碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子在结肠癌表达的相关性及其临床意义

刘士君 李建华

1.辽宁中医药大学附属第三医院病理科，辽宁沈阳 110003；2.中国医科大学附属第一医院病理科暨中国医科大学基础医学院病理教研室，辽宁沈阳 110001

结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，20世纪90年代以来，发病率呈明显上升趋势[1-2]。影响结肠癌预后的因素很多，血管生成在肿瘤生长、转移中发挥重要作用。本研究采用免疫组织化学SP法，检测85例结肠癌标本中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达情况，以探讨bFGF和VEGF表达的相关性及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般材料

收集辽宁中医药大学附属第三医院2007年10月～2011年10月间85例外科手术切除结肠癌标本，所有患者术前均未接受放疗或化疗，所有研究对象均按HE病理切片诊断标准确诊为结肠癌，年龄32～81岁，平均51.6岁，其中，男59例，女26例；伴淋巴结转移52例，不伴淋巴结转移33例；组织学分型：高分化32例，中分化15例，低分化38例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期40例，Ⅲ～Ⅳ期45例。

1.2 方法

标本经4%甲醛固定，常规石蜡包埋，4μm连续切片，分别进行HE染色和免疫组织化学SP法染色，兔抗人的bFGF和VEGF抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司，并设立阳性和空白对照。

1.3 结果判定

bFGF和VEGF表达均定位于细胞浆，胞浆染有明显的棕黄色为阳性，胞浆无着色为阴性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 10.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；采用Spearman检验进行两变量间的相关性分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 bFGF和VEGF在结肠癌的表达情况

bFGF和VEGF在男性结肠癌的表达阳性率分别为64.4%、62.7%，女性结肠癌的阳性表达率分别为69.2%、65.4%，包浆均有明显的棕黄色染色（图1、2），不同性别间差异无统计学意义（P>0.05）。bFGF和VEGF在高、中、低分化结肠癌的阳性表达率依次为59.3%和56.2%、66.7%和60.0%、71.1%和71.0%，各组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。bFGF和VEGF在TNMⅠ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率分别为37.5%、50.0%和91.1%、75.6%，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

图1 低分化结肠癌标本中bFGF的阳性表达（×200）

图2 中分化结肠癌标本中VEGF的阳性表达（×400）

表1 bFGF和VEGF在85例结肠癌标本的表达与临床病理特征的关系[n（%）]

2.2 bFGF和VEGF表达的相关性

bFGF和VEGF表达的相关性见表2。用Spearman检验进行两变量间的相关性分析表明，bFGF和VEGF结肠癌的表达呈正相关（r=0.268，P<0.05）。

表2 bFGF和VEGF的表达情况（例）

3 讨论

恶性肿瘤的发生、发展机制涉及肿瘤细胞遗传物质、表面结构、侵袭力、黏附力、血管新生、淋巴管新生等诸多因素[3]。目前许多研究资料发现，新生血管的形成在肿瘤的生长、转移中发挥重要作用，恶性肿瘤细胞凭借丰富的新生血管网获取无限生长所需要的营养和氧气，因此，肿瘤的血管生成以及以血管为靶向的药物研究成为肿瘤研究领域的热点之一[4]。已经发现越来越多的因子与肿瘤血管生成有关[5]。

bFGF是广泛存在于体内多种组织的一类多肽生长因子，在机体的胚胎发育、血管形成、创伤修复过程中起重要调节作用。近年来研究发现，bFGF在肝癌、肺癌、胶质瘤、黑色素瘤中都有较高表达[6]。本实验研究表明，bFGF在大肠癌中有异常表达，与性别、组织分化程度无关，与临床分期、淋巴结转移情况密切相关。

VEGF属于血小板源生长因子超家族，为分子量46 000的高度糖基化碱性蛋白，可通过蛋白激酶C（PKC）或ras信号传导通路激活丝裂原活化蛋白激酶（MAKP）系统，刺激内皮细胞增殖，并产生纤维蛋白溶解酶原激活剂和胶原酶等[7]，增加微血管通透性[8]，促进血浆纤维蛋白渗出，为血管中多种细胞的迁徙提供纤维网络，从而促进血管形成和肿瘤细胞脱落进入血管或向邻近纤维结缔组织扩散。VEGF在正常情况下表达水平较低，在一些病理情况下出现过表达。本研究表明，VEGF在大肠癌中的异常表达与性别、组织分化程度无关，与临床分期、淋巴结转移情况密切相关。

本研究结果显示，bFGF和VEGF在结肠癌的表达呈正相关关系（r=0.268，P<0.05），二者共同参与了结肠癌浸润和转移的过程，相互的协同作用可以使结肠癌更具侵袭性。因此，联合检测bFGF和VEGF在大肠癌中的表达，可以作为评估结肠癌预后的客观指标，对指导临床诊断和治疗具有一定的意义，可能作为肿瘤靶向治疗的新靶点，通过某种技术抑制bFGF和VEGF高表达，可实现缓解病情甚至治疗结肠癌的目的，减少复发和转移。

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