通天草提取物对Aβ1－40所致AD大鼠血清与海马组织中细胞因子含量的影响

邱文兴，贾博宇，刘永武，刘旭，李宝龙，周忠光

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

老年性痴呆(AD)，又称阿尔茨海默病，是一种慢性的大脑退行性变性疾病。随着全球老龄化趋势的日益加剧，AD越来越严重地危害着人们的身体健康。本研究以AD发病理论“神经免疫炎症假说”和“β－淀粉样蛋白级联假说”为切入点，探讨通天草提取物对AD大鼠血清与脑组织总细胞因子含量的影响，为开发防治老年性痴呆的中药新药提供实验依据。

1 材料与方法

1．1 实验动物与分组

Wistar大鼠 80只，雌雄各半，清洁级，体质量(300±20)g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。适应1周后进行跳台实验，剔除不合格者，称质量后随机分成正常组、假手术组、模型组、通天草水提组、通天草醇提组、脑复康组(脑复康片剂，400mg/片，东北制药厂)，每组10只。

1．2 主要试剂与仪器

Aβ1－40(Amyloid β－protein，Fragment1－40，Sigma公司);白细胞介素(IL)－1β、IL－6、肿瘤坏死因子(TNF)－α放免试剂盒购自北京福瑞生物公司;大鼠脑立体定位仪SN－2(日本);大鼠跳台仪(中国医学科学院药研所)。

1．3 模型制备

参考本课题组前期研究成果［1］。

1．4 治疗方法

各组大鼠在造模后第7天开始给药治疗，每天给药1次，连续给药 21天:醇提组给药量为:1．18g/kg/天;水提组给药量为:2.90g/kg/天;脑复康组灌胃给予0.1g/kg/天;正常组、假手术组与模型组大鼠给予等体积蒸馏水。

1．5 指标检测

1．5．1 取材方法

参考本课题组前期研究成果［1］。

1．5．2 检测指标

采用液相平衡竞争放射免疫分析法(RIA)检测血清和脑组织中IL－1β、IL－6、TNF－α水平。具体方法按试剂盒说明书进行操作。

1．6 统计学处理

2 结果

2．1 IL－1β在各组大鼠血清和海马中含量变化

与正常组和假手术组相比较，模型组大鼠血清和海马组织中IL－1β含量显著升高(P＜0．01)，给药后，与模型组、空白组比较，各组IL－1β含量明显下降(P＜0．05或P ＜0．01);在各组比较中，通天草醇提物对血清和海马中IL－1β含量的影响最大。见表1。

表1 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中IL－1β含量的影响(±s，μg/L)

表1 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中IL－1β含量的影响(±s，μg/L)

注:与正常组比较，1P ＜0．05，2P ＜0．01;与模型组比较，3P ＜0．01;与醇提组比较，4P ＜0．05。

组别 n 血清 海马正常组10 0．168 ±0．017 0．212 ±0．030假手术组 10 0．206 ±0．0331 0．214 ±0．023模型组 10 0．277 ±0．0152 0．345 ±0．0332水提组 10 0．211 ±0．04913 0．271 ±0．028234醇提组 10 0．196 ±0．03713 0．236 ±0．0393中药组 10 0．216 ±0．05913 0．262 ±0．03323

2．2 IL－6在各组大鼠血清和海马中含量变化

见表2。与正常组比较，模型组IL－6含量明显升高(P＜0．01);与模型组、正常组比较，各给药组IL－6含量有不同程度降低(P ＜0．05或P ＜0．01)，其中以通天草醇提组作用最明显。

表2 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中IL－6含量的影响(±s，μg/L)

表2 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中IL－6含量的影响(±s，μg/L)

注:与正常组比较，1P ＜0．05，2P ＜0．01;与模型组比较，3P ＜0．05;与醇提组比较，4P ＜0．01。

组别 n 血清 海马正常组10 161 ±17 13．7 ±4．8假手术组 10 178±15 15．3±5．3模型组 10 310±422 42．8±3．32水提组 10 255±4923 24．7±4．824醇提组 10 202±3714 20．5±4．914中药组 10 216±2924 22．8±3．324

2．3 TNF－α在各组大鼠血清和海马中含量变化

见表3。与正常组比较，模型组TNF－α水平明显升高(P＜0．01);与模型组、正常组比较，各给药组TNF－α水平有不同程度降低(P＜0．05)，其中以通天草醇提组作用最明显。

表3 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中TNF－α含量的影响(±s，ug/L)

表3 通天草提取物对AD大鼠血清和海马中TNF－α含量的影响(±s，ug/L)

注:与正常组比较，1P ＜0．05，2P ＜0．01;与模型组比较，3P ＜0．05;与醇提组比较，4P ＜0．01。

组别只数 血清 海马正常组10 0．71 ±0．05 0．74 ±0．04假手术组 10 0．72 ±0．061 0．76 ±0．05模型组 10 0．93 ±0．072 1．23 ±0．162水提组 10 0．75 ±0．0313 0．88 ±0．09234醇提组 10 0．70 ±0．043 0．77 ±0．053中药组 10 0．76 ±0．093 0．91 ±0．06234

3 讨论

老年性痴呆(阿尔茨海默病，AD)是一种病因不明的原发性退行性脑变性疾病。临床症状上以不可逆的认知损害为主。病理主要改变为皮质弥漫性萎缩、老年斑(SP)形成、神经元大量减少和神经元纤维缠结(NFT)。研究证实，认知损害和记忆丧失的程度与淀粉样物质沉积范围有关［2－3］。本实验研究表明，通天草的水提取物和醇提取物能不同程度地调节AD模型大鼠血液和脑组织免疫炎性细胞因子IL－1β、IL－6和TNF－α水平，从而影响APP生成与代谢，合理调控Aβ过度沉积引起的免疫炎症级联反应，有效地减轻Aβ毒性作用所致脑组织神经元损伤，从而改善学习记忆障碍，起到防治AD的作用。

［1］ 周忠光，韩玉生，姜波，等．补阳还五汤及拆方对Aβ1～40所致AD大鼠血清与海马组织Aβ和细胞因子含量的影响［J］．山西医药杂志，2008，37(2):129－131．

［2］ 周妍妍，谢宁，姚辛敏，等．地黄饮子对β淀粉样蛋白所致PC12细胞损伤的保护作用［J］．中医药学报，2010，38(2):19－21．

［3］ 何秀丽，孟菲，周妍妍，等．地黄饮子含药脑脊液对受损PC12细胞β－淀粉样前体蛋白mRNA表达的干预［J］．中医药信息，2011，28(4):26－28．