那西肽对鸡产气荚膜梭菌病的预防效果

徐国锋，苏海峰，底佳芳，张秀英

（1.东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨150030；2.浙江汇能动物药品公司，浙江 杭州314422）

产气荚膜梭菌（Clostridiumperfringens）是人和动物肠道的一种重要共生菌和条件致病菌，也是正常鸡肠道的常在菌群［1］，可产生多种外毒素，对人和多种动物致病，尤其是与禽类坏死性肠炎（necrotic enteritis，NE）的暴发有直接的关系［2］。产气荚膜梭菌在正常情况下栖息在盲肠，通常不会引起发病，但当肠黏膜受到损伤或者肠道微生物菌群结构发生变化时，在消化道前段大量增殖，导致NE的发生和鸡的死亡［3］。目前，防制坏死性肠炎的主要措施是在饲料中添加杆菌肽锌等抗生素，但不合理使用抗生素将会造成细菌耐药性和残留，严重影响动物健康养殖和人类健康［4］。

那西肽（Nosiheptide）是一种含硫多肽类抗生素，对革兰阳性球菌和杆菌具有较强的抑制作用［5］。饲料中添加那西肽可提高鸡的增重率和饲料利用率，但是关于那西肽能否预防鸡产气荚膜梭菌引起的鸡坏死性肠炎的报道很少。本文评价了那西肽对人工感染的鸡产气荚膜梭菌病的预防效果，目的是为有效预控鸡坏死性肠炎提供新思路和理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 鸡源产气荚膜梭菌A型CVCC－52，购自中国兽医药品监察所。1%那西肽预混剂，由浙江汇能动物药品有限公司提供；15%杆菌肽锌预混剂（对照药物），购自武汉远诚共创药业有限公司；其余所有试剂除特殊标记外均为分析纯。

1.2 动物与日粮 1日龄伊莎婷特粉雏鸡，购自东北农业大学孵化场；按雏鸡饲养标准饲喂不含任何抗菌药物的标准日粮，按正常程序进行免疫接种和饲养管理。试验用料：大威禽用颗粒饲料，购自哈尔滨市大威饲料制造有限责任公司，其有效成分为：蛋白含量＞18.0%、水分＜14.0%、总磷＞0.3%、钙0.7%～1.0%、盐0.3%～0.8%。

1.3 试验设计 将480只1日龄伊莎婷特粉雏鸡随机分成6个试验组，每个试验组4个重复，每个重复20只，其中第1组为空白对照组（不感染不给药组），第2组为阳性对照组（感染不给药组），第3组到第5组为那西肽低、中、高剂量组，第6组为药物对照组。从1日龄开始那西肽低、中、高剂量组饲料中分别添加1.25mg、2.5mg、5mg的1%那西肽预混剂，药物对照组在每公斤饲料中添加15%杆菌肽锌预混剂200mg；连续饲喂至24日龄试验结束。在整个试验过程中，各组的一切用具严格分开。

在接种产气荚膜梭菌前，先将鸡源产气荚膜梭菌A型接种于VF厌氧培养基，37℃厌氧培养18～24h后采用菌落计数法测定培养物的含菌数。从12日龄开始，给阳性对照组、那西肽低、中、高剂量组、药物对照组的每只鸡口腔灌服1mL浓度为108CFU／mL的菌液，每天1次，同时在饮水中加入约105CFU／mL浓度的产气荚膜梭菌（通过预试验确定），连续染毒3d。

1.4 测定指标 在试验开始时（1日龄）、接种前（12日龄）和试验结束时（第24天）分别称各组鸡的体重，记录每天的饲料消耗量，计算各组的平均增重和料重比。每天观察各组鸡的临床症状和死亡情况，统计死亡数；并对死亡的鸡进行剖检；试验结束时（24日龄），每组各个重复各处死15只鸡，取空肠、回肠、盲肠黏膜进行细菌学检查，并仔细观察小肠和盲肠病变，并对肠道病变程度进行计分，计分标准分为0，1，2，3四级［6］，即0级（没有明显损伤）、1级（肠壁变薄或出现纤维素样）、2级（局部有坏死或溃疡灶）、3级（大面积坏死）。

1.5 统计分析 试验数据采用SPSS统计软件ANOVA中的单因素方差分析法进行分析，用Duncan′s检验法进行各组间的多重比较，所有数据均以平均值±标准差（±SD）表示。

2 结果与分析

2.1 临床症状 各组鸡在接种产气荚膜梭菌前（1～12日龄）均未有明显的临床症状，空白对照组、阳性对照组、那西肽低、中、高剂量组、药物对照组分别有4、4、2、1、1、2只鸡死亡。15日龄（开始感染后72h）时，阳性对照组鸡部分出现轻微的临床症状，主要表现在精神不振、嗜睡、食欲减退；从16日龄开始部分鸡出现卧地，发抖；少数鸡出现腹泻症状，并相继出现个别鸡死亡。而那西肽低、中、高剂量组、药物对照组到16日龄才有部分鸡出现精神沉郁，食欲有所减退，到17日龄开始才有个别鸡出现腹泻症状，到20日龄鸡的临床症状全面好转，到试验结束时除个别鸡外，临床症状基本恢复。而阳性对照组鸡到24日龄大部分还表现不同程度的临床症状。那西肽低、中、高剂量组、药物对照组鸡的发病症状和发病率明显低于阳性对照组。

2.2 那西肽对鸡生长性能的影响 那西肽低、中、高剂量组和药物对照组对鸡生长性能的影响结果见表1和表2。

由表1可知，试验初期（1日龄）各组鸡体重无显著差异（P＞0.05），饲喂12d药物添加剂后，那西肽低、中、高剂量组和药物对照组的增重和饲料利用率显著或极显著高于空白对照组（P＜0.05或P＜0.01）。其中那西肽中、高剂量组增重极显著高于空白对照组（P＜0.01），那西肽高剂量组饲料利用率极显著高于空白对照组（P＜0.01）。证明那西肽有明显的促进生长和提高饲料利用率的作用，在1.25 mg／kg体重～5mg／kg体重范围内且呈剂量依赖关系。

表1 那西肽低、中、高剂量组和药物对照组对1～12日龄鸡生长性能的影响

由表2可知，12日龄人工感染产气荚膜梭菌以后，各试验组鸡生长性能受到影响，那西肽低、中、高剂量组和药物对照组增重显著低于空白对照组（P＜0.05），但是饲料利用率无显著差异（P＞0.05）。其中那西肽低剂量组和药物对照组增重极显著低于空白对照组（P＜0.01）。

表2 那西肽低、中、高剂量组和药物对照组对12～24日龄鸡生长性能的影响

2.3 那西肽的预防效果 试验期间不同剂量的那西肽对试验动物的保护率见表3。

表3 不同时期试验组鸡死亡结果

由表3可知，1～12日龄那西肽低、中、高剂量组和药物对照组鸡的死亡率低于空白对照组。在12日龄接种产气荚膜梭菌以后，那西肽低、中、高剂量组和药物对照组死亡率明显低于阳性对照组，表明那西肽能有效减少产气荚膜梭菌病引起的死亡，且5mg／kg那西肽组有最好的预防效果。

2.4 24日龄动物处死检查结果 见表4。

表4 24日龄各试验组鸡的病变记分和接种菌检出情况

从表4中结果可以看出，那西肽低、中、高剂量组和药物对照组的病变情况明显好于阳性对照组，四组中有部分鸡（分别为16只、19只、21只和13只）的病变记分为0分，而阳性对照组鸡中绝大部分（43只）病变记分在2分以上；那西肽低、中、高剂量组和药物对照组的产气荚膜梭菌检出率明显低于阳性对照组。表明那西肽能有效的减轻产气荚膜梭菌引起的肠道病变，对产气荚膜梭菌病有一定预防效果。

对12～24日龄死亡的鸡进行了剖检，除药物对照组有2只鸡和空白对照组死亡的鸡以外，其余死亡的鸡均有典型的坏死性肠炎病变，主要表现为肠内充气，空肠和回肠有纤维素样变，并有黏液和黄色或绿色假黏膜，部分有明显出血斑和溃疡坏死；取肠黏膜进行产气荚膜梭菌培养，均为阳性结果，表明鸡死亡是由人工感染产气荚膜梭菌所致。

3 讨论与小结

3.1 关于鸡产气荚膜梭菌病 产气荚膜梭菌广泛存在于自然环境中，是引起各种动物NE、肠毒血症，人类食物中毒和创伤性气性坏疽的主要病原菌之一［7］。NE不仅使动物生产性能、饲料报酬降低，鸡群死亡率增高，造成巨大的经济损失，还通过鸡肉制品引起人的感染，对人类健康构成重大威胁［8］。由产气荚膜梭菌引起的鸡坏死性肠炎在世界家禽生产领域到处可见，因此，坏死性肠炎对家禽生产水平的影响极大。一方面，坏死性肠炎提高了家禽的病死率，本试验阳性对照组鸡的死亡率比空白对照组高13.16%，而实际生产中死亡率有时会更高，有的死亡率可达16%［9］。另一方面，坏死性肠炎极大地提高了家禽生产的料重比，造成家禽养殖业生产成本的大大提高，从而极严重地危害了家禽养殖业的发展。

3.2 那西肽的预防效果 那西肽可以有效阻抑肠内有害细菌的生长，使肠道管壁吸收机能正常，因而可以促进动物生长，提高饲料利用率。近年来，随着那西肽在国内进行规模化生产的实现，我国学者对那西肽在畜牧业中的应用进行了大量研究。李红军等［10］发现在肉鸡日粮中添加那西肽可促进肉仔鸡增重。赵旭明等［11］发现，添加那西肽能显著提高蛋鸡的产蛋率、采食量、蛋壳厚度和质量。朱淑斌［12］等发现，在日粮中添加那西肽能显著提高生长肥育猪的采食量和日增重，而对猪的胴体品质和猪肉品质均无不良影响。那西肽除了具有促进畜禽生长的作用外，还具有添加剂量小、在畜禽体内的残留量极低、无明显毒副作用、不易产生耐药性、使用安全等特点。

那西肽能有效地抑制革兰阳性致病菌生长，常用于家禽的致病性梭菌引起的疾病的预防。饲料中添加那西肽可以减低家禽肠道梭菌的数量，减少梭菌性肠炎的发生率。同时还有利于维持动物肠道内环境的平衡、降低肠道内容物黏稠度。本试验的结果表明，饲料中添加那西肽，不但可以提高12日龄内鸡的增重和饲料利用率，降低鸡的死亡率，而且还可以有效的预防产气荚膜梭菌引起的鸡坏死性肠炎。

［1］Engherg R M，Hedemann M S，Jensen B.The influence of grinding and pelletingb of feed on the microbial composition and activity in the digestive tract of broiler chickens［J］.British Poultry Scienee，2002，44：569－579.

［2］倪学勤，郑晓丽，曾东，等.采用AFLP和ERIC－PCR技术研究规模化鸡场健康鸡群中产气荚膜梭菌的遗传多样性［J］.畜牧兽医学报，2009，40（5）：717－724.

［3］张广丽.家禽几种主要肠道疾病的防治措施［J］.养殖技术顾问，2006，12：46－47.

［4］王俊峰，王龙昌，吴大伟，等.凹凸棒石黏土对产气荚膜梭菌攻毒肉鸡的影响［J］.饲料研究，2011，1：5－11.

［5］胡玉霞，丁瑜，陈贵才.饲用抗生素－那西肽的应用研究进展［J］.浙江畜牧兽医，2010，1：9－11.

［6］梁先明，汤树生.阿维拉霉素预混剂对肉鸡的坏死性肠炎的药敏试验［J］.中国兽医杂志，2006，42（12）：17－18.

［7］Kaldhusdal M，Lovland A.The economical impact of Clostridium perfringens is greater than anticipated［J］.World Poultry，2000，16：50－51.

［8］Filip V I，Jeroen D B，Frank P，etal.Clostridiumperfringensin poultry：an emerging threat for animal and public health［J］.AvianPathol，2004，33：537－549.

［9］林霖，宋宏晓.土种肉鸡坏死性肠炎的诊治［J］.养禽与禽病防治，2006（4）：36.

［10］李红军，邹晓庭.那西肽对肉仔鸡生长性能、胴体组成及相关血清生化指标的影响［J］.中国畜牧杂志，2005，41（2）：24－26.

［11］赵旭明，聂月美，徐天华，等.那西肽对蛋鸡产蛋性能的研究［J］.饲料研究，2009（6）：49 －53.

［12］朱淑斌，刘长有，魏国生.那西肽对生长肥育猪作用效果的研究［J］.中国畜牧杂志，2005，41（10）：44－45.