猪苓多糖在血液透析患者乙肝疫苗免疫接种中的应用研究

陶 娟李 涛薛国平余俊文

（1 广东省佛山市南海区第七人民医院，广东 佛山 528247；2 佛山市中医院，广东 佛山 528000）

猪苓多糖在血液透析患者乙肝疫苗免疫接种中的应用研究

陶 娟1李 涛1薛国平1余俊文2

（1 广东省佛山市南海区第七人民医院，广东 佛山 528247；2 佛山市中医院，广东 佛山 528000）

目的 探讨猪苓多糖能否作为降低维持性血液透析（MHD）患者乙肝感染率的有效药物。方法 82例MHD患者分为实验组和对照组，实验组行猪苓多糖联合乙肝疫苗接种，对照组单用乙肝疫苗接种，观察接种后1个月、12个月时两组患者血清HBsAb的阳性率及接种后6个月、12个月时两组患者的乙肝感染率。结果 接种后实验组患者血清HBsAb的阳性率明显较对照组高、乙肝感染率明显较对照组低。结论 猪苓多糖可以作为降低MHD患者乙肝感染率的有效药物。

猪苓多糖；维持性血液透析；乙肝疫苗；免疫接种

维持性血液透析（MHD）是慢性肾功能衰竭替代治疗方法之一，随着技术的进步，血液透析患者越来越多，存活时间不断延长。由于免疫功能低下、反复多次接受输血、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性与HBsAg阴性的患者同室，导致MHD患者成为乙型肝炎病毒（HBV）感染的高危人群。通过临床统计，约有60%的MHD患者成为慢性携带者，同时这些患者又成为透析中心内患者与患者、患者与医务人员之间交叉感染的主要传染源，因此有效的免疫防护至关重要。对HBV感染高危人群进行乙型肝炎病毒疫苗接种安全、有效，可明显降低HBV感染率。临床发现，MHD患者注射乙肝疫苗后抗HBs抗体（HBsAb）阳转率远低于健康人群。因此成功接种乙肝疫苗对于MHD患者具有巨大的临床意义。本研究旨在观察猪苓多糖能否提高MHD患者乙肝疫苗接种后的血清阳转率，以探讨猪苓多糖能否作为降低MHD患者乙肝感染率的有效药物。

1 材料与方法

1.1 研究对象及分组

选择2010年7月至2011年6月在广东省佛山市南海区第七人民医院及佛山中医院行MHD的患者82人，入选条件：既往未接受乙肝疫苗免疫接种或乙肝血清学指标阴性。其中男48人，女34人，平均年龄（46.27±4.29）岁，病程3～8年，每周透析2～3次。所有患者随机分为实验组和对照组，均接受重组乙肝疫苗免疫接种，接种剂量为20微克，按0、1、2、6月加强方案于前臂三角肌内注射。实验组患者接种前10d起肌内注射猪苓多糖40mg/次，1次/d，接种后继续用10d；对照组患者接种前10d起肌内注射生理盐水4mL，1次/d，接种后继续用10d；接种三针前后均采用此方案。

1.2 检测方法

1.2.1 抗HBs抗体阳性率测定

乙肝疫苗接种最后一针后1个月、12个月，采取患者外周血，时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）法检测血清HBsAb滴度。时间分辨荧光免疫分析仪及配套检测试剂由广州市达瑞抗体工程技术有限公司提供。HBsAb＞10mIU/mL提示乙肝表面抗体阳性。

1.2.2 乙型肝炎感染率测定

乙肝疫苗接种最后一针后6个月、12个月抽取患者外周血，ELISA法检测乙肝两对半，荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测免疫接种后患者HBV-DNA。FQ-PCR试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供，扩增仪为Roche LightCycler480实时荧光定量PCR仪，HBV-DNA≥1000IU/mL提示患者存在乙肝病毒感染。

1.2.3 统计方法

对计数资料行χ2检验。

2 结 果

2.1 患者一般情况

所有MHD患者注射乙肝疫苗后均无明显不良反应，观察期间有两名患者死亡，经证实死于心血管意外，另有1名患者失访，达到观察终点时共有79名患者，其中实验组40人，对照组39人。

2.2 猪苓多糖提高MHD患者乙肝接种的阳转率

实验组患者HBsAb阳性率72.5%，对照组43.6%，明显高于对照组（P＜0.05），两组患者在最后一针接种后12个月时HBsAb阳性率：实验组67.5%，对照组28.2%，均较接种后1个月时降低，且对照组降低较明显（P＜0.05）。

2.3 猪苓多糖降低乙肝疫苗接种后乙型肝炎感染率

乙肝疫苗接种后，实验组患者乙肝表面标志阳性率低于对照组（P＜0.05）；最后一针后6个月，对照组患者出现1例HBVDNA阳性，12个月后增加1例，而实验组在接种后12个月时仅发现1例HBV-DNA阳性，两组HBV-DNA阳性率无统计学差异（P＞0.05）。

3 讨 论

我国部分血液透析中心的乙肝发病率为27.1%～55.6%，预防MHD患者HBV感染有免疫和非免疫方法，免疫方法主要是乙肝疫苗接种；非免疫方法主要包括：严格消毒、HBsAg阳性患者与普通患者隔离透析、使用促红细胞生成素、避免输血、以及对HBsAg阳性患者应用一次性透析器等。非免疫方法简单有效，但尚不足以明显降低HBV感染率。MHD患者乙肝疫苗接种后约有40～50%患者无反应[1]，晚期肾病患者对乙肝疫苗的反应率明显降低[2]，其抗体滴度较健康人群低[3]，抗体维持时间也较短，且不受移植的影响[4]。患者年龄越大、透析时间越长对乙肝疫苗的反应越差。同时，有研究显示，MHD患者乙肝疫苗接种后，超过80%的患者血清HbsAb滴度水平在接种6个月后明显降低[5]。本实验中对照组患者免疫接种后12个月HbsAb阳性率较接种后1个月时明显降低，这意味有相当部分MHD患者得不到有效的免疫保护。

免疫功能低下是MHD患者乙肝疫苗接种后HBsAb产生低下的主要原因，而免疫增强剂可提高机体免疫应答能力，给予MHD患者免疫增强剂治疗以提高HBsAb水平引起了我们的关注。猪苓多糖是一种葡聚糖体，药理作用研究表明猪苓多糖可提高机体免疫功能，提高小鼠巨噬细胞吞噬能力，促进抗体的形成。有研究表明，猪苓多糖能提高免疫低下小鼠T、B淋巴细胞转化能力；增强免疫功能低下小鼠NK细胞杀伤肿瘤细胞的能力；上调免疫功能低下小鼠CD4+T细胞量，且对免疫功能低下小鼠的IgG产生一定的正向调节作用[6]。目前国内已有报道应用猪苓多糖联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎，取得了较好的治疗效果[7]。本实验中，实验组患者HBsAb阳性率较对照组慢性增高，HBsAb滴度下降程度明显较对照组低，接种后一定时间内实验组患者乙型肝炎病毒感染率明显较对照组低，说明猪苓多糖在一定程度上提高了机体的免疫力，联合乙肝疫苗能明显提高MHD患者接种后的血清阳转率，降低MHD患者乙型肝炎病毒感染率。

通过本实验的探讨，我们认为猪苓多糖不仅可以作为治疗慢性乙型肝炎的辅助药物，同时也能作为非乙型肝炎感染、免疫功能低下人群免疫接种的辅助药物。

[1] Kayatas M.Levamisole treatment enhances protective antibody response to hepatitis B vaccination in hemodialysis patients[J]. Artif Organs,2002,26(6):492-496.

[2] Fabrizi F,Martin P.Meta-analysis: the effect of age on immunological response to hepatitis B vaccine in end-stage renal disease[J].Aliment Pharmacol Ther,2004,20(10):1053-1062.

[3] Dinits-Pensy M,Forrest GN.The use of vaccines in adult patients with renal disease[J].Am J Kidney Dis,2005,46(6):997-1011.

[4] Cimaz R,Meregalli E.Alterations in the immune system of children from mothers treated with immunosuppressive[J]. Toxicol Lett,2004,149(1-3):155-162.

[5] 尚有全,张岩郅.维持性血液透析患者乙肝表面抗体水平变化的观察分析[J].临床和实验医学杂志,2012,11(3):170-171.

[6] 聂红,马安伦.复方猪苓多糖对小鼠免疫功能的调节[J].细胞与分子免疫学杂志,2000,12(5):384-386.

[7] 刘力锋.猪苓多糖联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎128例[J].临床医学,2009,29(6):15-16.

PUPS in Hemodialysis Patients with Hepatitis B Vaccine Immunization Application Research

TAO Juan1, LI Tao1, XUE Guo-ping1, YU Jun-wen2
(1 Nanhai District Seventh People's Hospital of Foshan, Foshan 528247, China; 2 Foshan TCM Hospital, Foshan 528000, China)

Objective To explore thewhether polyporus polysaccharide can be used asan effective drug to reduce infection rate of hepatitisB forof maintena ncehemodialysis(MHD) patientswithHepatitisB. Methods 82 MHD patients were divided into two groups, theexperimental group(inoculated withpolyporus polysaccharide andcombined hHepatitis B vaccination) and control group(inoculated with onlyHhepatitis B vaccination alone).Serum HBsAbwere detectedpositive rate after1and12 months of inoculationinfor patients ofboth groupswere detectedon1,12 months after inoculation, and Hepatitis B infection rate were detectedobserved onafter 6and, 12 months after inoculation. Results HBsAb positive rate ofin experimental group was significantly higherthan the control group, and hHepatitis B infection rateof experimental group was lower.than the control group.Conclusion Polyporus polysaccharide can be used as aneffective drugs to reducehepatitisBinfection forMHD patientswithHepatitisBinfection

Polyporus polysaccharide; Maintenance hemodialysis; Hepatitis B vaccination; Immunization

R186

B

1671-8194（2013）22-0007-02

佛山市医学类科技攻关项目（项目编号：20111021020006）