中药有效成分抗心肌缺血作用概述

2013-02-20王新月张永和

吉林中医药 2013年6期

关键词：环法动物模型黄酮

王新月 ,张倩 ,张永和*

(1.长春中医药大学，中西医结合基础，吉林长春 130021；2.汕头大学医学院第一附属医院药学部，广东汕头 515041)

中药有效成分抗心肌缺血作用概述

王新月1,张倩2,张永和1*

(1.长春中医药大学，中西医结合基础，吉林长春 130021；2.汕头大学医学院第一附属医院药学部，广东汕头 515041)

心肌缺血是冠心病基本的病理生理过程，急性发作死亡率高。中药蕴藏了大量具有极高药用价值的活性物质。研究表明，刺五加叶皂苷，羟基红花黄色素A，淫羊藿总黄酮注射液，丹参、红花，白藜芦醇，银杏叶提取物，二参汤，玉米须总黄酮，心肌缺血实验动物模型主法，急性心肌缺血模型的制备方法，慢性心肌缺血动物模型的制备方法，离体心肌缺血模型等对动物心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。并总结了复制心肌缺血动物模型的关键技术，以其作为中医药冠心病研究提供一项基础研究资料。

中药；心肌缺血；疾病动物模型

近年来，研究人员在中药及其有效成分治疗心血管疾病的研究方面做了大量的探索，是目前心血管研究领域的主要课题之一[1]。其中，冠心病作为严重危害我国广大人群健康的因素[2]成为主要的研究对象，心肌缺血是冠心病基本的病理生理过程，急性发作死亡率高，所以寻找具有抗心肌缺血作用的中药有效成分、利用复制心肌缺血动物模型的手段对其进行药理学研究是冠心病的治疗方法及其机制研究的关键技术之一。本文针对上述问题，对目前已进行过抗心肌缺血活性研究的中药有效成分及复制心肌缺血动物模型的方法进行概述，以期作为中医药治疗冠心病研究领域的一项基础资料。

1 抗心肌缺血中药有效成分研究

1.1 刺五加叶皂苷睢大员等[3]采用在体大鼠结扎冠状动脉前降支造成心肌缺血再灌注模型，研究刺五加叶皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，得出结论：刺五加叶皂苷 (ASS)对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显保护作用，可能与其增强抗氧化酶活性，减少自由基对心肌的氧化损伤，纠正心肌缺血时非梗死区游离脂肪酸(FFA)代谢紊乱，减少内源性血管活性物质血浆内皮素(ET)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)释放，纠正前列环素(PGI2)及血栓素A2(TXA2)失衡等机制有关。

1.2 羟基红花黄色素A李欣志等[4]研究了羟基红花黄色素A(HSYA)对犬急性心肌缺血的保护作用。得出HSYA可以抑制ET的释放，增加心肌血流量，改善心肌氧代谢，抑制心肌缺血损伤的结论。

1.3 淫羊藿总黄酮注射液黄秀兰等[5]对淫羊藿总黄酮注射液(epimediumflavonoidsinjection，EFI)对冠脉结扎所致大鼠抗心肌缺血的作用进行了实验研究，得出EFI对冠脉结扎致大鼠心肌缺血具有保护作用，且起效快。

1.4 丹参、红花刘剑刚等[6]将丹参、红花实现高效及高通量的组分分离与表征，观察其水溶性有效组分及其配伍对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响。作者认为丹参、红花水溶性组分对I/R损伤后的指标改善方面侧重面有所不同，配伍后作用加强，从而抑制血小板聚集，防治血栓形成，对缺血后再灌注损伤的心肌有保护作用。

1.5 白藜芦醇邬云斌等[7]研究了白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用，得出结论：白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与Sirt-P53通路有关。

1.6 银杏叶提取物谢咪雪等[8]总结出银杏叶提取物具有清除自由基、拮抗血小板激活因子、抑制白细胞激活、保护血管内皮细胞、调节心肌内分泌因子的作用，能够改善缺血心肌的功能。

1.7 二参汤李欣等[9]通过观察二参汤对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响实验中，得出二参汤可拮抗心肌细胞凋亡，通过调节BCL-2/BAX之间的平衡，调整细胞凋亡基因平衡，抑制过度凋亡，保护心肌细胞，达到治疗冠心病作用的结论。

1.8 玉米须总黄酮黄晓巍等[10]通过注射链尿佐菌素及垂体后叶素复制糖尿病合并心肌缺血动物模型，观察玉米须总黄酮对糖尿病合并心肌缺血大鼠血糖、心电图及全血黏度的影响，结果表明，玉米须总黄酮能降低糖尿病合并心肌缺血大鼠血糖，改善动物心肌缺血程度，并可降低模型动物血液高黏状态，改善血液循环，有利于缺血心肌的血液供应。

2 心肌缺血实验动物模型建立方法

2.1 急性心肌缺血模型的制备方法

2.1.1 开胸手术法制备急性心肌缺血模型 1)冠脉结扎法。在冠脉左前降支中段穿一丝线以备结扎，或用动脉夹临时夹闭阻断，通过结扎冠脉，于左室前外侧壁形成缺血区域[11]。选用犬及猪作为常用动物，选用大鼠等体积小的动物复制此模型技术难度较大、重现性差、成功率低且所需样本较多。周文武等[12]认为，一次结扎不成功，重复结扎会加重心肌损伤从而影响模型的稳定性，导致实验结果有偏差。2)微量直流电刺激法。将弧型针状电极(刺激电极)置于分离的冠脉下，另一电极(参考电极)距离刺激电极0.6mm处置于心外膜下，两电极分别连接电刺激仪的正负极，以2.5V、1mA直流电刺激冠状动脉30min左右，冠脉内形成血栓，阻断了冠脉血流，从而形成心肌缺血。

2.1.2 闭胸法制备心肌缺血模型 1)球囊堵塞法。球囊堵塞法是通过加压后的球囊直接阻断冠状血流，持续一段时间后，造成堵塞血管远端供血区的心肌坏死。李可等[13]通过穿刺犬颈总动脉，在透视监视下插入Cobra造影导管至冠脉主干造影，成功后在导丝引导下置入球囊至前降支，缺血预适用后充盈球囊堵塞冠脉，于2h后撤除球囊，建立急性心肌缺血再灌注动物模型。2)血栓堵塞法。冠状动脉血栓形成是急性心肌梗死的重要的病因之一，利用血栓堵塞法建立符合临床特征的急性心肌缺血动物模型，从而达到疾病模型动物“拟临床研究”的目的，对于研究心肌缺血发生、发展的病理生理机制及防治措施等具有重要意义。刘建勋等[14]采用心导管介入技术，经颈总动脉在LAD内置入导引导管，注入自体血栓，首次在不开胸的前提下应用心导管介入血栓法成功制备中国实验小型猪心肌缺血模型。

2.2 慢性心肌缺血动物模型的制备方法

2.2.1 收缩环法较为常用的收缩环法主要是Ameroid收缩环法。许文玉等[15]通过手术分离猪左冠状动脉前降支第一间隔支，并于其起始部远端套入1枚Ameroid收缩环，复制慢性心肌缺血血瘀证动物模型。此外，收缩环法还包有Delran收缩环法、水化收缩环法以及纤维素样膨胀环法等方法。

2.2.2 压迫法主要包括气囊压迫法和水囊压迫法2种。气囊压迫环是由有机玻璃外套和可膨胀的乳胶小囊构成，小囊一端与塑料管相连，经塑料管注入蒸馏水使小囊膨胀以压迫套内的血管，压力除去时，小囊恢复原状，可用于心肌缺血或再灌注实验[16]。将气囊压迫环固定在冠脉的适当部位，然后缝合心包，放置心包膜电极，气囊的导管和电极的导线分别穿过胸壁导出皮外。实验时可以注入蒸馏水，使气囊膨胀，压迫冠脉造成心肌缺血模型。

2.2.3 冠脉栓塞法张庆勇等[17]应用微导管介入技术，将10只巴马系小型猪经导管选择性的于前降支内注入15×104个直径为45μm的微栓塞球，使冠状动脉微血管慢性栓塞，建立了创伤小、死亡率低并可长期随访观察的小型猪冠状动脉微栓塞模型，是临床研究微血管栓塞发病机制的理想动物模型。

2.3 离体心肌缺血模型此造模方法原理是通过结扎离体心脏冠状动脉、离体心脏低氧或无氧灌流法造成心肌缺血，并建立缺血模型。离体心肌缺血模型可以排除机体代谢的影响，更确切的反映心肌耗氧情况，并且易于控制给药剂量与给药尝试，比较适合于研究心肌缺血过程中的代谢情况。[18]

心血管疾病是当今威胁人类生命健康的重大疾病之一，而心肌缺血性疾病又是心血管疾病的焦点。近年来的研究证明，具有抗心肌缺血作用的中药有效成分，在治疗冠心病等心血管疾病方面发挥了特有的优势，其巨大潜力有待于进一步开发利用。

[1]KabbaniSS,WatkinsMW,HolochPA,etal.Plateletreactivityincoronaryostialblood:areflectionofthethromboticstateaccompanyingplaqueruptureandoftheadequacyofanti-thrombotictherapy[J].J.Thrombolysis,2001,12(2):171-176.

[2]杨艺.浅析冠心病的病因及治疗[J].中外医疗,2010,29(14):182.

[3]睢大员,曲绍春,于小风，等.刺五加叶皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J].中国中药杂志,2004,29(1):71-73.

[4]李欣志,刘建勋,尚晓泓，等.羟基红花黄色素A对犬急性心肌缺血的保护作用[J].中国药理学通报,2006,22(5):533-537.

[5]黄秀兰,王伟,周亚伟.淫羊藿总黄酮注射液对大鼠实验性心肌缺血的保护作用[J].中国中西医结合杂志,2006,26(1):68-71.

[6]刘剑刚,张大武,李婕，等.丹参、红花水溶性组分及配伍对大鼠心肌缺血/再灌注损伤作用的实验研究[J].中国中药杂志,2011,36(2):189-194.

[7]邬云斌,刘新伟,何东伟，等.白藜芦醇在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及机制[J].中成药,2012,34(5):811.

[8]谢咪雪,蒋琦,陈冬儿，等.银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究进展[J].浙江中医药大学学报,2012,36(2):230-232.

[9]李欣,周丽雅.二参汤对急性心肌缺血模型大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究[J].吉林中医药,2012,32(4):80-81.

[10]黄晓巍,卢彤宇,欧喜燕，等.玉米须总黄酮对糖尿病合并心肌缺血大鼠血糖、心电图及全血黏度的影响[J].吉林中医药,2009,29(12):70-71.

[11]欧喜燕,许文玉,张永和.复方养心滴丸对犬急性心肌缺血模型的影响[J].吉林中医药,2005,25(2):47-48.

[12]周文武,林玲,陈军，等.冠脉结扎法制做大鼠心肌缺血模型[J].中国实验动物学报,2004,12(4):226-230.

[13]李可,刘卫金,邹利光，等.闭胸式冠状动脉插管法建立犬急性心肌缺血模型[J].第三军医大学学报,2007,29(16):1630-1631.