DNA定量分析及HR-HPV检测在宫颈病变筛查中的价值*

刘 洁，平 静，常正义，王俊利，王春芳，解继胜#

1)右江民族医学院组织胚胎学教研室 百色 533000

2)右江民族医学院附属医院病理科 百色 533000

3)右江民族医学院附属医院检验科 百色 533000

宫颈癌是威胁妇女健康的第二大恶性肿瘤，早期筛查和治疗是防治的关键。高危型人乳头状瘤病毒 (high risk human papilloma virus，HR－HPV)感染是宫颈癌发生的直接病因和必要条件[1]。作者以活组织病理学检查(以下简称活检)结果作为诊断的金标准，评价DNA定量分析及HR－HPV检测在宫颈病变筛查中的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2009年8月至2010年12月在右江民族医学院附属医院行DNA定量分析和HR－HPV检测的已婚壮族妇女430例，年龄20～65(41.6±7.6)岁。所有病例1 a内无宫颈手术及药物史。

1.2 DNA定量分析 用专用采样刷在患者宫颈鳞柱交界部位采集宫颈脱落细胞，将刷头浸泡在样本收集管的固定液内，液基薄层细胞制片，行Feulgen染色，用全自动细胞图像分析系统(AcCell)进行图像扫描处理。阴性:以正常2C细胞为主，未见异倍体细胞及异倍体细胞峰;阳性:DNA指数(DI)＞2.5和1～2之间的细胞数高于被检测细胞总数的10%，或出现异倍体细胞峰及大量DI≥2.5的细胞(即≥5C细胞)。DI≥2.5的样本需经细胞诊断医师在显微镜下再次核实。

1.3 HR-HPV检测 采用亚能生物技术有限公司的HPV基因分型检测试剂盒，利用基因芯片技术，按操作说明，检测23种HPV基因型(包括18种高危型和5种低危型)。

1.4 活检 在阴道镜下进行宫颈病变组织多点活检，宫颈无明显病变者3、6、9、12点常规取材，病理医师盲法阅片。结果分为良性细胞改变(BCC)、宫颈上皮内瘤样变Ⅰ级(CINⅠ)、CINⅡ、CINⅢ和鳞状细胞癌(SCC)。

1.5 统计学处理 采用SPSS 14.0进行统计分析，计算DNA定量分析、HR－HPV检测及两者联合检测的灵敏度、特异度、约登指数、阳性预测值和阴性预测值。

2 结果

2.1 DNA定量分析及HR-HPV检测结果 见表1。

表1 DNA定量分析及HR-HPV检测结果 例(%)

2.2 DNA定量分析联合HR-HPV检测结果 见表2。

2.3 3种检查方法结果的比较 以活检BCC+CINⅠ为正常，以DNA定量分析和(或)HR－HPV检测阳性即为联合检测结果阳性计算联合检测的灵感度、特异度、约登指数，阳性预测值和阴性预测值，结果见表3。

表2 DNA定量分析联合HR-HPV检测结果 例

表3 3种检查方法诊断效果的比较 %

3 讨论

肿瘤细胞在增殖分裂过程中染色体不分离而又自我复制，致使细胞中染色体的结构和数量出现异常，形成DNA非整倍体的肿瘤细胞。肿瘤发生的一个重要指标就是非整倍体染色体的出现[2]。异倍体细胞的出现是细胞恶变的早期特征，而DNA倍体变化往往早于细胞的形态学改变。目前DNA定量分析已被用于宫颈癌及癌前病变的辅助诊断[3－5]，尤其在北美及欧洲，它已是常规临床检查方法之一[3]。作者在液基薄层制片的基础上，通过Feulgen染色进行细胞DNA定量分析，对活检CINⅡ及以上级别病变诊断的灵敏度高达90.6%，特异度为93.1%，约登指数达83.7%，说明DNA定量分析有很高的灵敏度，是有效的宫颈病变筛查方法。

HR－HPV感染与宫颈癌流行有密切的因果关系，大部分HPV感染呈现一过性，机体免疫系统可识别感染细胞并清除，不会引发宫颈病变，但如果多次重复持续感染，宫颈会发生一系列癌前病变直至癌，从癌前病变至宫颈癌发生需5～10 a，甚至20 a，因此有必要对持续感染HR－HPV的患者进行定期复查，以便及早发现宫颈早期病变并进行恰当的阻断治疗，从而降低宫颈癌的发生率。该研究中，430例中HPV感染率为11.86%(51/430);HR－HPV检测对活检CINⅡ及以上级别病变诊断的灵敏度为58.5%，但特异度高达94.7%，可见HR－HPV检测也是一种可选的宫颈病变筛查方法。

目前研究[6]发现液基细胞学联合HR－HPV检测可有效提高宫颈病变的检出率，子宫颈脱落细胞的液基细胞学检查联合HR－HPV检测已成为子宫颈癌筛查的最佳方案[7]。作者发现，DNA定量分析比HR－HPV检测有更高的灵敏率，2者特异度近似;联合检测较DNA定量分析检测有更高的灵敏度，但特异度稍降低，阳性预测值和阴性预测值不高;综合考虑，作者认为DNA定量分析是更为有效的宫颈病变筛查方法，不需与HR－HPV检测联合即可应用于宫颈癌前病变的筛查。

综上所述，DNA定量分析和HR－HPV检测都是有效的宫颈病变筛查方法，但二者联用并不能有效地提高宫颈病变的检出率;DNA定量分析用于宫颈病变的筛查更有效。

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[2]Böcking A，Nguyen VQ.Diagnostic and prognostic use of DNA image cytometry in cervical squamous intraepithelial lesions and invasive carcinoma[J].Cancer，2004，102(1):41

[3]Guillaud M，Benedet JL，Cantor SB，et al.DNA ploidy compared with human papilloma virus testing(Hybrid CaptureⅡ)and conventional cervical cytology as a primary screening test for cervical high－grade lesions and cancer in 1555 patients with biopsy confirmation[J].Cancer，2006，107(2):309

[4]李灵洁，王开秀，杨芳，等.细胞DNA定量分析进行宫颈癌普查的临床研究[J].中国妇幼保健，2008，23(16):2319

[5]刘洁，平静，王春芳，等.多种方法联合应用在桂西壮族妇女宫颈病变筛查中的价值[J].中国妇幼保健，2011，26(33):5133

[6]刘洁，平静，王俊利，等.TCT联合高危型人乳头瘤病毒检测用于宫颈病变筛查的评价[J].郑州大学学报:医学版，2011，46(3):466

[7]郎景和.子宫颈癌预防的现代策略[J].中国医学科学院学报，2007，29(5):575