗田的两种金银花种质资源，采用紫外分光光度法测定比较花茎叶不同部位有效成分绿原酸的含量，为罗田金银花资源的综合开发利用提供参考。

1 仪器、试剂和材料

Varian Cary 100 Scan 紫外可见分光光度计(美国Varian 公司)，Ax －205 Mettler Toledo 电子天平(瑞士梅特勒－托利多集团)，SHZ－III 型真空泵(上海亚荣生化仪器厂)。

绿原酸对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号20120117)，无水乙醇(天津市凯通化学试剂有限公司)。

罗田金银花和大地金银花是罗田县目前种植的两种金银花种质资源，二者的花茎叶分别采自罗田栗子坳种植基地和三里畈种植基地。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称定绿原酸对照品5 mg，加70%乙醇混匀定容到10 ml 容量瓶，即为对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备

取已烘至恒重的花茎叶研碎成粉末，准确称取2.5 g 各加入250 ml 圆底烧瓶中，加入70%乙醇50 ml，回流提取45 min，过滤，重复提取三次，合并滤液，定容至250 ml 容量瓶，即为供试样品溶液。

2.3 标准曲线的绘制

Cary 100 扫描对照品溶液确定检测波长为330 nm。在此波长下测定5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml、30μg/ml、35μg/ml、40μg/ml、45μg/ml 等不同浓度绿原酸的吸光度。分析结果表明，绿原酸在5μg/ml ～45μg/ml 范围呈现良好线性关系，回归方程为:Y=0.0528X+0.0375，R2=0.999。

2.4 精密度试验

取浓度为10.90 g/ml 的标准品溶液在波长330 nm 测定吸光度，重复5 次，结果见表1。

表1 精密度试验结果

2.5 样品含量测定

取两种金银花材料的花茎叶供试品溶液稀释10 倍、20 倍和50 倍后在330 nm 下测定吸光度，代入线性方程求的各自的绿原酸含量。结果见表2 和表3。

表2 罗田金银花中绿原酸含量

表3 大地金银花中绿原酸含量

植物体内绿原酸的生物合成需要EMA 途径和PPP 途径提供中间体［1］，不同组织器官和不同发育时期代谢能力的差异导致了绿原酸含量的不同，均以幼嫩、代谢旺盛者绿原酸含量高［2］。花属生殖器官，代谢旺盛;叶属营养器官，产物大量积累，代谢活跃;茎为运输器官，代谢程度低。同样地，顶叶属新叶，生命代谢活动较中叶和底叶旺盛;花半开时代谢较全开时更为旺盛。因此，很多研究认为，植物体内绿原酸含量是花＞叶＞茎［2］。但从表2 和表3 中可知两种金银花中，叶片绿原酸含量最高，花次之，茎中绿原酸含量最低，并且半开花中绿原酸含量比全开花高，顶叶中绿原酸较中叶和底叶略高。事实上，人们研究发现金银花叶和金银花在临床上均有清热解毒之功效，金银花的茎叶，尤其是叶的有效成分不亚于金银花［3］，而叶中绿原酸含量以枝端幼嫩小叶为最高［4］，花中绿原酸含量以全开花较低［5］。另外，种质、产地的不同也导致了绿原酸含量的差异。研究表明，据研究，山东、河南等地金银花叶中的绿原酸含量几乎超过了同一时期的金银花［4］。罗田金银花叶中绿原酸含量高达7.59%，相当于花中绿原酸含量的2.5 倍。从山东引种到罗田的大地金银花叶中绿原酸含量与罗田金银花差异不大，但花中绿原酸含量远高于罗田金银花。

［1］ 陈绍华，王亚琴，罗立新.天然产物绿原酸的研究进展［J］.食品科技，2008，33(2):195 －199.

［2］ 吴世福，张永清.影响金银花植株体内绿原酸含量的因素［J］.山东医药工业，2003，22(2):32 －34.

［3］ 李玉贤，杨怀霞，武雪芬.金银花茎叶药用价值概述［J］.河南中医药学刊，2000，15(3):23 －24.

［4］ 林慧彬，彭广芳，钟方晓，等.山东金银花叶的质量研究［J］.时珍国医国药，1997，8(2):125.

［5］ 耿世磊，宁熙平，吴鸿，等.山银花不同发育阶段花结构与绿原酸含量变化关系研究［J］. 云南植物研究，2005，27(3):279 －287.