系数倍率法测定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量

张 青，娄月芬，唐跃年（上海交通大学医学院附属新华医院药剂科，上海 2 0 0 0 9 2）

系数倍率法测定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量

张 青＊，娄月芬，唐跃年（上海交通大学医学院附属新华医院药剂科，上海 2 0 0 0 9 2）

目的：测定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量。方法：采用系数倍率法，样品不经分离直接测定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量，测定波长为2 6 0、2 8 0nm。结果：醋酸氯己定检测浓度线性范围为8～1 2µg·mL－1（r＝0.9 9 99），平均回收率为1 0 0.6 6%（RSD＝0.2 1%）。结论：本方法操作简便快速、结果准确，可用于该制剂的质量控制。

免洗手消毒液；醋酸氯己定；含量测定；系数倍率法

免洗手消毒液作为外用消毒剂，用于快速手清洁和消毒，是我院常用制剂，其主要由醋酸氯己定、卡波姆9 4 0、甘油、乙醇等制成。鉴于卡波姆9 4 0在紫外区有吸收，会干扰主药醋酸氯己定的测定，笔者根据系数倍率法的原理，不经分离直接测定醋酸氯己定的含量。结果表明本方法操作简便快速、结果准确，可用于该制剂的质量控制。

1 仪器与试药

HP-8 4 5 3紫外分光光度仪（美国惠普公司）。

免洗手消毒液（自制，批号：0 9 0 4 1 6、0 9 0 5 1 4、0 9 0 9 2 3，规格：5 0 0 mL∶0.2 5 g）；醋酸氯己定标准品（中国食品药品检定研究院，批号：0 1 8 3-9 4 0 1，纯度：≥9 9%）；醋酸氯己定原料药（锦州九泰药业有限责任公司，批号：0 7 0 3 0 2，纯度：≥9 7.5%）；卡波姆9 4 0（青岛美生源生物科技有限公司，批号：2 0 0 8 1 2 0 4）；水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 波长对的选择

精密称取1 0 5℃干燥至恒重的醋酸氯己定标准品约5 0 mg，置于1 0 0 mL量瓶中，加9 5%乙醇溶解并稀释至刻度，得溶液Ⅰ，摇匀。按处方比例，精密称取1 0 5℃干燥至恒重的卡波姆9 4 0约0.3 g，置于1 0 0 mL量瓶中，加入适量水，溶胀过夜，加甘油1.5 g、9 5%乙醇6 8 mL，用适量三乙醇胺调节后，加水至刻度，摇匀，得溶液Ⅱ。精密量取溶液Ⅰ、Ⅱ各1.0mL，分别加6 0%乙醇稀释至5 0 mL。以6 0%乙醇作参比，在2 0 0～3 5 0 nm波长范围内扫描，紫外吸收光谱见图1。

图1 紫外吸收光谱图1.醋酸氯己定；2.辅料Fig 1 UV spectrogram 1.chlorhexidine acetate；2.excipients

从图1可见，溶液Ⅰ的最大吸收波长为2 6 0 nm（即醋酸氯己定的最大吸收波长），溶液Ⅱ无最大吸收峰，但在2 6 0 nm波长也有吸收，可干扰醋酸氯己定的测定，故采用系数倍率法以消除干扰。根据系数倍率法的要求[1]：吸光度之差ΔA要尽可能大、吸收光谱尽可能在曲线平坦处和倍率系数（K值）接近1。因此选择2 6 0、2 8 0 nm为测定和参比波长。

2.2 K值的测定

精密量取溶液Ⅱ0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2mL分别置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀释至刻度，摇匀。以6 0%乙醇作参比，每种溶液均在2 6 0、2 8 0 nm波长处测定吸光度A260、A280，按倍率系数K＝A260/A280计算平均值K＝

1.1 2 9 8，RSD＝0.5 0%（n＝7）。

2.3 标准曲线的制备

精密量取溶液Ⅰ0.8、0.9、1.0、1.1、1.2 mL分别置于5 0 mL量瓶中，加6 0%乙醇稀释至刻度，摇匀。以6 0%乙醇作参比，每种溶液均在2 6 0、2 8 0 nm波长处测定A260、A280，并计算吸光度差值ΔA＝A260－KA280，可得ΔA与浓度（c）的回归方程：ΔA＝0.0 2 9 8 2 c+0.0 0 2 4 3（r＝0.9 9 9 9，n＝5）。结果显示，醋酸氯己定检测浓度线性范围为8～1 2µg·mL－1。

2.4 精密度试验

取同一样品溶液适量，共5份，平行测定。结果显示，醋酸氯己定含量的RSD＝0.3 8%（n＝5），表明该方法精密度良好，能满足含量测定的要求。

2.5 稳定性试验

取同一样品溶液适量，分别于0、2、4、8、2 4h依次测定。结果显示，醋酸氯己定含量的RSD＝0.5 5%（n＝5），表明在室温下样品溶液在2 4 h内稳定，能满足含量测定的要求。

2.6 回收率试验

精密称取1 0 5℃干燥至恒重的醋酸氯己定标准品适量，按处方比例制备模拟溶液，精密量取0.8、1.0、1.2mL分别置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀释至刻度，摇匀。以6 0%乙醇作参比，在2 6 0、2 8 0 nm波长处测定A260、A280，计算ΔA，并代入回归方程计算浓度及回收率，结果见表1。

表1 回收率试验结果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

2.7 样品含量测定

取3批样品，精密量取1.0 mL分别置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀释至刻度，摇匀。以6 0%乙醇作参比，在2 6 0、2 8 0 nm波长处测定A260、A280并计算ΔA，代入回归方程计算醋酸氯己定含量，结果3批样品中醋酸氯己定含量分别为标示量的1 0 2.6 6%、1 0 1.2 8%、1 0 2.0 3%。

3 讨论

应用等吸收双波长消去法时，干扰组分的吸收光谱中至少需要有1个吸收峰/谷，这样才有2个波长处存在等吸光度值。如干扰组分的吸收光谱中找不出等吸收波长，就不能用此法，而系数倍率法可克服这一困难[2]。在应用系数倍率法时，应注意对K值的选择，防止因K值过大而使信噪比减小，影响ΔA的稳定性。同时选择2个波长时，应避免在光谱曲线的“陡坡”上测定，并使2个波长保持合理的距离[1]。

卡波姆为丙烯酸键合丙基蔗糖或季戊四醇烯丙醚的高分子聚合物，分子中有大量的羧酸基，为引湿性很强的白色疏松状粉末。在试验初期的样品处理过程中笔者发现，按处方比例，将各组分逐一用6 0%乙醇溶解、稀释、紫外扫描，各组分在2 6 0 nm波长下的吸光度之和不等于样品在2 6 0 nm波长下的吸光度，且有较大的误差，这是与吸光光度法的基本定律“朗伯-比尔定律”相背离的。在排除操作上可能存在的问题后，发现溶液中的溶质卡波姆可因浓度改变而有离解、缔合、与溶剂间发生作用等原因而发生偏离定律的现象[2]；且卡波姆所形成的胶体亦可引起入射光的散射，对透射光的强度有直接影响，进而使吸光度产生偏差。

于是将样品稀释液进行超声处理后，但仍未见明显效果。考虑到可能是因为处方中的三乙醇胺已使卡波姆的结构发生改变，即羧酸基已被反应，超声未能增加其解离或溶解。于是采用化学降解的方法[3]，加入适量酸类降解试剂冰醋酸，发现能有效解决上述现象。需要注意的是，不能加入盐酸作为酸类降解试剂，因为二者会反应生成盐酸氯己定，而后者是极微溶于水和乙醇的，会更大地影响样品的紫外吸收。而且主药本身就是氯己定的醋酸盐，加入冰醋酸不会对主药产生任何物理和化学上的改变。

卡波姆在水中溶胀的过程中，可适当搅拌以促进溶胀，但是由于其较大的黏度以及疏水性，会产生大量的气泡。制剂制备时可采用“酸碱法”[4]，即先将其调节为pH 2.5以下，胶体黏度降低成液体，气泡则自动消失，再调节为pH 6～1 1时成凝胶，可提高制剂质量，使凝胶更加细腻。该制剂处方中添加的甘油可促进卡波姆浸润溶胀，且具有保湿作用[5]。

本方法将除醋酸氯己定以外的其他组分均作为一个整体去确定K值，直接消除吸收干扰，无需进行分离，有一定的创新意义；且操作简便快速、结果准确，可用于该制剂的质量控制。

[1] 马广慈.药物分析方法与应用[M].北京：科学出版社，1 9 9 9：2 4 9-2 5 1.

[2] 李发美.分析化学[M].第5版.北京：人民卫生出版社，2 0 0 3：1 9 8-2 1 3.

[3] 高素莲，周宁国.现代分离纯化与分析技术——在高分子材料研究中的应用[M].合肥：中国科学技术大学出版社，2 0 0 7：2 4 2-2 4 3.

[4] 梅清华，励石寒，高 玲.卡波姆凝胶制备的新方法[J].中国医院药学杂志，2 0 0 6，2 6（1）：8 2.

[5] 邓 平，时 涛，邵 峰，等.氯麻滴鼻凝胶的制备及质量控制[J].中国药房，2 0 0 8，1 9（1 9）：1 4 8 8.

Content Determination of Chlorhexidine Acetate in Wash-free Antiseptic Lotion by Coefficient Multiplying Ratio Spectrophotometry

ZHANG Qing，LOU Yue-fen，TANG Yue-nian
（Dept.of Pharmacy，Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine，Shanghai 2 0 0 0 9 2，China）

OBJECTIVE：To determine the content of chlorhexidine acetate in Wash-free antiseptic lotion.METHODS：The content of chlorhexidine acetate was directly determined at 2 6 0nm and 2 8 0nm by coefficient multiplying ratio spectrophotometry without preliminary separation.RESULTS：The linear range of chlorhexidine acetate was 8～1 2µg·mL－1（r＝0.9 9 99）with an recovery of 1 0 0.6 6%（RSD＝0.2 1%）.CONCLUSION：The method is proved to be simple，rapid，accurate and applicable for the quality control of wash-free antiseptic lotion.

Wash-free antiseptic lotion；Chlorhexidine acetate；Content determination；Coefficient multiplying ratio spectrophotometry

R9 2 7.2；R9 7 9.7

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 2 9-0 2

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.2 2

2 0 1 1-0 9-1 0

2 0 1 2-0 2-1 0）