川芎茶调方超微散与其普通散质量对比分析研究

★ 黄何松 于玲玲 王焱 李跃辉 蔡光先 李俊*

（1.江西中医学院 南昌 330004；2.澳门大学中华医药研究院 澳门 999078；3.湖南省中医药研究院 长沙 410006）

川芎茶调散源于《太平惠民和剂局方》，具有疏风止痛的功效，为《中国药典》2005版一部所收载。本文通过对川芎茶调方超微散与其普通散的粒径、显微特征、薄层色谱及其指标成分阿魏酸溶出行为的对比研究，为川芎茶调方超微散的临床应用提供试验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 BFM-T6BI型翻滚式贝利粉碎机（济南倍力粉技术工程有限公司）；SHIMADZULC-10AT高效液相色谱仪（日本岛津），N2000化学工作站；ZRS-8G智能药物溶出试验仪（天津大学无线电生产厂）；依利特Hypersil ODS C18色谱柱（4.6mm×200mm）；winner3001干粉激光粒度测定仪及激光粒度分析系统（济南微纳仪器有限公司）。

1.2 试药 川芎茶调方超微散与其普通散由湖南省中医药研究院超微工程中心提供（批号：20080716）；阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号110773-9910），川芎对照药材（中国药品生物制品检定所，批号120918-200406），羌活对照药材（中国药品生物制品检定所，批号120935-200405）；甲醇为色谱纯，正己烷、苯、乙酸乙酯、乙酸均为分析纯，水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 川芎茶调方超微散与其普通散的制备

2.1.1 超微散（以下简称CW散）按原方比例称取方中各药味，混合粉碎成粗粉，置烘箱中（60℃）干燥10小时，粉碎成超微粉，备用。

2.1.2 普通散（以下简称PT散）参照《中国药典》2005版二部[川芎茶调散]项下制法，按比例称取方中各药味，粉碎成细粉，过100目筛，混合均匀，备用。

2.2 粒径测定 采用Winner3001干粉激光粒度仪测定CW散的粒径，结果表明，CW散的D50为11.66μm，粒径小于75μm的颗粒累积达91.3%。

2.3 显微特征对比 CW散与PT散显微特征对比结果见表1（图1）。

表1 显微特征对比表

图1 显微特征图

2.4 薄层色谱对比[1]

分别称取CW散与PT散各1.5克，加石油醚（60℃-90℃）10mL，密塞，时时振摇，浸提4小时，滤过，滤液浓缩至1mL，作为供试品溶液。另取川芎、羌活对照药材各0.2克，同法制分别制成对照药材溶液。按处方配比称取除川芎及羌活以外的其它药味适量，按制法分别制成缺川芎、缺羌活的阴性样品，同法分别制成缺川芎、缺羌活的阴性样品溶液。吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G板上，川芎对照板以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。羌活对照板以正己烷-苯-乙酸乙酯（2：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，在105℃下烘烤至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性样品色谱中在相应位置上无斑点。

2.5 溶出行为对比

2.5.1 色谱条件[2]色谱柱：Hypersil ODS 5μm色谱柱（4.6mm×200mm）；流速1.0mL/分；以甲醇-2%乙酸溶液（25：75）为流动相；检测波长为323nm。

2.5.2 对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品适量，用甲醇-2%乙酸（30：70）溶液配制成每1mL含阿魏酸0.15mg的对照品溶液。

2.5.3 线性关系考察 分别精密吸取阿魏酸对照品溶液（0.15mg•mL-1）1、2、3、4、5μL，注入高效液相色谱仪，测定。将阿魏酸峰面积与进样量进行回归得方程：y=387561x-3999.1（R=0.999），阿魏酸进样量在0.15-0.75μg之间线性关系良好。

2.5.4 精密度试验 精密吸取对照品溶液2μL，依法测定，重复测定5次，测得阿魏酸峰面积RSD为1.3%。

2.5.5 溶出度的测定[3]分别精密称取CW散与PT散各60克，置溶出杯中，加经脱气处理后的重蒸馏水900mL作为溶出介质，参照《中国药典》2005版二部溶出度测定法（浆法），恒温37.5℃，转速75r/分，分别于5、10、15、25、40、60、120、240分钟处定位精密吸取5mL溶出液至离心管中（同时在等温条件下补充5mL重蒸馏水），离心，将上清液全部转移至蒸发皿中，水浴蒸干，再用甲醇-2%乙酸（30：70）溶液溶解并转移至5mL容量瓶中，定容，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）过滤，取续滤液注入高效液相色谱仪，依法测定，计算得CW散与PT散中阿魏酸在每个时间点的溶出量，结果见表2（图2）。

表2 阿魏酸累积溶出量

图2 阿魏酸HPLC图谱

2.5.6 稳定性试验 精密吸取2.5.5项下样品溶液（10分钟时间点）10μL，依法测定4次，每隔2小时测定1次，测得阿魏酸的峰面积RSD值为2.95%。

2.5.7 累积溶出百分率及溶出曲线 根据2.5.5项下样品溶液（240分钟时间点）中阿魏酸的溶出量，可假定CW散、PT散在该溶出条件下阿魏酸总溶出量均为30mg，计算得阿魏酸的累积溶出百分率，见表3，绘制溶出曲线（见图3）。

表3 阿魏酸累积溶出百分率

图3 阿魏酸溶出曲线

2.5.8 溶出速率比较 将表3中数据按Weibull分布模型进行拟合。结果表明，CW散与PT散中阿魏酸体外溶出行为均符合Weibull分布，拟合方程分别为 ：ln[-ln（1-F1）]=0.373lnt1-1.19（r1=0.97）、ln[-ln（1-F2）]=0.51lnt2-2.01（r2=0.98），根据拟合方程计算阿魏酸的溶出参数，见表4。

表4 阿魏酸溶出参数

3 讨论

川芎茶调方超微散与其普通散中阿魏酸的溶出参数表明，其溶出行为与溶出曲线相一致：当溶出量小于50%时，超微散中阿魏酸的溶出速率远远超过普通散，达3倍以上；溶出量超过50%后，超微散与普通散中阿魏酸的溶出速度均明显放缓；随着溶出量的增加，超微散与普通散中阿魏酸溶出量与溶出速率趋于接近。

中药的药效成分通常分布于细胞内与细胞间质，以细胞内为主，中药经超微粉碎后，粒径变小，细胞尺寸改变，有利于药效成分溶出。将超微粉碎技术应用于中药成方制剂中，能加快其药效成分的溶出速度，对于提高药品质量，保证临床疗效具有重要意义。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京：化学工业出版社，2005：340.

[2]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京：化学工业出版社，2005：339.

[3]蔡光先，李跃辉，杨永华.生脉超微颗粒与其散剂的体外溶出度研究[J].中国医药学报，2004，19（10）：603-606.