舒肝和胃颗粒对试验性大鼠慢性浅表胃炎的治疗作用

李翠文 黎敏 侯培珍

包头医学院第一附属医院急诊科，内蒙古包头 014010

舒肝和胃颗粒对试验性大鼠慢性浅表胃炎的治疗作用

李翠文 黎敏 侯培珍

包头医学院第一附属医院急诊科，内蒙古包头 014010

目的探讨舒肝和胃颗粒对氨水致慢性浅表性胃炎大鼠的治疗作用。方法将60只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、舒肝和胃颗粒低、中、高剂量组及三九胃泰组，采用大鼠饮用0.02%氨水90 d，制作大鼠慢性浅表性胃炎动物模型。用HE染色，光镜观察胃黏膜的病理变化；采用硝酸还原酶法检测血液一氧化氮（NO）含量及免疫组化检测胃黏膜环氧化酶-2（COX-2）阳性表达。结果舒肝和胃颗粒低、中、高剂量组能减轻氨致慢性浅表性胃炎大鼠胃黏膜的病理性损伤，降低血清NO含量，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；高剂量组能明显降低COX-2阳性表达，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。舒肝和胃颗粒各剂量组和三九胃泰组疗效比较，差异无统计学意义（P＞0.05）结论舒肝和胃颗粒可明显减轻攻击因子对胃黏膜的损伤和炎症反应，保护胃黏膜。

舒肝和胃颗粒；慢性浅表性胃炎；环氧化酶-2；一氧化氮

舒肝和胃颗粒具有理气、健脾、和胃功效，多年临床观察对慢性浅表性胃炎具有良好的疗效。本实验通过观察舒肝和胃颗粒对慢性浅表性胃炎大鼠胃黏膜组织病理学变化，并检测在胃黏膜保护和损伤机制中起重要作用的NO及COX-2指标的研究，从实验角度进一步探讨舒肝和胃颗粒治疗慢性浅表性胃炎的疗效及作用机制。

1 动物与试药

1.1 动物

Wister大鼠60只，雌雄各半，体重（200±30）g，由内蒙古大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（蒙）2002-0001。

1.2 药品、试剂及仪器

舒肝和胃颗颗粒：包头医学院第一附属医院中医科王睿琦提供，每克颗粒相当于原生药6 g，临床用蒸馏水配成0.500、0.250、0.125 g生药/mL的混悬液。三九胃泰颗粒，湖南三九南开制药有限公司生产，批号：0809051。氨水，洛阳化学试剂厂，批号：010318。戊巴比妥钠：佛山市化工实验厂，批号：960901。NO试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号：20050816。COX-2试剂盒，福州迈新生物技术开发有限公司。鼠单克隆抗体批号：RMA-0549。

2 方法与结果

2.1 动物分组、造模、给药

Wister大鼠随机分为6组（空白对照组，模型组，三九胃泰组，舒肝和胃颗粒高、中、低剂量组），每组10只。除空白对照组（每日饮用蒸馏水）外，其余各组造模（0.02%氨水大鼠自由饮用，连续90 d）。造模成功后，禁食16 h（以20%戊巴比妥40mL/kg）麻醉，断头处死模型组大鼠，其余分别给予不同药处理。舒肝和胃颗粒高、中、低剂量组分别为25.00、12.50、6.25 g/kg（分别相当于推荐临床试验60 kg成人日用汤药剂量的20、10、5倍）。三九胃泰胶囊组2 g/kg（相当于推荐临床试验60 kg成人日用剂量的20倍）。药物组采用等容积不等浓度药液法给药，1mL/100 g，模型组给予等容积生理盐水，每日一次，连续30 d。

2.2 标本采集及处理

末次给药后禁食16 h，断头取血4 mL，测定血清NO含量（μmol/L）。剖腹快速取出全胃，10%甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色。光镜下观察黏膜病变，每张切片观察10个视野，计算各组炎症级数的均数及标准差，比较各组间差异的显著性。病变判断标准与积分方法，0级：表示胃黏膜层无炎症细胞；1级：表示胃黏膜层可见少许散在的炎症细胞；2级：表示胃黏膜层可见较多的炎症细胞；3级：表示胃黏膜层可见聚集成堆的炎症细胞浸润。0～3级可记作：0、1、2、3分。采用免疫组织化学染色方法，实验操作步骤按COX-2试剂盒说明进行，免疫组化切片，胞浆呈黄褐色，在高倍镜下（×200）计数5个视野的阳性细胞所占百分数。

2.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 15.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差±s）表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.4 结果

2.4.1 各组大鼠胃黏膜病理变化模型组胃黏膜炎细胞浸润较严重，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），说明大鼠慢性浅表性胃炎模型建立成功。经治疗后舒肝和胃颗粒各剂量组、三九胃泰组与模型组比较，炎症程度明显减轻，差异具有统计学意义（P＜0.05）；舒肝和胃颗粒与三九胃泰组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），说明舒肝和胃颗粒与三九胃泰疗效基本相同。见表1。

表1 各组大鼠胃黏膜炎症程度的比较（n=10）

2.4.2 各组大鼠NO含量及COX-2阳性细胞表达情况模型组NO含量、COX-2阳性表达与空白对照组比较明显升高（P＜0.05）。与模型组比较，舒肝和胃颗粒各剂量组和三九胃泰组NO含量显著降低（P＜0.05）；舒肝和胃颗粒高剂量组、三九胃泰组COX-2阳性数量表达明显减少（P＜0.05）。见表2。

3 讨论

慢性浅表性胃炎（chronic superficial gastritis，CSG）是不伴有胃黏膜萎缩、胃黏膜层以淋巴细胞和浆细胞为主的慢性炎性细胞浸润的慢性胃炎[1]。中医认为，本病病位虽在胃，但与肝关系密切。病因主要为情志抑郁、饮食寒热内伤胃膜，导致肝气不舒，胃失和降，痰淤气滞，寒热互结，胃膜受伤。病情可见胃脘疼痛、痞胀嗳气、烧心反酸、心烦口苦、咽干恶心等症。治疗以疏肝和胃止痛、清热祛寒消积为法。舒肝和胃颗粒方药中柴胡、青皮、郁金、川楝子舒肝理气，鸡内金、焦槟榔、瓦楞子、厚朴和胃化积，石膏、黄芩、黄连、干姜清化寒热，元胡、五灵脂理气活血止痛。合方具有疏肝理气，和胃消痞，制酸止吐，通络止痛之功效。本实验胃黏膜病理观察表明，舒肝和胃颗粒低、中、高剂量组均能明显减轻大鼠慢性浅表性胃炎的组织病理学改变，提示舒肝和胃颗粒可抑制氨对胃黏膜的损伤，减轻炎症反应，促进胃黏膜修复，其作用与三九胃泰相同。

表2 各组大鼠NO含量及胃黏膜COX-2阳性细胞表达情况的比较（±s，n=10）

表2 各组大鼠NO含量及胃黏膜COX-2阳性细胞表达情况的比较（±s，n=10）

注：与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，**P＜0.05；“-”表示无数据

组别剂量（g/kg）NO含量（μmoL/L）COX-2阳性细胞表达（%）空白对照组模型组舒肝和胃颗粒大剂量组舒肝和胃颗粒中剂量组舒肝和胃颗粒小剂量组三九胃泰组--25.00 12.50 6.25 2.00 56.44±4.51 106.93±25.36* 83.40±8.83** 84.50±9.86** 88.24±11.00** 84.40±9.43** 1.60±1.36 33.00±9.89 18.70±2.83** 27.80±7.22 28.70±6.91 28.40±5.01**

NO是由诱生型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase，Inos）在炎症或免疫反应时被激活，催化L-精氨酸产生，通过组织内铁的释放、阻断线粒体的功能和阻碍DNA的合成等，引起细胞和组织的损伤[2-3]。COX-2为诱导型酶，在正常组织中不表达或弱表达，在受到各种物质刺激下均可使炎症部位被快速诱导表达，产生大量的炎症性前列腺素和其他炎症介导物引起炎症反应，其高表达与炎症等的发生、发展存在密切关系[4-5]。本实验证明，模型组NO、COX-2表达均较正常对照组明显增高，提示胃黏膜受到氨水刺激后，NO、COX-2表达增多，参与了慢性浅表性胃炎的病理过程。疏肝和胃颗粒低、中、高剂量三组血清NO含量均降低，大剂量组COX-2蛋白表达明显减少，与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），揭示疏肝和胃颗粒可下调NO、COX-2水平，从而减轻及抑制攻击因子对胃黏膜的损伤的作用，保护胃黏膜，从另一个角度证实了中医肝郁辨证方法中通过调节“肝气”治疗“胃病”的疏肝和胃理论根据[8-11]，为慢性浅表性胃炎的临床研究奠定了基础。

[1]陆再英，钟南山.内科学[M].北京：人民卫生出版社，2008：382.

[2]马凤余，鄢顺琴，凤良元，等.胃舒灵Ⅱ对大鼠胃黏膜保护因子的影响[J].中国实验方剂学杂志，2009，15（1）：48-50.

[3]张良，袁冬，方泰惠，等.平温胃舒胶囊对大鼠实验性慢性胃炎模型治疗作用机制研究[J].现代中药研究与实践，2008，22（5）：29-34.

[4]张宏亮，徐杨，范晓.不同病因导致的应激性胃黏膜损伤中环氧化酶-2的改变[J].华西医学，2010，25（5）：833-836.

[5]李合国，劳绍贤.清浊安中汤对慢性胃炎脾胃湿热证大鼠模型环氧合酶-2的影响[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（8）：166-169.

[6]刘冬梅.胃康舒对大鼠实验性慢性胃炎大鼠黏膜前列腺素E2含量影响[J].山西中医杂志，2009，25（2）：42-434.

[7]刘渊.小议慢性浅表性胃炎治疗经验[J].医学信息2010，21（5）：2857.

[8]岳玉春.中西医结合治疗慢性胃炎50例[J].解放军医药杂志，2011，23（4）：69.

[9]陆忠红，仇训华，黄丽儿.综合护理干预对慢性胃炎及消化性溃疡患者生活质量的影响[J].齐鲁护理杂志，2012，18（13）：83-84.

[10]岑爱丽.无痛胃镜下热极治疗疣状胃炎临床观察与护理[J].齐鲁护理杂志，2012，18（7）：42-43.

[11]周正颜，李海强，韦刚，等.三种方法治疗成熟型疣状胃炎81例疗效观察及护理[J].齐鲁护理杂志，2011，17（22）：15-16.

Treatment effect of Shuganhewei Granule on experimental rats w ith chronic superficial gastritis

LICuiwen LIMin HOU Peizhen
Department of Emergency,the First Affiliated Hospital of Baotou Medical College,Inner Monggol Autonomous Region, Baotou 014010,China

ObjectiveTo evaluate the therapeutic effects of Shuganhewei Granule for treating chronic superficial gastritis. M ethods Sixty rats of Wister were divided into different dosage groups of control group,Shuganheweimodel group with low,middle,high dose and Sanjiuweitai Capsule group.0.02%NH3H2O was used to establish ratsmodel of the chronic surfacial gastritis by drink freely.The pathological changes of chronic superficial gastritis was tested by HE colors;the content of nitric oxide synthase was tested by using nitrate reductase and the positive rate of cyclooxygenase-2 protein expression was tested by immunohisochemistry in chronic superficial gastritis model.ResultsShuganhewei Granule on obvious therapeutic action of treatment chronic superficial gastritiswas obviously.It could lighten the pathological changes of chronic superficial gastritis.Different dosage groups and model group inflammatory cell invasion had significantly different(P＜0.05).The positive rate of cyclooxygenase-2 protein expressio in chronic superficial gastritis,there were significantly differences in high of dosage group and model group(P＜0.05).There were no difference between the Sanjiuweitaigroup and different dosage groups of ShuganheweiGranule(P＞0.05).ConclusionShuganheweiGranule can obviously lighten attack factors on gastricmucosa damage and inflammation and protect gastricmucosa.

ShuganheweiGranule;Chronic superficial gastritis;Cyclooxygenase-2;Nitric oxide synthase

R285.5

A

1673-7210（2012）11（b）-0008-02

李翠文（1978-），女，汉族，硕士研究生，主治医师，主要从事消化疾病研究。

侯培珍（1945-），女，汉族，教授，硕士生导师，主任医师，主要从事消化道肿瘤的研究。

2012-05-29 本文编辑：卫轲）