麦门冬多糖对高同型半胱氨酸血症大鼠心肌缺血再灌注血管紧张素和内皮素-1的影响

杨 鑫 马越娇 王 实 刘晓舒 宋光熠 姜雅秋

(辽宁省基础医学研究所药理研究室，辽宁 沈阳 110101)

高同型半胱氨酸血症(Hhcy)是引发动脉粥样硬化及心脑血管疾病的病因之一，实验表明Hhcy可引发血管内皮损伤并加重心肌缺血再灌注的心肌损伤作用，麦门冬多糖等药物对Hhcy及其引发动脉粥样硬化及心脑血管疾病具有一定的防治作用〔1～3〕。为寻找有效的防治药物，同时探讨相关药物的防治机制，我们应用腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg复制Hhcy大鼠模型，在此基础上观察麦门冬多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注的防治作用。

1 材料与方法

1.1 材料 8周龄(体重190～210 g)SD大鼠(沈阳医学院实验动物中心)。实验动物许可证为辽宁省科学技术厅签发，许可证号：SCXK(辽)2003-0016。饲料为繁育鼠全价固体颗粒饲料(沈阳市于洪区前民动物饲料厂)。L-半胱氨酸(美国Sigma公司)。肌酸肌酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血管紧张素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、内皮素(ET)-1、同型半胱氨酸测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。麦门冬多糖(北京普惠天悦生物科技有限公司)。RM6240多道生理信号采集系统(成都仪器厂)。UV-265FW紫外分光光度计(日本光电工业株式会社)。JW-I型微型人工呼吸机(第二军医大学)。A5082酶标仪(泰灿奥地利有限责任公司)。

1.2 方法 取SD大鼠30只，随机分为3组，每组10只，雌雄各半。正常对照组，每天腹腔注射生理盐水5 ml/Kg;HHcy模型组，每天腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg;麦门冬多糖干预组，每天腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg，灌胃给予麦门冬多糖。所有大鼠均饲以常规动物饲料和水。连续给药10 w于末次给药30 min后腹腔注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)，麻醉后气管插管安装呼吸机，开胸结扎冠状动脉左室降支60 min后松开结扎线再灌注60 min。各组标Ⅱ导联全程记录心电图，并于再灌注60 min后取血、心脏。分离血清，生理盐水10%心肌组织匀浆，3 000 r/min离心15 min，取上清液。血清及心肌组织匀浆上清液按照测定试剂盒操作说明书测定 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1、同型半胱氨酸。

2 结果

2.1 血清同型半胱氨酸的变化 SD大鼠腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg 10 w后，Hhcy模型组和麦门冬多糖干预组大鼠血清同型半胱氨酸明显增高(P＜0.01)，见表1。

表1 麦门冬多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注血清CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的影响( s，n=10)

表1 麦门冬多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注血清CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的影响( s，n=10)

与Hhcy模型组比较：1)P＜0.01

组别 同型半胱氨酸(μmol/L)CK(U/ml)LDH(U/ml)AngⅠ(μg/L)AngⅡ(μg/L)ET-1(ng/L)1 1 773.7±148.2 145.0±46.3正常对照组 3.40±1.281) 2.29±0.961) 6.80±0.781) 309.6±98.71) 1 338.6±230.91) 48.8±8.61)麦门冬多糖组 18.82±6.05 1.49±0.411) 8.27±1.211) 415.0±101.71) 1 648.8±166.91) 57.6±17.71)Hhcy模型组 27.33±5.66 3.77±0.78 10.16±1.13 681.7±173.

2.2 心肌缺血再灌注心电图的变化 各组大鼠结扎冠状动脉左室降支60 min后及松开结扎线再灌注60 min后均表现为R波下降，ST段抬高并与T波融合为单项曲线，其中Hhcy模型组、麦门冬多糖干预组PP间期延长;正常对照组PP间期无明显变化。R波下降、PP间期延长各组间存在明显差异。Hhcy模型组出现4例心律失常，主要表现为心律不齐及PQ、QRS、QT间期延长的广泛传导阻滞。

2.3 心肌缺血再灌注CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的变化Hhcy模型组大鼠血清 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1明显高于正常对照组(P＜0.01)。麦门冬多糖干预组大鼠血清 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1 明显低于 Hhcy模型组(P ＜0.01)，见表1。

3 讨论

麦门冬又名麦冬，是百合科植物麦冬的干燥块根，其味甘、微苦、性微寒，归心、肺、胃经。含有甾体皂苷、高异黄酮、β-谷甾醇、糖类。具有多种药理作用，在心血管系统有抗心律失常和抗心肌缺血的作用〔4～6〕。Hhcy作为心脑血管疾病发病的独立危险因素已被大量的动物实验及临床试验证实，Hhcy加重缺血再灌注损伤的机制尚未完全明确，可能与血管损伤、促进氧化应激作用、增加钙的细胞毒性作用、引起线粒体功能障碍、加重兴奋性氨基酸毒性及促进DNA的损伤等多种因素有关〔7〕。本实验表明Hhcy大鼠心肌缺血再灌注后的损伤明显较正常大鼠加重。肾素-血管紧张素系统(RAS)是体内一组重要的血管活性物质，AngⅡ是其主要的有效成分。它是一系列蛋白水解反应的产物，开始于由肾素介导的血管紧张素Ⅰ的转变。AngⅠ对生物体内多数组织和细胞没有活性作用;而AngⅡ和AngⅢ却有较强的作用，尤以前者为甚。AngⅡ通过血管平滑肌、肾、肾上腺皮质等靶器官的相应受体而发挥生理效应。AngⅡ的受体主要有AT1和AT2两种亚型。AT1受体分布于人体的血管、心脏、肝、脑、肺、肾和肾上腺皮质、胃肠、子宫、胎盘、附睾和输精管。AT1受体又可分为AT1A受体、AT1B受体和AT1C受体。AngⅡ主要通过AT1受体发挥其心血管作用。本研究表明Hhcy大鼠心肌缺血再灌注与正常大鼠心肌缺血再灌注比较血清MPO、CRP含量明显升高，麦门冬多糖干预后明显降低。进一步证实Hhcy及在此情况下的心血管事件与炎症反应关系极其密切，麦门冬多糖通过抑制炎症反应对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。

1 宋光熠，黄 波，董 瑶，等.硫酸软骨素对高同型半胱氨酸血症过氧化影响〔J〕.中国公共卫生，2008;24(5)：603.

2 姜雅秋，宋光熠，谭 岩，等.高同型半胱氨酸血症致动脉粥样硬化的实验研究〔J〕.中国老年学杂志，2007;27(22)：2169-70.

3 苏 丹，王 实，夏大梅，等.麦门冬多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注保护作用〔J〕.中国公共卫生，2011;27(4)：470-1.

4 徐德生，冯 怡，周跃华，等.麦冬多糖中抗急性心肌缺血活性部位研究〔J〕. 中成药，2004;26(10)：832-7.

5 周跃华，徐德生，冯 怡，等.麦冬提取物对小鼠营养血流量的影响〔J〕. 中国实验方剂学杂志，2003;9(1)：22-4.

6 程金波，卫洪昌，章 忱，等.麦冬提取物抗犬心肌缺血的药效学实验研究〔J〕. 中国病理生理杂志，2001;17(8)：810.

7 王 静.高同型半胱氨酸血症与脑缺血再灌注损伤关系的研究进展〔J〕. 中华临床医学实践杂志，2007;6(6)：409-11.