探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用

王金梅

（吉林省四平市传染病医院 检验科 ，吉林 四平 136000）

探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用

王金梅

（吉林省四平市传染病医院 检验科 ，吉林 四平 136000）

目的 分析并探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用。方法 首先要对患者采用血清学标志物这种方法检测，进一步确定他是乙型肝炎的患者。再次就是选择500例患者进行检测，这样有利于保证实验的准确性。结果 实时荧光PCR方法检测的乙肝病毒DNA数据与采用血清学标志物方法检测的乙肝病毒数据大致一致，但是采用荧光PCR方法检测的病毒DNA数据更准确，更详细。大三阳、小三阳患者血清中PCR的结果拷贝数均较高，而HbsAb（+）或HbsAg（-）的标本PCR有个别阳性结果[2]。结论 实时荧光PCR法可以准确检测出乙肝病毒和其详细数据，这说明实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA具有良好的临床意义，值得临床使用。

乙肝病毒；血清学；拷贝数目

以前要想检测患者是否是乙性肝炎病毒携带者，大部分都是采用血清学标志法，要采集患者的血液进行检验，如果操作适当不当，还容易造成工作人员也感染乙肝病毒。所以各个国家的医学专家积极寻找其他可以检测乙型肝炎病毒DNA的方法，最终发现荧光PCR方法可以得到准确的乙型肝炎病毒DNA的数据，此文章就是在探讨和分析实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

首先选择可能携带乙型肝炎的患者，这些患者最好是年龄跨度较大，在15～70岁的年龄段中都有患者存在，这样更有利于实验的准确性，防止出现偏差。然后采用血清学标志法进一步确定他们是乙肝患者，这样可以使实验结果的偏差较小。最重要的是要记录好乙型肝炎患者中乙肝病毒DNA的数据，并且要注意保存仔细。然后将这500位乙肝病毒携带者和患者，再用荧光PCR的方法对其进行检测，然后仔细记录这些数据。最后把用血清学标志法检验的乙肝病毒DNA数据与用荧光PCR方法检验的乙肝病毒DNA数据做比较，然后把比较的数据进行分析，并用论文的形式呈现出来。

1.2 方法

将用血清学标志法检验的乙肝病毒DNA数据作为对照组，然后把用荧光PCR的方法检验的乙肝病毒DNA数据作为观察组。然后把观察组与对照组的数据做比较，发现观察组即用荧光PCR的方法检验乙肝病毒DNA的数据与对照组里的数据差别不大，而且从观察组数据里发现，用荧光PCR方法检验的数据中PCR拷贝数较高的是大三阳者和小三阳者，而HbsAg（-）和HbsAb（+）的PCR中有阳性的因素，拷贝数较低。

1.3 疗效标准

显效：观察组即用荧光PCR方法检测乙肝病毒的数据与对照组即用最普通的检验方法血清学标志法检验的乙肝病毒数据作比较，发现差别不大，而且用荧光PCR方法检测的乙肝病毒数据更加准确，PCR拷贝数较高的是大三阳者和小三阳者。效果不明显：观察组即用荧光PCR方法检测乙肝病毒的数据与对照组即用最普通的检验方法血清学标志法检验的乙肝病毒数据做比较，发现差别效果较小，而且荧光PCR方法在准确度上还有其他数据中也没有突出的表现。无效：观察组即用荧光PCR方法检测乙肝病毒的数据与对照组即用最普通的检验方法血清学标志法检验的乙肝病毒数据做比较，发现观察组的数据与对照组的数据差别较大，且对照组的数据不及观察组的数据准确。

1.4 统计学分析

采用spss10.0统计学软件对所得数据进行t检验，对于用荧光PCR方法检测的乙肝病毒的DNA数据与用血清学标志法检测出的乙肝病毒DNA数据进行统计学分析，如果差异较大，即P＜0.05.则有统计学意义。如果两者的数据差异较小，即P＞0.05，则没有统计学意义。

2 结 果

通过实验，发现实时荧光PCR方法检验乙肝病毒的DNA数据很准确，有良好的临床意义。且疗效标准是显效，即用荧光PCR 方法检测的乙肝病毒DNA数据与用普通方法血清学标志法提供的乙型肝炎病毒DNA数据相似，且在用荧光PCR方法检测的数据更加准确。比如数据显示，HbsAg（+）、HbcAb（+）即大三阳中的阳性率达到了97%，HbsAg（+）、HbeAb（+）、HbcAb（+）即小三阳的阳性率则是70%，而HbsAg（-）、HbsAb（-）、HbeAg（-）、HbeAb（-）、HbcAb（-）的阳性率则是2.2%。这充分证明了实时荧光PCR方法检验肝病毒的DNA具有良好的临床效果，值得临床应用。

3 讨 论

乙肝是乙型病毒性肝炎的简称[1]，它属于内科中的消化内科，发病的部位主要是人们的肝脏，是人们至今都非常担心的一种病症[2]。因为乙肝是一种具有严重传染性的疾病，他的传染途径主要有血液传播，所以要杜绝接触到乙肝患者的血液；母婴传播，所以国家规定乙肝患者不能进行生育，以防下一代也成为乙肝患者；性传播、皮肤黏膜破损传播都是乙肝传染的主要途径。乙肝根据病程的长短也分为急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎，从字面意思来了解，急性乙型肝炎比慢性乙型肝炎更可怕，甚至会危及到人的性命。乙型病毒性肝炎根据病情的轻重也可以分成乙肝携带者、重型肝炎患者、活动性乙型肝炎患者、肝炎肝硬化患者等。

这个实验充分证明了实时荧光PCR方法检测乙肝病毒DNA在临床中有重要的意义，相比运用血清学标志法来说[3]，测出的数据更加准确，内容更加全面，从而为研究乙型病毒型肝炎的其他方面做了充分的准备。所以，实时荧光PCR方法可以进行临床应用。

[1] 黄惠宜.250例慢性乙型肝炎患者的HBVDNA、HBsAg、HBeAg与HBVpreS1-Ag临床关系的探讨[A].第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C].2004.

[2] 郭亚光,楼大勇.乙肝前S1抗原与HBV-DNA、HBe Ag(HBeAb)相关性的研究[J].安徽医药,2007,11(5):444.

[3] 丁远杰.实时荧光PCR检测转基因农产品的研究[D].长沙:湖南农业大学,2004.

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1671-8194（2013）25-0173-01