HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明

姜嘉鑫 訾阳

HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明

姜嘉鑫 訾阳

建立高效液相色谱法测定盐酸西布曲明的含量。色谱柱为Venusil MP C18，流动相为含0.1%甲酸的20 mmol/L醋酸铵-甲醇(35∶65)。检测波长为224 nm，流速为1.0 ml/min。盐酸西布曲明在0.0225～0.225 mg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998);平均回收率为98.87%，RSD为0.65%(n=6)。本方法简便、准确、灵敏、重现性好，可作为盐酸西布曲明的含量测定方法。

高效液相色谱法;苦瓜清脂素胶囊;盐酸西布曲明

盐酸西布曲明(Sibutramine)为非苯丙胺类食欲抑制药，是作用于中枢神经系统的减肥药物，近年来有盐酸西布曲明多例的死亡报告［1］。一些不法分子在减肥类保健食品中非法添加盐酸西布曲明，严重危害消费者健康。为有效地打击这种制假掺伪的不法行为，参照有关文献［2，3］，采用高效液相色谱法，对市售的减肥保健品进行了检验。本文选择在流动相中加入0.1%甲酸，改善了分离效果，使样品中盐酸西布曲明和其他成分得到了很好的分离，建立了HPLC法测定苦瓜清脂素胶囊中盐酸西布曲明的分析方法，结果令人满意。

1 仪器与试药

1.1 仪器 LC-20AD液相色谱仪(日本岛津公司);CP225 d分析天平(德国赛多利斯公司);KQ-250 dB型数控超声波清洗器(江苏昆山超声仪器有限公司)。

1.2 试药 盐酸西布曲明对照品(批号:100624-200401，中国食品药品生物制品检定院);苦瓜清脂素胶囊(A企业，批号:100106、100804和110203);甲醇为色谱纯;其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备 ①对照品溶液精密称取盐酸西布曲明对照品11.25 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。②供试品溶液 取本品胶囊10粒，精密称定重量，倾出内容物，混匀，精密称取内容物0.12 g，置25 ml量瓶中，加甲醇适量，超声15 min使溶解，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经0.45 μm滤膜滤过，即得供试品溶液。

2.2 色谱条件 色谱柱:venusil MP C18(4.6 mm×100 mm，3 μm);流动相:20 mmol/L醋酸铵(含0.1%甲酸)-甲醇(35∶65);检测波长:224nm;流速:1.0 ml/min;进样量:10 μL;柱温:室温;色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.3 线性关系考察 精密量取对照品储备液1、2、4、6、8、10 ml，分别置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密量取10 μL进样，以峰面积Y对含量X(mg/ml)作线性回归。得回归方程为:Y=19907500X+12929.25 r=0.9998结果表明，盐酸西布曲明在0.0225～0.225 mg/ml范围内浓度与峰面积线性关系良好。

2.4 精密度试验 精密量取盐酸西布曲明浓度为0.09 mg/ml的对照品溶液，连续测定6次，以峰面积计算 RSD为0.1%。

2.5 重复性试验 称取苦瓜清脂素胶囊(批号:100106)6份，同2.1.2进行测定，计算含量，RSD为1.4%(n=6)。

2.6 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8 h测定以峰面积计算RSD为0.52%(n=5)，结果表明，供试品溶液室温8 h内稳定。

2.7 加样回收试验 精密称取已知含量的样品(批号:100106)6份，分置25 ml量瓶，分别精密加入0.229 mg/ml的盐酸西布曲明对照品溶液4、5和6 ml，加甲醇适量，同2.1.2进行测定，平均回收率为98.87%，RSD为0.65%。

2.8 样品含量测定 取本品苦瓜清脂素胶囊(批号:100106、110203、100804)10 粒，倾出内容物，混匀，精密称取0.12 g，置25 ml量瓶中，加甲醇适量，同2.1.2操作进行测定，三批的含量分别为20.34、18.06和0 mg/g。

3 讨论

3.1 检测波长的选择 取对照品溶液经二极管陈列检测器在190～300 nm波长范围内扫描，在224 nm波长处有最大吸收，故将224 nm作为检测波长。

3.2 流动相的选择 以20 mmol/L醋酸铵-甲醇为流动相，用甲酸调节pH值2.5～6.0，经试验，当流动相pH值为4.5(含0.1%甲酸)时盐酸西布曲明色谱峰形对称，与其他成分的分离度符合规定，故流动相确定为20 mmol/L醋酸铵(含0.1%甲酸)-甲醇(35∶65)。

［1］ 魏艳红.关于盐酸西布曲明审查的早期报告．药品评价杂志，2010，7(2):29．

［2］ 张小松，夏铮铮，周琳，等.检测中药保健品中非法掺入的盐酸西布曲明．华西药学杂志，2005，20(4):293-2951．

［3］ 郑萍，朱兰，罗霞，等.RP-HPLC测定盐酸西布曲明中的有关物质．华西药学杂志，2005，20(2):80-82．

Determination of Sibutramine in Kuguaqingzhisu capsule by HPLC

JIANG Jia-xin，ZI Yang．Department of Bidogical Resource，Lushan Branch Institate of Guangxi Technical College，Liuzhou 545616，China

To establish a method for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule by HPLC.HPLC was used Venusil MP C18column，mobile phase was methanol-20 mmol/L ammonium acetate(0.1%formic acid)(35:65)，The flow rate was 1.0 ml/min with detection wavelength at 224nm.The linear range of sibutramine was from 0.0225～0.225 mg/ml(r=0.9998).The average recoverery was 98.87%and RSD was 0.65%(n=6).The method is simple，accurate and suitable.It can be used for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule．

HPLC;Kuguaqingzhisu capsule;Sibutramine

545616 柳州，广西工学院鹿山学院生物资源系(姜嘉鑫);河北省食品药品检验院(訾阳)

訾阳 E-mail:zxr3487@126.com