蜜源生物液与紫云蜜中化学成分的比较研究

郝小燕，裘璐，吴文利，张一，肖海涛

（贵阳医学院药学院，贵州 贵阳 550004）

蜜源生物液是以紫云蜜为主要原料，配以中药复方，以独特的发酵工艺，将中药复方的功效成分完全融入蜂蜜中而制备的一种功能性饮品，具有补气血，健脾胃，强身健体的功效。通过研究，我们发现蜜源生物液具有一定的抗氧化性（另文发表），还具有良好的流变性、渗透性、乳化性以及与多种物质良好的兼容性。在酒中加入该生物液，可提高总酯而降低杂醇含量，使其口感纯正。这些特性与紫云蜜有显著的不同。功能食品在国内外食品市场的增长幅度很大,功能食品的开发与生产成了食品行业的重要发展方向[1]，对其有效化学成分进行分析则是深入开发的基础。目前，对蜜源生物液化学成分的研究未见报道。本研究采用GC-MS技术并通过HPMSD化工作站检索NIST98标准质谱图库和WILEY质谱图库，分析、鉴定了蜜源生物液乙酸乙酯部位的化学成分，并与紫云蜜进行比较。以期为蜜源生物液的多领域开发和应用提供一定的科学依据。

1 材料

1.1 仪器

HP 5973 GC-MS联用仪：美国惠普公司。

1.2 试剂

CO2（纯度99%）：由贵阳氧气厂提供；乙酸乙酯等均为国产分析纯。

1.3 材料

蜜源生物液：由贵州森川生物制药有限公司提供；紫云蜜：贵阳市售。

2 方法与结果

2.1 乙酸乙酯萃取物的制备

取蜜源生物液适量，乙酸乙酯反复多次萃取得乙酸乙酯的萃取液，备用。

取紫云蜜适量，乙酸乙酯反复多次萃取得乙酸乙酯的萃取液，备用。

2.2 气相色谱条件

HP-5MS5%PhenylMethylSiloxane（30m×0.25mm×0.25μm）弹性石英毛细管色谱柱，柱温45℃（保留2min），以5℃/min升温至300℃，保持2 min；汽化室温度250 ℃；载气为高纯 He（99.999%）；柱前压 7.62 Pa，载气流量 1.0 mL/min；进样量 1 μL；分流比 20∶1。

2.3 质谱条件

质谱的电离方式为EI；离子源温度230℃；四极杆温度150℃；电子能量70 eV；发射电流34.6 μA；倍增器电压1015 V；接口温度280℃；质量范围30 AMU～550 AMU，溶剂延迟3 min。

2.4 定性分析

取超临界萃取物1.0 μL，用气相色谱-质谱-计算机联用仪进行分析鉴定。最后通过HPMSD化学工作站检索NIST 98标准质谱图库和WILEY质谱图库，并结合有关文献[2]进行人工谱图解析，以确认蜜源生物液和紫云蜜乙酸乙酯部位的化学成分。

2.5 GC-MS分析结果

用气相色谱数据处理系统，以峰面积归一法测得其中各组分的相对百分含量，对总离子流图（见图1和图2）中的各峰经质谱扫描后得到质谱图，经过NIST98质谱计算机数据系统检索，结合人工谱图解析，按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对，对基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较，结果从蜜源生物液和紫云蜜乙酸乙酯部位中分别分离并鉴定出32和51个化学成分（见表1）。

图1 蜜源生物液乙酸乙酯部位的总离子流图Fig.1 Total ion chromatogram of ethyl acetate extract from Miyuan Bio-liquid

图2 紫云蜜乙酸乙酯部位的总离子流图Fig.2 Total ion chromatogram of ethyl acetate extract from Ziyun Honey

表1 化学成分分析结果Table 1 Analytic result of chemical constituents

3 讨论

1）在本研究之前，选用了石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别对样品进行了萃取，其中每种溶剂的用量、萃取次数及样品量一致。通过比较发现，采用乙酸乙酯时相应的萃取率最高。因此，本研究选用乙酸乙酯对样品进行前处理。

2）采用气相色谱-质谱（GC－MS）联用技术从蜜源生物液乙酸乙酯部位分离出的32种化合物，占总含量的93.61%，包括杂环类化合物2种，有机酸类3种，酯类8种，醇类3种，酰胺类3种，芳香族化合物4种，烃类7种，酚类和醛类各1种；从紫云蜜乙酸乙酯部位分离出的53种化合物，占总含量的93.18%，包括杂环类化合物2种，有机酸类2种，酯类9种，醇类7种，酰胺类4种，芳香族化合物4种，烃类14种，酚类3种，醛类3种，酮类4种，醚类1种。由此可见GC-MS确有分离效果好、检测成分多等优点，适合用于这两种物质的化学成分分析。

3）通过实验数据比较，蜜源生物液和紫云蜜乙酸乙酯部位在成分组成及其含量上均表现出了较大的差异：前者含量最高的是杂环类化合物（47.16%），其次分别是有机酸类（19.33%）和酯类（17.19%）；后者含量最高的是有机酸类（33.93%），其次是杂环类化合物（18.17%）。纵观表 1还可以看出 5－羟甲基－2－呋喃甲醛是蜜源生物液乙酸乙酯部位中含量最高的，达41.92%，而该物质在紫云蜜乙酸乙酯部位中仅有17.76%。至于这些差异对蜜源生物液的特殊功效是否有关，还有待于进一步的研究。

4）从表1可以看出蜜源生物液和紫云蜜乙酸乙酯部位均有酚类物质的存在。相关研究已经表明酚类物质是很强的体外抗氧化剂，可以有效清除机体内可以导致心血管疾病的自由基，减轻和消除机体内氧化应激[3-4]。这提示蜜源生物液所具备的抗氧化活性与该类物质有关，但具体的量效关系还有待研究和探索。至于本次检测出的其他成分对抗氧化活性是否有贡献还需考证。

5）通过对比发现：（1）酯类、醇类、醛类在蜜源生物液乙酸乙酯部位中的总相对含量为20.26%，而这3类化合物在紫云蜜乙酸乙酯部位的含量仅为13.66%。（2）杂环和芳香类化合物在蜜源生物液乙酸乙酯部位中的总相对含量为49.49%，而该类化合物在紫云蜜乙酸乙酯部位的含量仅为24.23%。酯类化合物、杂环和芳香类化合物均是酒中重要的呈香物质[5-7]，由此可以看出蜜源生物液比紫云蜜更适合作为添加剂应用于酿酒业中。

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