IL－18、IL－12、TNF－α在妊娠期肝内胆汁淤积症患者肝功能异常中的检测价值

陈 忠，许建娟，秦 凤

（1．无锡市妇幼保健院，江苏 无锡214002；2．无锡市崇安区广瑞路街道社区卫生服务中心，江苏 无锡214011）

妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）是妊娠所特有的疾病之一，以妊娠中晚期出现皮肤瘙痒、黄疸及肝功能异常为特点，其发病与雌激素、遗传和环境有密切关系，现已广泛地引起临床的重视。ICP对母体影响不大，对胎儿具有很大的危害性，可致早产、胎儿窘迫、死胎和死产等，使围生儿病率及死亡率增高［1］。ICP合并肝功能异常时会加重患者病情，影响母婴预后，因此早期发现ICP合并肝功能异常显得尤为重要。ICP的病因、发病机制及肝功能异常的机制目前仍未完全明了。近年来研究发现，免疫细胞及其分泌的细胞因子参与了肝病的发生发展过程。白细胞介素18（interleukin－18，IL－18）、白细胞介素12（interleukin－12，IL－12）直接或间接地作用于肝脏，是肝病发病的重要炎性细胞因子［2］。肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor－alpha，TNF－α）在慢性肝炎肝细胞损伤的中作用也不容忽视［3］。本文通过检测血清IL－18、IL－12和 TNF－α在ICP合并肝功能异常患者的水平，探讨其在ICP患者肝功能异常中的检测价值。现报道如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料

选自2010年6月至2011年5月在无锡市妇幼保健院住院的ICP患者共96例，患者年龄23－38岁，平均28．6±6．3岁，孕周31－42周，其中＜37周56例，37－42周40例。初产妇79例，经产妇17例。单胎90例，双胎6例。

1．2 ICP诊断标准

（1）血清总胆汁酸（TBA）显著性升高。（2）妊娠中晚期患者出现皮肤瘙痒以及黄疸等不适。（3）肝功能实验指标中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）呈轻中度升高（2－10倍）。（4）血清胆红素（BIL）呈轻中度升高［4］。

1．3 患者分组

ICP患者肝功能检查指标包括TBA、ALT、AST。根据患者TBA水平的升高程度分为3组，A1组TBA 为11－20μmol／L，A2组 TBA 为21－40 μmol／L，A3 组 TBA 为 大 于 40μmol／L。 根 据ALT、AST水平的升高程度分为3组，B1组为转氨酶升高在正常值2倍以下，B2组为转氨酶升高在正常值2－5倍，B3组为转氨酶升高在正常5倍以上者。

1．4 检测方法

抽取患者肘静脉血5ml，3 000r／min，离心5 min，分离血清，－70℃保存待检，肝功能在4h内检测完成。肝功能测定采用日本7170S全自动生化分析仪测定。血清IL－18、IL－12、TNF－α采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行测定，操作严格按照说明书进行。

1．5 统计学处理

所有数据采用SPSS16．0软件处理，计量资料采用均数±标准差（¯x±s）表示，数据采用t检验，相关性分析采用Spearman相关系数进行分析，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 不同TBA水平IL－18、IL－12、TNF－α的表达

根据检测患者TBA水平的不同分为3组，A1组患者56例，A2组患者28例，A3组患者12例。在不同 TBA 水平血清IL－18、IL－12、TNF－α表达水平对比中，A1、A2、A3组的IL－18、TNF－α表达之间差异有统计学意义，P＜0．05；血清IL－18、TNF－α水平与TBA水平均呈正相关（r＝0．69和0．65，P＜0．05）。A1、A2、A3组的IL－12表达之间差异无统计学意义，P＞0．05。见表1。

表1 不同TBA水平中IL－18、IL－12、TNF－a水平之间的表达（pg／ml）

2．2 不同转氨酶水平IL－18、IL－12、TNF－α的表达

根据检测患者转氨酶水平的不同分为3组，B1组患者43例，B2组患者29例，B3组患者24例。在不同转氨酶水平中血清IL－18、IL－12、TNF－α水平之间的表达水平对比中，B1、B2、B3组的IL－18、TNF－α表达之间差异有统计学意义，P＜0．05；血清IL－18、TNF－α水平与转氨酶水平均呈正相关（r＝0．63和0．56，P＜0．05）。B1、B2、B3组的IL－12表达之间差异无统计学意义，P＞0．05。见表2。

组别 n IL－18 IL－12 TNF－a B1 43 168．5±43．6 54．2±24．9 127．3±16．8 B2 29 276．7±54．8 60．5±29．7 285．4±51．7 B3 24 402．1±58．8 68．3±33．2 402．8±63．5

3 讨论

ICP是妊娠特发疾病，在临床上以皮肤瘙痒、生化上以肝内胆汁淤积的血液学指标异常、病程上以临床表现及生化异常在产后迅速消失或恢复正常为特征，发病率为0．8%－12%。ICP的病因、发病机制及肝功能异常的机制目前仍未完全明了［4］。

ICP患者合并有肝功能异常临床并不少见。有学者专门指出临床上对ICP应该制定出相应的轻重型标准［5］。当患者发生ICP时，血清TBA显著升高，疏水性的胆汁酸具有较大的细胞毒性，对线粒体膜以及细胞膜产生损伤作用，生物膜受损越严重，谷丙转氨酶逸出于细胞外使血清中的浓度增加，使血清的转氨酶浓度变得越高［6］。胆汁酸水平的升高与机体肝功能损害的程度密切相关，孕妇肝功能损害程度越严重，围生儿预后越不良［7］。本组结果显示，ICP患者TBA以及转氨酶均呈不同程度的升高，提示ICP患者伴随有不同程度的肝功能损害发生。

在ICP患者肝功能异常判断方面，本组研究采用检测血清IL－18、IL－12、TNF－α水平以判断ICP患者肝功能异常程度。IL－18主要由T细胞、NK细胞及活化的巨噬细胞等所产生的细胞因子，参与宿主的免疫应答，参与乙型肝炎肝细胞损害的过程，在肝炎引起的肝细胞凋亡中起重要作用，并与肝脏的炎症严重程度相关［2］。IL－18通过肝细胞炎性坏死或者凋亡的途径，激活细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、NK细胞增强细胞毒性作用而最终导致肝实质细胞的免疫性损伤［8］。IL－12是一种异源二聚体细胞因子，其主要由B细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞（DC）及角质细胞等所产生的细胞因子，IL－12对特异性的免疫以及非特异性的免疫均能发挥重要的作用，IL－12是架起特异性免疫以及非特异性免疫之间的桥梁，是一种前炎症性细胞因子［9］。IL－12可以独立作用于CTL和 NK细胞，介导细胞毒性的肝脏炎性反应并促进其分泌干扰素γ（interferon－gamma，IFN－γ）、TNF－α等细胞因子，促进NK细胞和相关受体及分子的表达，在抗肿瘤免疫及抗感染免疫中起重要作用［2］。同时IL－12具有增强IL－18炎性作用，IL－18在IL－12协同作用下可刺激NK细胞增殖，上调NK细胞的毒性作用，引起肝微循环障碍，导致肝脏局部缺血，阻止了肝脏的氧化磷酸化，最终引起肝细胞损害［10］。这说明IL－12可以单独或者协同IL－18参与病毒性肝炎的炎性损伤的过程。目前有关IL－12检测的报道结果不一，可能与病毒性肝炎患者复杂的免疫反应有关。本组研究显示，不同TBA水平及转氨酶水平患者的IL－12表达水平之间无统计学差异，显示IL－12在ICP患者肝功能异常的过程中并不参与作用。本组研究结果还显示，不同TBA水平及转氨酶水平患者的IL－18表达水平不同，差异有统计学意义，血清IL－18表达水平与TBA及转氨酶的表达水平成正相关。研究结果表明IL－18水平与ICP患者的肝功能异常呈现密切的相关性，IL－18表达水平越高，患者预后越差。TNF－α是一种重要的内源性细胞因子，主要由活化的单核／巨噬细胞产生，能杀伤和抑制肿瘤细胞，促进中性粒细胞吞噬，诱导肝细胞急性期蛋白合成，促进细胞增殖和分化，TNF－α能够直接地损伤血管内皮细胞因子，从而引起血管通透性的增加，引起炎症反应与细胞及器官的损害［3，11］。本组研究结果显示，不同TBA水平及转氨酶水平中患者的TNF－α表达水平不同，差异有统计学意义，血清TNF－α表达水平与TBA及转氨酶的表达水平成正相关，显示血清TNF－α水平与ICP肝功能异常呈现密切的相关性。结果提示ICP孕妇血清TNF－α水平增加可能参与了ICP发病时的肝细胞损害过程，并反映了ICP病情的严重程度。

综上所述，本组研究认为测定血清IL－18、TNF－α水平的变化可以用于评估ICP患者肝功能异常情况，对判断ICP患者预后也有一定的价值。

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