健康体检妇女宫颈高危型人乳头状瘤病毒感染情况及基因亚型分析

陈 颖，蓝海鹰，黄紫艳，叶 云

(丽水市妇幼保健院检验科，浙江丽水323000)

人乳头状瘤病毒(human papillomavirsu，HPV)是一种小的DNA双链病毒。20世纪70年代Zur Hausen［1］首次证实HPV感染为宫颈癌发生的重要原因。随着研究的深入，现在可以肯定HPV是导致宫颈癌发生的根本原因。大量临床研究证实高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus，HRHPV)与宫颈癌和宫颈上皮内瘤变密切相关［2］。同时HR-HPV亚型的分布与地区、环境、人群结构相关［3］。为了解浙江丽水地区妇女HR-HRV感染率及亚型分布特征，我们对健康体检妇女宫颈拭子标本的13种HPV高危亚型检测结果进行了分析。

材料和方法

一、研究对象

收集2011年2月至2011年5月在丽水市妇幼保健院进行健康体检的650名妇女的宫颈拭子标本，年龄24～86岁。

二、仪器和试剂

HR-HPV分型核酸测定试剂盒购自上海之江生物科技有限公司。仪器为安捷伦 Mx3000P实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测仪。

三、方法

将标本管加入1 mL生理盐水后涡旋振荡混匀，吸取液体转移至1.5 mL离心管中，6 000×g离心5 min，沉淀加无菌生理盐水1 mL混匀，6 000×g离心5 min，再重复洗涤1次。沉淀加提取液50 μL混匀，100 ℃裂解10 min，6 000×g离心5 min，取上清液4 μL作为 PCR反应模板。PCR反应条件:95℃预变性2 min，93℃ 10 s，62℃ 50 s，共40个循环，单点荧光检测在62℃。操作过程严格按试剂盒使用说明在生物安全柜中进行。

依据试剂盒说书提供的判断标准。Ct值＜38时检测结果为阳性，Ct值显示UNDET或40，表示标本低于检测限，报告为阴性，如标本Ct值显示38～40之间，需重复检测，如结果仍在38～40之间，则判断为低于检测下限，报告为阴性。

四、统计学方法

采用SPSS软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

一、HR-HPV各亚型感染比较

650名体检妇女标本中HPV阳性73例，阳性率为11.23%。感染最多的前5位亚型依次为HPV52(2.62%)、HPV39(1.69%)、HPV58(1.23%)、HPV68(1.08%)和 HPV56(0.92%)。HR-HPV各亚型感染率见表1。

表1 HR-HPV各亚型感染率 ［例(%)］

二、不同年龄组女性HR-HPV感染比较

HR-HPV感染率高峰值为50～59岁组，检出率为15.09%。30～39岁组检出率为12.98%，40～49岁组检出率为9.03%，≥60岁组检出率为12.22%，均明显高于20～29岁组(5.49%)，见表2。

表2 不同年龄组女性HR-HPV感染统计

讨 论

HPV是一组DNA内切酶谱不同，外壳蛋白质抗原各异的嗜上细胞病毒的总称，又分为高危型HPV和低危型HPV。宫颈癌的发生是一个连续而漫长的过程，高危型HPV感染是诱发宫颈癌最基本的原因，低危型HPV常引起外生殖器湿疣类良性病变。加强对妇女HR-HPV的早期诊断，采取有效的监测与防治措施可降低宫颈癌发生及死亡。

本研究结果表明，650例标本中共检出HRHPV阳性73例，检出率为11.23%，略低于蒋旭峰等［4］对金华地区236例可疑患者13.1%(31/236)的检出率。从各亚型的分布分析，感染最多的亚型依次为 HPV52、HPV39、HPV58、HPV68。有关HPV亚型分布各地区报道［5-7］均有所不同。由此可以看出不同地区感染亚型存在明显差异，表现出明显的人群特征。

同时本研究还发现，妇女宫颈HR-HPV感染存在明显的年龄分布特点，50～59岁组检出率(15.09%)、30～39岁组检出率(12.98%)明显高于20～29岁组检出率。与王红旗等［8］对6 868例妇科门诊患者HPV感染状况报道的略有不同，特别是50～59岁组。可能与女性病毒潜伏、机体免疫力下降、病毒被再次激活有关。

综上所述，加强对妇女宫颈HR-HPV感染的检测，能够有效提高妇女宫颈病变的检出率，特别是对于高龄妇女宫颈疾病的筛查，加强健康教育及HR-HPV感染预防，能够有效降低宫颈癌的发生率。

［1］Zur Hausen H.Papillomaviruses and cancer:from basic studies to clinical application［J］.Nat Rev Cancer，2002，2(5):342.

［2］Schiffman M，Castle PE.Human papillomavirus:epidemiology and pubic health［J］.Arch Pathol Lab Med，2003，127(8):930-934.

［3］Zhang WY，Xue YZ，Chen M，et al.Prevalence of high-risk human papillomavirus infection in different cervical lesion among organized health-examination women in Shanghai，China［J］.Chin Med J(Engl)，2008，121(16):1578-1582.

［4］蒋旭峰，蒋群芳.金华地区女性感染人乳头瘤病毒基因类型分析［J］.放射免疫学杂志，2009，22(1):85-87.

［5］宋丽君，陈春丽，罗淑桂.HPV基因分型检测与宫颈病变的相关性研究［J］.检验医学，2012，27(3):163-166.

［6］王玉丰，林 玲，刘春雨，等.三亚地区妇女人乳头瘤病毒感染的分子流行病学调查［J］.检验医学，2012，27(8):628-630.

［7］许泼实，赵 静，陈光辉.导流杂交技术检测中原地区女性人乳头瘤病毒感染情况［J］.检验医学，2012，27(12):1040-1042.

［8］王红旗，郭远瑜，汪 敏，等.6 868例妇科门诊病人HPV感染状况及基因型分析［J］.中国卫生检验杂志，2010，20(5):1204-1206.