血清RF和抗CCP抗体浓度检测在类风湿性关节炎诊断中的临床意义

吴定昌，肖 婷，黄超林

（福建医科大学附属龙岩第一医院·龙岩市第一医院1.检验科；2.中心实验室，福建 龙岩364000）

类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种由自身免疫障碍引致免疫系统攻击关节的长期慢性炎症，在任何年龄均可发生，在我国的发病率为0.3%－0.4%［1］。虽然目前对RA病因和发病机制的了解还不完全清楚，但已发现在关节软骨被破坏的过程中，由滑膜细胞和淋巴细胞合成并释放许多细胞因子，它们可以用于对RA进行早期诊断的分子标志物。目前应用于早期RA的免疫学指标主要有类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、抗角蛋白抗体（AKA）、葡萄糖－6－磷酸异构酶（GPI）、白细胞介素－17（IL－17）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）等［2，3］。本文以RA患病组、非RA患者组以及健康对照样本为试验材料，测定血清中RF和抗CCP抗体浓度，采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）评估它们对RA疾病的临床诊断意义。

1 资料与方法

1.1 资料

收集2008年10月－2010年3月由本院临床确诊的RA患者117例，诊断均符合1987年美国风湿病学会修订的RA诊断标准［4］；其中男性65例，女性52例，年龄范围为16－72岁，平均41.8±14.6岁。RA患者均排除高血压、糖尿病、肝肾疾病、肿瘤、急性感染和其他自身免疫性疾病等。非RA患者86例，包括系统性红斑狼疮（SLE）31例、干燥综合征（SS）23例、强直性脊柱炎（AS）18例、骨关节炎（OA）14例，年龄15－74岁。选取本院健康体检合格者91例作为健康对照组，男52例，女39例，平均年龄39.6±11.5岁。对照组与RA患者组在性别、年龄方面无显著差异（P＞0.05）。所有受试者于研究前3个月内均未服用过任何免疫抑制剂及激素。

1.2 检测指标与方法

所有患者及健康对照组均空腹抽取静脉血5 ml，3 000 r／min离心10 min分离血清，置于－20℃冰箱保存待检。RF采用速率散射比浊法检测，试剂盒采用上海川翔生物科技有限公司产品，在用全自动生化分析仪（日立7600）上进行，其结果＞20 U／ml定为阳性临界值。采用德国欧蒙公司酶联免疫吸附试验（ELISA）方法进行抗CCP抗体检测，具体操作按试剂说明书进行，以结果＞15 U／ml定为阳性临界值。

1.3 统计学处理

各组数据均以平均数（x）±标准差（s）表示。用SPSS17.0统计软件，对各组RF、抗CCP抗体浓度及阳性率进行F检验或χ2检验；用ROC曲线分析血清RF、抗CCP抗体含量在RA诊断中的敏感性、特异性、曲线下面积等指标。

2 结果

2.1 各组血清RF、抗CCP抗体含量比较

本研究中各组血清RF和抗CCP抗体含量检测结果见表1。RA组血清RF含量为58.81±21.76 U／ml，显著高于非RA组（15.12±12.48 U／ml）和健康对照组（8.76±4.17 U／ml）；血清RF含量在非RA组与健康对照组间差异不显著（P＞0.05）。血清的RF阳性率在RA组、非RA组和健康对照组中分别为78.9%、20.9%和3.3%，差异达到显著水平（P＜0.05）。RA组的抗CCP抗体浓度和阳性率分别为22.47±10.55 U／ml和73.5%，均显著高于非RA组和健康对照组（P＜0.05）。健康对照组的抗CCP抗体浓度和阳性率均显著低于非RA组（9.41±3.80 U／ml和5.8%）。

表1 各组血清RF、抗CCP抗体浓度比较

2.2 血清RF、抗CCP抗体检测的ROC曲线分析

依据各组血清RF和抗CCP抗体检测结果绘制ROC曲线，见图1；各检测指标曲线下面积、敏感性（%）、特异性（%）、Youden指数结果见表2。RF诊断RA的ROC曲线下面积为0.929，95%的置信区间为0.900－0.958；抗CCP抗体诊断RA的ROC曲线下面积为0.946，95%的置信区间为0.922－0.971。RF／抗CCP抗体联合检测诊类风湿性关节炎的ROC曲线下面积为0.969，95%的置信区间为0.955－0.984。血清RF、抗CCP抗体单项检测时，RF指标的敏感性、特异性和Youden指数分别为0.785、0.962和1.747；抗CCP抗体指标的敏感性、特异性和 Youden指数分别为0.870、0.928和1.798。RF／抗CCP抗体2个指标联合检测时，敏感性、特异性和Youden指数分别达到0.947、0.911和1.858。

3 讨论

图1 血清RF、抗CCP抗体浓度的ROC曲线

表2 血清RF、抗CCP抗体浓度检测的敏感度、特异度和Youden指数的比较

RF是一类自身抗体，针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，包括Ig M、Ig A、IgG、IgD、IgE五型，其中Ig M被用于各种类风湿疾病的检测，大约70%－80%的RA患者RF为阳性，但并不特异。1998年Schellekens与同事证实瓜氨酸残基是RA特异的抗中间丝相关蛋白抗体识别表位的必需成分，能与人荚膜上皮细胞的核周角质颗粒及大鼠食管上皮细胞的角质层反应，与他们特异性结合，从而认为瓜氨酸是RA血清抗中间丝相关蛋白相关抗体识别的主要抗原决定簇［5］。因此与RF一样，血清中抗CCP抗体浓度对RA具有很好的敏感性和特异性，且抗CCP抗体阳性的RA患者骨破坏较抗CCP抗体阴性者严重。

国霞等（2011）采用ELISA检测RA患者血清抗CCP抗体及RF浓度，结果发现它们在RA患者的浓度显著高于其他风湿性疾病组和健康对照组（P＜0.01），且在RA活动组和RA非活动组中亦有明显差异（P＜0.01）［6］。周郁等（2011）的研究发现对RA的实验室检测RF敏感性略高于抗CCP抗体，但特异性远远不如抗CCP抗体，两者联合检测其特异性提高到98%；因此，对疑似患者进行抗CCP抗体和RF联合检测可大大提高早期诊断率，有利于早期治疗［7］。通过比较RA患者和非RA患者血清中抗CCP抗体和RF等细胞因子的浓度差异，杨吉娟等（2009）发现RA组患者RF和抗CCP抗体阳性率高于非RA组患者（P＜0.05），RA组中抗CCP抗体和RF敏感性、特异性分别为76.3%和79.6%［8］。本研究发现RA组血清RF和抗CCP抗体浓度和阳性率均显著高于非RA组和健康对照组（P＜0.05）；RF指标的敏感性、特异性和Youden指数分别为0.785、0.962和1.747，敏感性较抗CCP抗体指标低，特异性比较抗CCP抗体指标高；但当使用RF／抗CCP抗体2个指标联合检测时，敏感性有较大提高，达到0.947，而特异 性仍然不低于0.911。

本研究通过检测血清中RF与抗CCP抗体浓度，探讨了它们作为RA临床诊断分子标志物的可靠性，结果发现RF与抗CCP抗体均可用于RA疾病的临床诊断，但将RF与抗CCP抗体指标联合检测具有较好的特异性，还可提高RA的检出率。本研究结果有助于提高RA的临床诊断，及早采取有效治疗措施改善患者预后。

［1］王银山.类风湿性关节炎的研究进展［J］.中国现代医药杂志，2008，10（10）：131.

［2］Brennan FM，McInnes IB.Evidence that cytokines play a role in rheumatoid arthritis［J］.The Journal of Clinical Investigation，2008，118（11）：3537.

［3］Lee AN，Beck CE，Hall M.Rheumatoid factor and anti－CCP autoantibodies in rheumatoid arthritis：a review［J］.Clinical Laboratory Science，2008，21（1）：15.

［4］Arnett FC，Edworthy SM，Bloch DA，et al.The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis［J］.Arthritis ＆ Rheumatism，1988，31（3）：315.

［5］Schellekens GA，De Jong B，Van Den Hoogen F，et al.Citrulline is an essential constituent of antigenic determinants recognized by rheumatoid arthritis－specific autoantibodies［J］.Journal of Clinical Investigation，1998，101（1）：273.

［6］国 霞，栾清欣，刘丰海.应用ROC曲线评价GPI、抗CCP抗体及RF在类风湿性关节炎中的诊断价值［J］.医学理论与实践，2011，24（1）：20.

［7］周 郁，李 力，伏建峰，等.抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子联合检测在类风湿性关节炎诊断中的应用［J］.西北国防医学杂志，2011，32（1）：58.

［8］杨吉娟，宫 怡，竺 红.抗CCP抗体、AKA和RF联合检测在类风湿关节炎诊断中的价值［J］.宁夏医科大学学报，2009，31（1）：43.