VEGF及血清激素水平与围绝经期无排卵型功能失调性子宫出血的研究

河北省邢台市第三医院（054000）张志革

围绝经期功能失调性子宫出血（dysfunctional uterine bleeding，DUB）是妇科常见病，发病率约占妇科门诊患者的10%。其出血机制至今尚不清楚。现代研究表明，功血是在激素调节下，子宫局部微环境发生改变的结果[1]。尤其是血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜的周期性血管生成中的作用是近年来人们关注的热点[2][3]。本研究观察发现，血管内皮生长因子[4][5][6]，在围绝经期无排卵性功能失调性子宫出血患者子宫内膜中的表达及其与血清激素水平之间的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象 年龄40～55岁；根据排除法诊断为无排卵型功能失调性子宫出血；近3个月未使用激素类药物及避孕器；无激素替代治疗史；月经周期和（或）经期紊乱，经量增多者为病例组。既往月经正常，现月经周期不规则延长、经期正常或缩短、经量正常或减少（如此月经周期已达到或超过3次）为对照组。病例组85例，对照组10例。

1.2 方法 所有研究对象经过问诊、体检、B超及血常规、凝血分析检查后，排除其他器质性病变，病例组即行诊刮术，对照组月经来潮后6h内行诊刮术，标本立即固定，同时采外周血3ml测定激素水平。

1.2.1 血清激素水平测定 采用放免法，测定促卵泡素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）、雌二醇（E2）、孕酮（P）和睾酮（T），试剂盒为天津德普生物技术有限公司。

1.2.2 子宫内膜病理学诊断标准 按1998年国际妇科病理协会子宫内膜增生方法，分为简单型增生（SH）、复杂型增生（CH）和不典型增生（AH）。

1.2.3 VEGF蛋白测定的表达 采用免疫组化SP法检测，兔抗人VEGF一抗及试剂盒购于中山金桥生物技术有限公司，即用型SABC试剂盒及DAB显色剂购自武汉博士德生物制品有限公司。按SP法行VEGF染色与DAB显色，严格控制实验条件。使用TBS缓冲液代替一抗作对照。所有切片标本的免疫反应与显色反应在同一时间、相同条件下进行。

1.2.4 结果判定 VEGF染色阳性表达为棕黄色，主要存在于细胞质，胞膜和胞质同时着色亦为阳性。两位医师采用双盲法同时观察切片5个具有代表性的视野（×400）计数增生细胞总数和阳性细胞个数，得出阳性细胞百分率。计分标准采用3个参数的半定量积分方法，即染色强度（A）、阳性细胞数（B）和两者积分的乘积。阳性细胞≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分；着色强度以大多数阳性细胞呈现的染色来计分，淡黄色为1分，浅棕褐色为2分，深棕褐色为3分。两者积分乘积，0分为阴性（-）、1～4分为弱阳性（+）、5～8分为中度阳性（++）、9～12分为强阳性（+++），中度阳性和强阳性为过度表达（++～+++），同时以此计算阳性率。

附表1 各组激素检测结果（±s）

附表1 各组激素检测结果（±s）

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附表2 VEGF表达的检测结果

1.3 统计学方法 运用SPSS13.0统计软件进行统计学处理，对计量资料运用t检验，对计数资料的比较采用χ2检验；标准水准α=0.05双侧。

2 结果

2.1 子宫内膜病理结果 对照组10例均为增殖期。病例组单纯增生62例，复杂增生20例，不典型增生2例，子宫内膜腺癌1例。不典型增生及子宫内膜癌未列入统计。病例组与对照组比较，睾酮明显升高，其他各项差异无显著性，两组除FSH高于10IU/L外，其他各值均在正常范围。子宫内膜单纯增生组（SH组）与复杂增生组（CH组）比较各项激素水平无显著性，见附表1。

2.2 VEGF检测结果 VEGF在病例组中表达阳性率为5 6.0 9%，低于对照组（8 0.0 0%），差异有统计学意义（P＜0.05），见附表2。

3 讨论

女性更年期常因卵巢无排卵而发生功能性子宫出血。绝经前10年促卵泡素水平已开始升高，黄体生成素尚保持正常水平，随着卵巢功能衰退，虽然促卵泡素、黄体生成素均升高，也不能使卵泡继续生长，因此，促卵泡素水平升高是卵巢老化的早期表现。本研究中，病例组和对照组促卵泡素均高于10IU/L，提示两组均存在卵巢功能减退，但两者比较无差异性。

睾酮是女性体内最有活性的雄激素，它与雄激素受体结合产生效应，雄激素受体广泛分布在中枢神经系统、外周神经系统和大脑皮层。绝经前的健康女性每日产生睾酮约300μg，大约是成年男性的5%。在生殖中期，循环中的睾酮水平和肾上腺产生雄激素的甾体化合物即脱氢表雄酮开始下降，并且一直持续到绝经后期。在正常月经周期中，睾酮不是主要调节激素。本研究中，观察组血清睾酮水平明显升高，提示血清睾酮升高在围绝经期功血发生中发挥重要作用，但作用机制尚待进一步研究[7]。

引起异常子宫出血的原因很多，其中子宫内膜血管过度形成是其原因之一。子宫内膜血管生成是指新血管形成的过程，受多种因子调控，其中VEGF被认为作用最强，特异性最高的调控因子。

本研究发现，在病例组中VEGF在子宫内膜中的表达明显低于对照组。VEGF主要作用于血管内皮细胞，与内皮细胞上的KDR和flt-1受体高亲和力结合后，可作为内皮细胞特异性有丝分裂原，诱导内皮细胞增生，毛细血管袢形成[8]，同时可增加微血管通透性，通过诱导间质产生，促进体内新血管的生成[9]。VEGF通过自分泌或旁分泌机制刺激血管内皮增生、移位和结构形成，促进血管生长发育并维持血管的通透性[10]。观察组VEGF表达显著减少[11]，由于VEGF能为血管内皮的形成提供重要基质，子宫内膜中的微血管形成也相应减少，并可能导致子宫内膜血管发育不良，引起子宫异常出血，这表明VEGF在无排卵性功血的发病机制中起着重要作用。

综上所述，功血的发生发展是一个复杂的过程，本文着重总结了血管内皮生长因子与功血的关系及其与相关因素的调节，若能将功血与VEGF的研究成果结合起来治疗功能失调性子宫出血，必将为功血的靶向治疗开辟一个全新的前景。