马齿苋化学成分的分离与鉴定Δ

高红梅，赵阿娜，于秀华（.长春中医药大学，长春307；.长春市中心医院，长春3005）

马齿苋化学成分的分离与鉴定Δ

高红梅1＊，赵阿娜2，于秀华1（1.长春中医药大学，长春130117；2.长春市中心医院，长春130051）

目的：对马齿苋的化学成分进行分离与鉴定。方法：采用大孔吸附树脂柱、硅胶柱及制备高效液相色谱等色谱方法分离化合物，并通过核磁共振波谱和电喷雾质谱、无畸变极化转移增强谱、1H-1H-COSY谱、异核多量子关系谱、多键碳氢关系谱等谱学技术确定分离出的化合物结构。结果：从马齿苋提取物中分离得到5个化合物，分别为丁香苷（1）、十三烷酸（2）、9，12-十八碳二烯酸（3）、11，14，17－二十碳三烯酸（4）、二十六烷酸（5），均为首次从该植物中分离得到。结论：本试验结果可为马齿苋的进一步开发利用提供依据。

马齿苋；化学成分；分离；结构鉴定

马齿苋为马齿苋科马齿苋属植物马齿苋Portulaca oleracea L.的干燥地上部分[1]，又名马舌菜、马齿草、马苋、五行草等，临床多用煎汤内服或并用鲜品捣汁外敷，用于治疗热毒血痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫咬伤、便血、痔血、崩漏下血等病症。马齿苋始载于《蜀本草》，称“主尸脚（人脚无论冬夏常拆裂）、阴肿”；《本草拾遗》称其“止消渴”；《本草纲目》称其“散血消肿，利肠滑胎，解毒通淋，治产后虚汗”，是临床常用的中药之一[2，3]。乔竹稳等[4]从马齿苋中分离得到甾醇及其苷类化合物；刘册家等[5]从马齿苋中分离得到氨基酸及腺嘌呤等化合物；另有文献报道马齿苋中具有黄酮类[6]、萜类[7]、香豆素类[8]化合物。现代药理实验表明，马齿苋具有抗真菌、抗病毒、降低高血脂症家兔全血黏度及血浆黏度、抗氧化、延缓衰老等作用[9]；李湘力等[10]用马齿苋治疗蜂毒过敏；此外，朱华斌[11]用马齿苋洗液治疗药物过敏性湿疹取得很好效果。本试验中，笔者对马齿苋的化学成分进行了分离与鉴定，以为马齿苋的进一步开发利用提供依据。

1 仪器与试药

XT5显微熔点测定仪（北京科仪电光仪器厂）；500M超导核磁共振波谱（NMR）仪（瑞士Bruker Biospin公司）；高效液相色谱（HPLC）仪、19091J-433毛细管气相色谱（GC）仪（美国Agilent公司）；IonSpec HiRes电喷雾质谱（ESI-MS）仪（美国Finnigan公司）；CHNS-O元素分析仪（意大利Thermoquest Italia S.p.A.公司）；ELSD 2000检测器（美国Alltech公司）。

马齿苋药材于2009年8月正值种子成熟时期采收于吉林省吉林市左家镇田间，洗净泥土，用沸水略烫后晾干，经长春中医学院鉴定教研室刘琦教授鉴定为马齿苋科植物马齿苋P.oleracea L.的干燥地上部分。AB-8型大孔吸附树脂（南开大学化工厂）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 样品提取与分离

取马齿苋干燥地上部分，粉碎后以正己烷为溶剂加热回流提取3次（2、2、1h），合并提取液，减压浓缩，得正己烷提取物。药渣挥散正己烷，加水煎煮提取2次（2、1h），滤过，合并提取液，浓缩为每1mL水含0.5g生药的溶液，缓慢加入乙醇，并调节醇浓度为70%，静置24h，抽滤，减压回收乙醇，水浴挥散残留乙醇至无醇味并浓缩，通过经预处理的大孔吸附树脂柱，依次用水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脱，分别收集洗脱液，减压浓缩，得各部位浸膏。

将10%乙醇洗脱物经硅胶柱色谱、三氯甲烷-甲醇（4∶1，V/V）洗脱，切割硅胶色谱柱，每段约2cm，经甲醇连续回流提取，用薄层色谱（TLC）指导合并相同馏分，蒸干得粗提物。再经制备型HPLC分离，流动相为甲醇-水（48∶52，V/V），得化合物1。

将正己烷提取物经硅胶柱色谱、石油醚（60～90℃）洗脱，得样品A。样品A用石油醚纯化后，加入甲醇及盐酸进行甲酯化，得供试品溶液，再经GC-MS联用技术分离鉴定，得化合物2～5。

3 结构鉴定

3.1 化合物1的鉴定

白色针状结晶（甲醇），mp 190～192℃，易溶于甲醇、乙醇，难溶于三氯甲烷、乙醚、石油醚；紫外吸收光谱在220nm及265nm波长处有最大吸收峰；Molish反应呈阳性，溴水加成反应使溴水褪色，5%三氯化铁反应呈阴性；ESI-高分辨率质谱（HRMS）（m/z）：395.1302[M+Na]+，767.2688[2M+Na]+；1H-NMR（300MHz，DMSO）δ：6.71（2H，s，C13-H，C5-H），6.45（1H，d，C7-H），4.89（1H，d，C1′-H），4.27（1H，t，C9-OH），4.09（2H，t，C9-H），3.75（6H，s，C10-H，C11-H）；13C-NMR（300MHz，DMSO）δ：153.6（C2，C6），134.7（C1），133.5（C4），131.0（C8），129.3（C7），105.3（C3，C5），103.4（C1′），78.0（C3′），77.4（C5′），75.2（C2′），70.8（C4′），62.3（C9），61.2（C6′），57.2（OCH3）。

1H+D2O-NMR谱显示，δ4.27ppm（1H）处质子信号消失，δ 4.89ppm处光谱峰不消失，且呈现双峰，偶合常数为4.5Hz。1H-1HCOSY谱显示，δ6.45与δ6.32、δ4.09相关；δ4.2与δ4.89、δ 3.6相关。无畸变极化转移增强谱（DEPT谱）显示，CH3：δ57.2（OCH3）；CH2：δ62.3（C9），δ61.2（C6′）；CH：δ131.0（C8），δ129.3（C7），δ105.3（C3，C5），δ78.0（C3′），δ77.4（C5′），δ75.0（C2′），δ70.8（C4′）。

综合上述信息并结合相关文献[5～7]，鉴定化合物1为丁香苷（Syringin）。该化合物为首次从该植物中分离得到。化合物1的结构式见图1。

图1 化合物1的结构式Fig 1Structural formula of compound 1

3.2 化合物2、3、4、5的鉴定

采用GC-MS联用技术。色谱柱：HP-5毛细管色谱柱（30.0m×250.00μm×0.25μm）；载气：氮气；流量：2mL·min－1；分流比：10∶1；质量扫描范围（m/z）：100～500amu；气化室温度：250℃；程序升温：初始温度为60℃，保持2min，以5℃·min－1升至280℃；电离方式：电轰击电离（EI）；离子源温度：220℃；电子能量：70eV；连接杆温度：200℃。化合物2、3、4、5的鉴定结果见表1。

表1 化合物2、3、4、5的鉴定结果Tab 1Identification of compound 2，3，4，5

4 讨论

笔者对马齿苋进行了化学成分研究，从中得到5个化合物——丁香苷、十三烷酸、9，12-十八碳二烯酸、11，14，17-二十碳三烯酸、二十六烷酸，均为首次从该植物中分离发现。

结合文献，笔者在对马齿苋化学成分研究过程中选择了水煎煮提取法，避免叶绿素类成分的混杂，并用大孔吸附树脂有效地去除了钾、钠等无机盐类成分的干扰，为马齿苋化学成分的分离纯化创造了良好条件。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：46-47.

[2] 宋立人.现代中药学大词典[M].北京：人民卫生出版社，2000：263.

[3] 张 文，张金莲.马齿苋中的微量元素分析[J].微量元素与健康研究，2004，21（3）：19.

[4] 乔竹稳，姚旭颖，单喜臣，等.马齿苋化学成分研究[J].齐齐哈尔大学学报，2012，28（1）：58.

[5] 刘册家，刘细雨，向 兰，等.马齿苋化学成分研究[J].中药材，2009，32（11）：1689.

[6] 杨子娟，郑毅男，向 兰，等.马齿苋的化学成分研究[J].中药材，2007，30（10）：64.

[7] SEO Y，SHIN J，LEE BJ，et al.Two biophenolic gly-cosides from Portulaca oleracea[J].Kor Chem Soc，2003，47（1）：43.

[8] 向 兰，郭东晓，鞠 瑞，等.马齿苋的化学成分研究[A].第六届全国药用植物与植物药学术研讨会论文集[C].北京：中国植物学会，2006：204.

[9] 杜士明，蔡 华，梁 俊，等.马齿苋药理研究进展及开发思路[J].中国药房，2007，18（27）：2145.

[10] 李湘力，黄鸣清，李万瑶.马齿苋治疗蜂毒过敏反应的实验研究[J].海峡药学，2007，19（6）：39.

[11] 朱华斌.马齿苋洗液治疗药物过敏性湿疹效果好[J].中华护理杂志，2007，2（4）：83.

Isolation and Identification of Chemical Constituents from Portulaca oleracea

GAO Hong-mei，YU Xiu-hua（Changchun University of Traditional Chinese Medicine，Changchun 130117，China）
ZHAO A-na（Changchun Central Hospital，Changchun 130051，China）

OBJECTIVE：To isolate and identify the chemical component of chemical constituents from Portulaca oleracea.METHODS：The chemical constituents were isolated by macroporous resin column，silica gel column and HPLC，and their structures were elucidated by NMR，ESI-MS，DEPT，1H-1H-COSY，HMQC and HMBC.RESULTS：5compounds were isolated from the extracts of P.oleracea，such as syringin（1），tridecanoic acid（2），9，12-octadecadienoic acid（3），11，14，17-eicosatrienoic acid（4），hexacosanoic acid（5）.They were isolated from P.oleracea for the first time.CONCLUSION：The study can provide reference for further development and application of P.oleracea.

Portulaca oleracea；Chemical component；Isolation；Structural identification

R284.1；R917

A

1001-0408（2012）47-4480-02

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.47.24

Δ吉林省科技发展计划项目（吉科合字第990558-6号）

＊讲师，博士研究生。研究方向：中药有效成分及新药研发。电话：0431-86172211。E-mail：690278770@qq.com

2012-04-11

2012-06-12）