学生科研项目研究工作小结

　　1.项目选题的背景
　　背景：雌激素受体（Estrogen receptor，ER）是配体依赖的类固醇激素核受体超家族成员之一，分为α和β两种亚型。ER-α位于6q25～1，长140kb，编码由595个氨基酸残基组成的蛋白质。ER-α蛋白质一级结构从N端到C端共分为A～F六个功能区：A/B区为转录调控区，位于氨基末端，A/B区中有一个非配体依赖性转录激活功能区AF-1，它通过和基础转录因、辅助激活因子和其他转录因子相互作用，介导信号向下游蛋白传递，从而激活靶基因，A/B能调节ER和DNA的相互作用，选择正确的雌激素应答元件及调控靶基因表达；C区为DNA结合区，是富含碱性氨基酸和半胱氨酸的高度保守区；D区为多变的铰链区，允许受体弯曲、旋转或构象改变，形成受体二聚体，并与同向或反向重复反应元件结合以发挥作用，D区还含有核定位信号，具有稳定DBD的DNA结合作用；E/F区包括配基结合区，共调节因子结合表面、二聚化区和配基依赖性转录激活功能区AF-2。
　　2000年，Flouriot等研究首次发现ER-α66（传统观念的ER-α）的同源异构体。同先前的ER-α66相比，它剪切了A、B区，缺乏N末端173个氨基酸，分子量为46KD，故被命名为ER-α46。
　　2005年，王兆一等研究首次报告ER-α66的另一同源异构体——ER-α36，它剪切了A、B区及F区，缺乏N末端173个氨基酸及CN末端138个氨基酸，分子量为36KD，故被命名为ER-α36，且初步证明了ER-α36表达不完全依赖ER-α66，其功能类似于生长因子受体，很可能参与抑制ER-α66介导的经典雌激素信号传导通路并激活细胞膜介导促细胞分裂的雌激素信号传导。
　　ER是经典的核受体，是核受体超家族成员之一，是执行生长与分化、增殖与凋亡等重要细胞内生理功能的分子元件。ER与雌激素结合后，激活基因转录，从而发挥其生长调控作用。
　　近年国内外报道，许多不属于激素靶器官的肿瘤，如肺癌和脑膜瘤等测出了激素。
　　Tokunaga等首次发现胃癌可表达ER及孕激素受体，并推断其可能为雌激素依赖性肿瘤，以后国内外学者不仅应用不同的方法证实胃癌细胞ER表达的事实，而且开始给胃癌患者使用tamoxifen（TAM）。但至今TAM用于ER-α阳性，即传统的ER-α66阳性的胃癌的辅助治疗效果不佳，未被全球专家公认。因此，推测可能存在另外一种雌激素受体ER-α36途径激活胃癌细胞进入细胞周期。
　　本项目组前期研究从蛋白水平及mRNA水平证实胃癌培养细胞株SGC-7901、MKN45、MKN28、AGS中表达ERα36，且人体胃癌组织均表达ERα36，且证实ERα36参与胃癌雌激素信号转导。
　　笔者2009年在王兆一实验室研究发现，ER-α36在乳腺癌细胞株MCF7细胞周期不同时相差异性表达。
　　选题意义：本研究拟通过对雌激素受体ER-α36在胃癌细胞株SGC7901G0与G1期表达差异性研究，探讨ER-α36在胃癌细胞周期中的作用，从而为胃癌的早期检测及靶向治疗提供理论依据。
　　2.项目成员的组成、特长、分工及成员间相互协调配合的情况，导师指导情况
　　本项目组成员均为女生，细心、认真、负责，成员组同学相互合作、配合好，基本操作均由学生完成。导师指导学生项目申报、教授HE染色技术及原理、教授免疫荧光染色技术及原理、协助学生完成ER36免疫荧光染色过程、指导学生免疫荧光及HE阅片。
　　3.项目的创新点与特色
　　将新发现的雌激素受体ER-α36运用于胃癌细胞周期的研究，首次提出ER-α36影响胃癌细胞周期的观念，具有一定的创新性，为胃癌的激素治疗开辟了新思路。
　　4.项目实施的进展情况及取得的创新成果
　　完成了①SGC7901细胞培养；②同步化处理SGC7901细胞（G0期采用血清饥饿法，M采用秋水仙碱阻滞法）并制作细胞爬片；③细胞爬片免疫荧光细胞化学染色观察同步化处理G0及M细胞的ERα36表达差别。
　　5.项目实施过程中的收获与体会
　　通过指导学生科研，我深刻体会到学生科研不仅培养了学生的创新思维能力，而且提高了学生独立思考的能力，还培养了学生的动手操作能力。
　　让学生参与科研，不仅提高了学生的观察能力、分析问题的能力及动手操作的能力，而且培养了学生的科研能力。在实验研究过程中，学生从课题的文献综述、选题立项、实验操作到实验报告撰写，模拟了研究生的研究过程，提供了学生一个科研思路。此外，调动了学生的探究科学的积极性。
　　另外，通过学生科研的指导，提高教师的思想素质和业务素质。进行科研思维能力培训及多项综合性实验技能的培训是一种新型的实验教学模式。学生科研要求指导教师不仅具有扎实的基础理论知识，熟练的操作技能，而且积极跟踪学科发展趋势，不断充实自己，才能给学生更好的指导，同时更多地要求指导教师有创新思维及创新能力。这对指导教师的教学思维及教学模式提出了巨大的挑战，从而对教师的思想素质和业务素质提出了更高的要求。
　　通过了两轮的学生科研的指导，笔者认为学生科研目前还存在一些问题亟待解决。
　　在学生科研实践过程中，笔者认为存在的最大的问题是创新力度不够。创新实验究竟什么是创新？创新实验是思维的创新，还是动手能力的创新，抑或是单纯的实验方式的创新？我认为创新在很大程度上局限于实验模式的革新。
　　我们往往把学生科研等同于科研，把学生科研教学等同等于研究生科研教学。学生科研应当在科研模式的教学上既简化又升华。因为教学对象主要是大学一年级学生，他们的专业知识储备量少。比如，科研项目的内容对学生来说要求的理论知识太强，学生不容易搞懂。如果学生一进入实验室就让他们搞科研做课题，就会导致学生在创新实验过程中看不懂，听不懂，这势必让学生感到迷茫，从而挫伤学生的学习兴趣。
　　我认为，大学生学生科研应选择适当的、涉及多学科且应用较广的基础实验技术，且该技术在学生未来的本科教学中将会涉及，然后以实验技术为中心展开实验过程。
　　比如，针对进入病理学实验小组同学，我们可以采用以结合免疫学与病理形态学相围绕结合的免疫荧光细胞染色技术为中心，将教师的科研课题深入到该项实验技术中去。先让同学们围绕该技术，进行文献的复习、综述并进行讨论，然后让同学们将该技术带到科研，制作爬片并进行荧光抗体染色。
　　教师在实验设计中要把握实验的创新点，比如，技术操作的创新，应用的创新，等等。然后围绕创新点让同学们展开思路进行探讨。
　　比如，爬片技术是一种冒似简单的技术，但仍然存在很多有待思考的问题。比如，如何处理可以让细胞在爬片上分布均匀？如何操作可以让实验技术简洁？采取何种固定方法使得爬片适合某种实验的让染色？如何处理可以减少荧光抗体染色的掉细胞现象？等等。在这个思考的过程中便可以将创新性思维贯彻到我们的教学中。这样，在我们的教学中既教会了学生科研思路，同时又教会了学生实验技术，同时，更重要的是将科研思维贯彻到实验教学中。
　　此外，学生在创新思维教学中，自主活动、主动探索的精神没有得到充分体现。学生更多的是习惯于老师讲解、示范性操作，然后按实验流程来进行操作，在实际操作和处理中没有自己的想法与思路。这与我们多年传统教育形成的思维模式是密切相关的。我们应当在科研教学中逐渐改善这种思维模式，将创新思维的教学渗透到教育体系当中去。
　　总之，大学生创新教育不是一句口号，它需要我们在教育实践中逐步落实与贯彻。我们不能急功近利，应当一步一个脚印，踏踏实实地在教学实践中摸索，从而使我们的创新实验能够为创新教育的推广服务。
　　基金项目：2010及2011年度江汉大学学生科研教学项