北京地区规模化奶牛场三种病毒性腹泻病的血清学调查

傅彩霞，靳兴军，郑瑞峰，郭 峰，韩 磊，李 佳，吴惠明，王玉田，张 跃，杜 鹃

（北京市兽医实验诊断所，北京100101）

牛腹泻性疾病是由细菌、病毒、寄生虫等病原微生物感染或营养、环境、管理等因素造成的，在诸多因素中病原微生物感染是造成牛腹泻的重要因素。引起牛腹泻常见的病原有牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral idiarrhea virus，BVDV）、牛冠状病毒（Bovine coronavirus，BCV）、牛轮状病毒（Bovine rotavirus，BRV）等。BVDV主要侵害幼龄牛，表现为腹泻或黏膜病，成年牛多呈亚临床感染，但怀孕母牛感染后，可引起死胎、流产、产弱犊、先天性畸形犊等。无论显性感染或者隐性感染均可引起免疫抑制，导致感染牛的抵抗力下降，进而对其他疫病的易感性增强，BVDV感染在欧美及世界各养牛发达国家非常广泛。BCV是引起新生犊牛腹泻和成年牛冬痢最主要的病原之一，临床上主要表现为新生犊牛出血性腹泻，成年牛冬季严重水样腹泻（有时伴有血液和黏液）等特征，BCV感染呈世界性分布。BRV感染多发生在15日龄～45日龄的犊牛，其临床表现为水样腹泻、严重脱水和酸中毒，具有很高的死亡率，成年牛大多呈隐性感染。BRV流行广、发病率高且对动物有较大危害，也己成为一种世界性疾病［1］。近年来，随着奶牛养殖规模的不断扩大，奶牛特别是犊牛腹泻的发病率呈上升趋势，多种病原混合感染严重，死亡率较高，严重影响了奶牛早期的生长发育和后期生产性能的发挥。为进一步了解目前北京地区奶牛腹泻中BVDV、BCV、BRV感染流行情况，为本地区奶牛腹泻性疾病的有效防治提供技术指导，本项目对2010年－2011年北京部分地区规模化奶牛场的BVDV、BCV、BRV感染情况进行了血清学调查，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 奶牛血清样品 2010年－2011年从密云、怀柔、昌平等3个区县的31个规模化奶牛场，采集1岁～3岁腹泻奶牛的血液样品，共计1 650份，按常规方法分离血清。所选牛群均未免疫接种各种类型的BVDV、BCV、BRV疫苗。

1.1.2 主要试剂 牛病毒性腹泻抗体ELISA试剂盒为美国IDEXX公司产品；牛冠状病毒抗体ELISA试剂盒（阻断法）为BIOX公司产品；牛轮状病毒抗体ELISA试剂盒（阻断法）为BIOX公司产品。

1.2 方法

按照试剂盒说明书进行检测。

2 结果

2.1 牛病毒性腹泻抗体检测结果

结果显示，从1 650份血清中共检出BVDV抗体阳性血清795份，平均阳性率为48.2%，795份阳性血清分布在3个区县的22个牛群。其中怀柔区抗体阳性率为32%，密云县抗体阳性率为60.3%，昌平区抗体阳性率为51.7%，BVDV感染己在北京地区规模化奶牛场中普遍存在（表1）。

表1 怀柔、密云、昌平3个区县牛群BVDV抗体检测结果Table1 The detection results of antibody against BVDV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.2 牛冠状病毒抗体检测结果

结果显示，从1 650份血清中共检出BCV抗体阳性血清943份，平均阳性率为57.2%，943份阳性血清分布在3个区县的26个牛群。其中，怀柔区抗体阳性率为65.5%，密云县抗体阳性率为57.1%，昌平区抗体阳性率为42.8%，3个区县的规模化奶牛场中BCV感染率较高（表2）。

表2 怀柔、密云、昌平3个区县牛群BCV抗体检测结果Table2 The detection results of antibody against BCV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.3 牛轮状病毒抗体检测结果

结果显示，从1 650份血清中共检出BRV抗体阳性血清861份，平均阳性率为52.2%，这861份阳性血清分布在3个区县的20个牛群。其中，怀柔区抗体阳性率为54.0%，密云县抗体阳性率为54.1%，昌平区抗体阳性率为45.1%（表3）。

表3 怀柔、密云、昌平3个区县牛群BRV抗体检测结果Table3 The detection results of antibody against BRV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.4 混合感染情况

本次调查中，同时有2种或3种病原混合感染率为35.1%（579／1650），其中，BVDV 和BCV 混合感染率为3.8%（62／1650），BVDV 和 BRV 混合感染率为3.2%（52／1650），BCV 和BRV 混合感染率为10.2%（169／1650），BVDV、BCV 和 BRV 3种病原混合感染率为17.9%（296／1650）。由此可见，在密云、怀柔和昌平3个区县的牛群中，BVDV、BCV和BRV2种或3种病原混合感染严重。

3 讨论

近年，奶牛特别是犊牛腹泻普遍发生于世界各地，常引起大批犊牛生长不良或死亡，已成为现代养牛业的一大障碍。在引起牛腹泻的诸多因素中，BVDV、BCV、BRV感染是造成牛腹泻的主要因素。国外资料表明，BVDV呈世界性分布，在养牛业发达的国家几乎都有BVDV的存在与流行，有的血清抗体检出率高达90%以上。在我国，流行病学调查显示，牛群中BVDV的感染率为30%～95%，根据病毒感染时期的不同，可以造成胚胎死亡、流产、木乃伊胎以及胎儿免疫耐受进而发展为持续性感染畜，严重时可能发展成为致死性黏膜病。多数持续性感染动物外观健康，但生产性能下降，在疫病传播中具有重要作用。同时，BVDV还是牛源生物制品（血清、冻精、疫苗等）的常在污染源［2－3］，给畜牧业生产和相关商业领域造成巨大的经济损失。BCV引起的腹泻在冬季多发，约一周龄以内的犊牛发病最为常见，病死率较高，而成年牛发病率较高、死亡率低。1972年美国Stair等［4］在犊牛和成年牛的腹泻病料中检出BCV，以后在世界许多国家和地区都相继报道了该病的发生。1985年宋广林等［5］首次报道了BCV在我国的存在，随后各地均有报道［6］。BRV可感染各年龄段的牛，多发生于1月龄以内的犊牛，犊牛感染后表现为水样腹泻、严重脱水，甚至死亡，而成年牛大多为隐性感染，其血清中抗体检出率高达40%～100%，BRV在体外有很强的抵抗力，成年动物隐性感染并不断排出病毒，若畜群中一旦感染发病，则每年都会发生。RBV感染若继发其他疫病，死亡率会大大增加，给养牛业造成了巨大的经济损失。近年来，由于我国各牛场对此类疾病重视程度不够，缺乏有效的防控措施，导致我国牛群BVDV、BCV、BRV感染呈上升趋势，因此，如何采取有效的措施预防和控制牛腹泻，提高疫病的整体防控水平己成为目前养牛业生产的一项重要任务。

近年来，北京地区奶业生产发展速度较快，奶牛养殖业已成为京郊农民致富的重要产业之一，然而由于当前奶牛腹泻性疾病的临床发病率、死亡率逐年升高，治疗费用剧增，严重影响了奶牛养殖业的健康持续发展，因此，本研究选择了奶牛养殖规模较大的怀柔、密云、昌平3个区县作为代表进行BVDV、BCV、BRV感染的血清学调查。调查结果显示，BVDV抗体平均阳性率为48.2%，BCV抗体平均阳性率为57.2%，BRV抗体平均阳性率为52.2%。本次调查结果与国内其他地区的报道结果基本一致。金爱华等［7］对上海奉贤区14家奶牛场奶牛血清进行了BVDV抗体检测，阳性率为34.06%。杨得胜等［8］对福建省9个地区大型牛场和散养户牛进行BVDV抗体血清学调查，总阳性率高达92.5%。魏伟等［9］对黑龙江省内不同地区的2006年－2008年的1 388份血清样本进行了BVDV抗体检测，3年的平均BVDV血清阳性率分别为54.66%、57.68%和62.90%。姚火春等［10］对我国不同地区的奶牛、黄牛及人血清进行了BCV抗体检测，阳性率分别为80.6%、67%、19.3%。刘合义等［11］对黑龙江一些地区采集到的256份牛血清样品进行BCV抗体检测，结果阳性率为65.23%。李鑫等［12］对2005年－2006年期间在我国12个不同地区收集的1 760份牛血清进行了BRV抗体检测，其强阳性率12.8%、中等阳性率70.4%、弱阳性率15.9%，总抗体阳性率高达99%。不同地区的流行病学调查资料均显示出，目前在我国牛群中BVDV、BCV、BRV感染已相当严重。本次调查所采集的血清均为1岁～3岁的奶牛，检测到的BVDV、BCV及BRV抗体水平均较高，可判断为经历过BVDV、BCV及BRV的自然感染，血清抗体的阳性率一定程度上反映了BVDV、BCV及BRV的感染情况。本次调查的部分牛场两种或三种病原混合感染率为35.1%，混合感染严重，BVDV、BCV及BRV感染在密云、怀柔和昌平3个区县的牛群中普遍存在，感染率较高，存在有地区差异，应引起高度重视，进一步加强牛群中BVDV、BCV及BRV的流行病学调查、监测及防控力度。

对于BVDV、BCV及BRV的防制，目前由于我国对此类疫病重视程度不够等诸多因素的存在，使得在疫病防制上存在很大难度。国外防制BVDV主要采用疫苗接种、加强监测、淘汰持续感染和免疫耐受的动物。而我国BVDV具有特征性临床症状的病例并不多见，多半是持续感染和免疫耐受等隐性感染，疫苗防控效果不理想。国内目前也尚无预防BCV、BRV的有效疫苗。为了更好地预防和控制牛腹泻性疾病，必须建立应用行之有效的练合性防制措施，从免疫、检测、环境及饲养管理等多方面综合入手。定期进行血清学、病原学检测，尤其是对畜群持续性感染动物的定期检测，严格牛群及牛源生物制品的检测；淘汰扑杀持续性感染的阳性牛；建立严格的卫生消毒制度，加强环境控制；严格引种检疫，做好隔离饲养管理工作。

［1］殷 震，刘景华.动物病毒学［M］.北京：科学出版社，1997：645－652，697－698，562－571.

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