奶牛隐性乳房炎检测方法的比较研究

张广斌 （山东畜牧兽医职业学院 山东 潍坊 261061）



奶牛隐性乳房炎检测方法的比较研究

张广斌 （山东畜牧兽医职业学院 山东 潍坊 261061）

本研究首先通过对选定奶牛场的隐性乳房炎的检测，用目前广泛用于奶牛隐性乳房炎检测的LMT法、体细胞计数法、电导率检测法、pH测定等方法进行比较，结果表明，在注意固定外界条件的前提下，四种方法检测结果差异不显著(P>0.05)，其中LMT法操作更方便，因而可以作为对奶牛隐性乳房炎进行流行病学调查的实际检测方法。

隐性乳房炎 检测方法 比较

奶牛隐性乳房炎发病率高，无明显的临床症状，隐蔽性较强，看不到乳汁和乳房变化，因此常被人忽视。但乳汁的生物化学、乳汁成分已发生变化，产奶量下降，奶品质降低。其最大的危害是随着病情的发展，会发展成临床型乳房炎。因此，如能做到早发现就可尽早采取必要措施，控制病情的发展，把损失减少到最小程度。因而，隐性乳房炎的早期、快速、简便可靠的诊断方法就显得非常重要。

目前，已建立了用于奶牛隐性乳房炎早期快速诊断的多种方法，包括电导率值检验法、pH值检测法、乳中体细胞直接记数法(以下简称SCC)和加州乳房炎检测法(以下简称LMT)等。本研究对选定奶牛场的乳样用不同检测方法进行检测，通过比较筛选流行病学调查的最佳检测方法。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验奶牛山东潍坊某奶牛场，共存栏200头奶牛，选取非临床型乳房炎的泌乳期健康牛130头试验用。

1.1.2 实验仪器CON-2A数字电导率计(深圳产)、Nucleo Counter体细胞计数器(意大利ChemoMetec公司生产)、PHS-3CD型酸度计(深圳产)。

1.1.3 隐性乳房炎诊断试剂 LMT诊断液，中国农科院兰州畜牧与兽药研究所生产。

1.2 试验方法

1.2.1 检测方法 （1）乳样采集：挤奶前用40℃左右0.02%~0.03%高锰酸钾温水溶液消毒手指，毛巾消毒后拧干备用。后用消毒湿毛巾擦拭乳头和乳房。按摩乳房，将挤出的头2~3把奶弃掉。用消毒灭菌后的三角瓶或试管，每个乳区取10ml混合后分两份，各40ml左右，一份做pH值、电导率的测定，另一份送往实验室做直接体细胞计数。（2）LMT检测：用诊断盘分别接取4个乳区的乳汁，每个乳区取3~4ml，倾斜诊断盘到一个角度(约45°)，倒出多余的乳汁，使每个乳杯内剩余乳汁2ml左右；用定量移液管在每个乳杯内加入诊断液2ml，将诊断盘水平旋转摇动，使乳汁与诊断液充分混合，30s内根据凝集反应程度进行判定，并以颜色反应作为参考，具体判定方法见表1。奶牛各乳区均为“－”或“±”的为LMT阴性牛，其他则为阳性牛。诊断盘经清水冲洗后再进行第2头检测。根据判定标准记录结果。（3）电导率测定：每头奶牛用4只50ml塑料烧杯，分别取4个乳头的乳汁各约30ml，插入数显温度计和铂黑电极(数显温度计和电导率仪操作方法按仪器说明书使用)，记录温度计的温度和该温度下电导率值与表2进行对照，确定4个乳头是否患有隐性乳房炎。凡判定为可疑的牛奶次日进行重复检测，若测得结果为阳性则记为阳性。（4）pH检测：用酸度计对4个乳区乳样进行测定，凡pH值大于6.8者判为隐性乳房炎阳性。（5）直接体细胞计数：根据仪器使用说明对样品进行处理并用体细胞计数器进行检测。判定标准：乳中体细胞超过50万个/ml，即判定奶牛隐性乳房炎阳性[10]。

表1 奶牛隐性乳房炎LMT判定标准

注：分娩后1周内或泌乳后期的母牛都会出现强阳性反应，即初乳期和泌乳末期乳中体细胞数均出现生理性升高，故该法不适于检查初乳期和泌乳末期的乳样。

表2 电导率法判定奶牛隐性乳房炎标准 (ms/cm)

注：温度上限是30℃，因样品少，37℃乳样很快就降到30℃以下；下限10℃已满足，在冬天可能低于0℃。但还是建议在10~30℃范围内测定。

2 试验结果

2.1 检测结果

通过对所检奶牛场进行的隐性乳房炎检测，其结果见表3。

表3 LMT法、pH值法、电导率值法和SCC检测结果 (%)

2.2 统计分析

试验数据统计表明，LMT法、pH检测法、电导率值测定法检测结果与SCC检测结果差异均不显著(P>0.05)。LMT法、pH检测法、电导率值测定法检测结果与SCC检测结果符合率均为98.81%。

3 讨论

（1）本研究通过用体细胞计数法、LMT法、pH检测法、电导率值测定法四种常用方法对所选牛场进行检测的结果表明，在注意固定外界条件的前提下，四种方法检测结果无显著差异。但是由于检测手段不统一，判定标准不完全一致，检测人员的主观性等原因导致检测结果出现不同。郑浩等应用上海乳房炎检测法(SMT)检测了南京某奶牛场88头奶牛，以体细胞计数(SCC)作为隐性乳房炎判定基准，计算检测结果与不同诊断阈值检测结果的相符率，结果表明，以30万个/ml为诊断阈值，检测结果与诊断结果的相符率最高[26]。欧阳五庆等用BMT与SCC的乳区阳性符合率为97.67%[27]。（2）对奶牛隐性乳房炎的发病率进行较大范围的流行病学调查，需选择一种既准确，又简单方便、快速的检测方法，比较四种方法：体细胞直接镜检计数法需要对乳样进行涂片的制备、染色和油镜检查，检测必须在有条件的实验室中进行，体细胞计数器价格比较昂贵。pH值检测法可用酸度计或者用特制的试纸进行，但检测结果可能会受到外界环境温度、以及奶牛生产胎次等因素的影响，而出现较大误差。电导率检测法，除需要特定的仪器外，检测结果也易受外界温度等因素影响较大，不同时间、不同条件的检测结果会出现较大的误差。LMT检测法，结果误差较小，且较为方便快速，是进行流行病学调查的良好方法。

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（2012–04–17）

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