血浆P－选择素和血小板聚集功能与急性脑梗死的相关性探讨

魏伟明，叶加建，邵美英

(福建省老年医院，福建福州350003)

急性脑梗死(ACI)致残率高，不但给患者带来痛苦，而且给家庭和社会带来沉重的负担。ACI患者常伴有纤溶系统功能失调或障碍，易发生血液学的多种改变。为了解急性ACI患者的血浆P－选择素水平和血小板聚集功能的变化，我们应用ELISA法对58例ACI患者治疗前后进行血浆P－选择素水平检测，同时测定其血小板聚集功能，探讨P－选择素和血小板聚集功能与ACI的关系，以及P－选择素与血小板聚集功能的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

①急性ACI组:58例急性ACI患者均为本院2008年2月～2008年12月在神经内科住院患者。其中男45例，女13例，平均年龄在64±7岁，均由我院神经内科经临床明确诊断的急性脑梗死病人。②正常对照组:30例，男20例，女10例，均为我院体检中心经健康体检合格的正常人，无高血压、心、脑、血管疾病，也无内分泌疾病或其它慢性疾病，近期未曾服用任何溶栓、抗凝、抗血小板药物。

1.2 标本采集

用塑料注射器抽取肘静脉血(空腹)6ml，平分于两个标准塑料试管中，分别以109mmol/L枸橼酸钠1∶9抗凝。用来检测P－选择素的标本，平衡后置TDL－5A离心机内3000转/min离心15min，直接吸取上层血浆进行检测。用来检测血小板聚集功能的标本，先置室温一段时间，让红细胞自然沉降，吸取上层的富血小板血浆于标准塑料管内备用，然后将标本置TDL－5A离心机内3000转/min离心15min制备贫血小板血浆，准备完毕后再行检测。

1.3 血浆P－选择素测定

采用双抗体夹心ELISA法测定血浆P－选择素浓度，酶免试剂盒由上海太阳生物技术公司提供，酶标仪为美国 BIO－RAD 550型，测定波长为405mm，操作过程严格按照试剂盒说明书。

1.4 血小板聚集功能测定

仪器采用北京普利生公司提供的LBY－NJ2型血液凝聚仪，诱导剂为 40μM的二磷酸腺苷(ADP)、15mM的花生四烯酸(AA)，由北京普利生公司提供。检测方法为比浊法，操作严格按仪器操作说明书进行。

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 两组血浆P－选择素和血小板最大聚集率的比较

急性ACI患者血浆P－选择素水平和血小板最大聚集率均明显高于正常对照，两者均存在显著性差异(P＜0.01)。(见表1)

表1 两组血浆P－选择素和血小板最大聚集率检测结果(s)

表1 两组血浆P－选择素和血小板最大聚集率检测结果(s)

与正常对照组比较，*P＜0.01

30 9.89±2.66 42.10±4.76 48.40±4.58急性ACI组 58 26.75±4.87* 76.21±5.98* 80.85±4.96诱导剂正常对照组组 别 n P－选择素(ng/L)血小板最大聚集率(%)ADP诱导剂 AA*

2.2 急性ACI患者治疗前后血浆P－选择素和血小板最大聚集率比较

急性ACI患者治疗后(住院治疗7d)血浆P－选择素水平和血小板最大聚集率与治疗前相比均有显著性降低(P＜0.01)，但与正常对照组相比均仍有显著性差异(P＜0.01)。(见表2)

表2 治疗前后血浆P－选择素和血小板最大聚集率检测结果(s)

表2 治疗前后血浆P－选择素和血小板最大聚集率检测结果(s)

与正常对照组比较，*P＜0.01;与治疗前比较，▲P＜0.01

诱导剂正常对照组组 别 n P－选择素(ng/L)血小板最大聚集率(%)ADP诱导剂 AA 30 9.89±2.66 42.10±4.76 48.40±4.58 ACI治疗前 58 26.75±4.87* 76.21±5.98* 80.85±4.96*ACI治疗后 58 16.82±4.07＊▲ 58.22±4.27＊▲ 60.22±4.37＊▲

2.3 急性ACI患者治疗前血浆P－选择素和血小板最大聚集率的相关性分析

经统计学处理，急性ACI患者治疗前的血浆P－选择素水平与ADP诱导的血小板最大聚集率、AA诱导的血小板最大聚集率呈明显的正相关关系(P＜0.01)。

3 讨论

急性ACI是一种血小板血栓性的脑血管病。动脉粥样硬化(AS)和血栓形成是ACI发生、发展的主要原因，血小板的活化和炎症反应在ACI发生、发展中起着重要作用。P－选择素存在于静息的血小板膜表面，介导细胞与细胞、细胞与基质间黏附作用，参与炎症、AS和血栓形成［1］。P－选择素是一种分子量为14000的黏附蛋白，当血小板活化时，а－颗粒与胞浆膜结合，P－选择素显露于胞浆膜表面，并随着血小板的破坏释放入血，另有部分血小板质膜上的P－选择素脱落至血浆中，成为血浆中P－选择素的来源。因此血浆内P－选择素是血小板活化的最特异的分子标志物［2］，常用以表达血小板的活化程度。研究表明［3］，P－选择素不仅对血小板黏附起作用，而且对血小板的聚集也具有重要作用。活化的P－选择素使血小板与中性粒细胞相互激活，活化的中性粒细胞通过释放Cathepsin G和弹力酶诱发血小板活化和促进血小板聚集。在血栓形成中，血小板尚通过对中性粒细胞和单核细胞而放大其血栓形成的作用。血小板聚集是血小板参与血栓形成的重要环节，也是血小板活化的标志之一。

本研究结果显示:急性ACI患者血浆P－选择素水平和血小板最大聚集率均明显高于正常对照组，治疗后(住院治疗7d)血浆P－选择素和血小板最大聚集率与治疗前相比均有显著性降低，但仍高于对照组;ACI患者血浆P－选择素与血小板最大聚集率呈明显的正相关。说明急性ACI患者体内血小板处于高度活化状态;治疗后仍显著高于对照组，可能是ACI患者发病7d时血小板的活化不能完全被抑制，仍处于功能活跃状态，还需要一定时间的抗血小板活性药物进行持续性抗栓治疗;通过对急性ACI组与对照组的血小板最大聚集率检测对照，说明急性脑梗时血小板不仅被高度活化，活化的血小板促进了血小板发生黏附、聚集，使聚集功能大大增强，两者呈平行正相关，具有启动血栓形成并使已形成的血栓继续扩大化，这是急性ACI发生的重要病理基础。

研究提示，急性ACI患者血浆中存在着P－选择素的高水平表达现象，血小板聚集功能增强，应及时选用抗血小板活性药物进行持续性抗栓治疗，并适当配合降纤、抗纤溶药物治疗，防止血栓的进一步扩大化。同步测定血浆P－选择素和血小板聚集，不仅可以了解血小板的释放功能，还可以了解其聚集功能，具有互补作用。因此，通过检测血浆P－选择素和血小板聚集的变化，可作为ACI患者病情判定以及治疗效果观察的指标，对了解病情及观察预后具有十分重要的临床价值。

［1］董德平，钱开成，于银坤.糖尿病患者P－选择素检测的临床意义［J］.上海医学检验杂志，2000，15(3):165

［2］Abela GS，Huang R，Ma H，et al.Laser－light scattering，a new method for continuous monitoring of platelet activation in circulation fluid ［J］.Lab Clin Med，2003，141(1):50

［3］Merten M，Thiagarajan P.P－selectin expresion on platelets determines size and stability of platelet aggregates［J］.Circulation，2005，102(1):193