贺州市鸡球虫种类的初步调查

潘百明，谭廷天

(贺州学院 化学与生物工程系，广西 贺州 542899)

1 引 言

鸡球虫病是鸡常见且危害十分严重的寄生虫病，是由一种或多种艾美耳属肠道寄生原虫引起的。主要危害15到50日龄的雏鸡，其发病率高达30%到100%，死亡率达20%到80%，且发病耐过的鸡生长发育迟缓，产蛋率减少［1］。它造成的经济损失极为严重，给全球养鸡业造成巨额经济损失，据资料显示，每年造成的经济损失约12 亿美元［2］15－16。而我国每年仅抗球虫药即消耗约6—18亿人民币［3］31。目前我国鸡球虫防治主要是以预防为主:在饲料中添加球虫药这种方式来预防球虫感染，治疗为辅;鸡体一旦感染了球虫病，即使治疗，其肠道功能也难以完全恢复正常，会直接影响营养物质的消化吸收，从而引起饲料报酬与增重不同程度的下降［4］293。饲料利用率低，料肉比高，这种效果明显会影响养殖场和养殖户的经济收入，浪费了大量资源和人力。

贺州地处桂湘粤三省交界，地理环境复杂、气候多变，球虫种类及感染情况尚未有过报道。为了提供贺州鸡球虫病的预防和治疗理论依据，笔者于2010—2011年在贺州市范围内进行了鸡球虫种类及感染情况调查，不仅填补了该地区球虫种类的空白，也为贺州预防和治疗鸡球虫病提供理论依据，为鸡球虫耐药性研究做好基础工作。

2 仪器、材料与方法

2.1 仪器、材料

仪器包括高速离心机，摄影显微镜，手术刀，细口瓶，冰箱，培养箱，60目钢丝筛等;试剂包括2.5%重鉻酸钾，饱和食盐水等;实验对象为15－30日龄的雏鸡。

2.2 采集时间、地点及对象

从2010到2011年期间，分别在贺州市范围内的20多个乡镇，随机选取鸡场为调查范围，采集各个日龄的雏鸡的新鲜混合粪便，用薄膜袋编号带回实验室，记录采集地点和采集样品数量，1份鸡粪的量是以鸡场或村庄为单位，共采集60份样品。

2.3 卵囊分离和保存

2.3.1 卵囊收集

取鸡粪的样品加适量的饱和食盐水搅拌均匀，用60目钢丝筛过滤去掉粗杂部分，取滤液置离心机以转速为2500r/min离心5分钟，去掉杂质，取上清液加10倍蒸馏水搅拌均匀，再置于离心机与上同速离心10min，弃上清液，得到沉淀部分(内有卵囊)。

2.3.2 卵囊培养

取以上分离出来的虫卵加入2.5%的重鉻酸钾溶液，摇均匀后置280C恒温箱通气培养，培养12小时后每隔三小时观察一次卵囊发育状况，直至卵囊完全孢子化后停止培养。

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2.3.3 卵囊保存

将培养后的卵囊放入2.5%重鉻酸钾溶液中置4I℃ 冰箱保存。

2.4 球虫鉴定

2.4.1 球虫卵囊观察

在显微镜(目镜16×物镜100)下观察卵囊形态、颜色、有无卵膜孔、极体、卵囊外残殖体、内残殖体、最早孢子化时间及孢子囊形态，参考有关资料①对虫种进行鉴定并进行显微摄影。

2.4.2 观察肠道病变部位及病变特征

选择6组具有典型代表性的球虫卵囊编号为1、2、3、4、5、6，经初步鉴定分别为柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和和缓艾美耳球虫，感染对应编号为(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)的15 － 30 日龄鸡，每组10只，用等同数量的鸡设置一个对照组编号为(7)。待其发病后扑杀并对病鸡进行解剖，观察肠道病变部位及病变特征，并且刮取对应的肠道内粘液进行二次镜检①。

3 结果与分析

3.1 鸡球虫种类

对60份鸡粪进行镜检，并进行显微摄影，共检出艾美耳属(Eimeria)球虫6种:即柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)，毒害艾美耳球虫(E.necatrix)，堆型艾美耳球虫(E.acervulina)，巨型艾美耳球虫(E.maxima)，和缓艾美尔球虫(E.mitis)和早熟艾美耳球虫(E.praecox)。6种球虫的显微摄影图详见(图1、图2、图3、图4、图 5、图6)所示:

3.2 6种鸡球虫的形态特征与感染率

通过对鸡粪中分离出来的球虫卵囊进行镜检，统计含每一种球虫的样品数并计算出感染率。6种球虫的形态及感染率见下表(表1)。

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3.3 实验雏鸡肠道病变部位及病变特征观察结果

对照第(7)组，观察实验组雏鸡肠道病理变化，根据索勋［1］对病变部位特征的描述可以得到以下结果。

第(1)组观察盲肠，多数盲肠可见大量出血，个别盲肠出血部位可以扩伸到其他部位的消化道粘膜。盲肠肿的非常大且整个肠道的厚度都明显比正常的厚，里面有液态状或半固体状的血液，而且从浆膜面看非常明显，外观为暗红色的瘀点，初步确定为柔嫩艾美耳球虫。

第(2)组观察小肠中段，突出特征是小肠长度大约为正常长度的一半，直径大约为正常的2倍多，粘膜颜色是绯红色，肠壁往往充血，可见到粘膜上出现血红斑点和灰白色针尖大到针帽大的坏死灶。坏死灶可延伸到粘膜深处，肠内容物为暗红色或猩红色而且含血凝块，呈“盐和黑胡椒”状外观，初步确定为毒害艾美耳球虫。

第(3)组观察到十二指肠极少出血，少部分充血而且出现瘀斑，初步确定为堆型艾美耳球虫。

第(4)组观察到小肠近段和中部是粘膜发炎部位，可见水肿，有出血现象，肠内容物为橙黄色体，初步确定为巨型艾美耳球虫。

第(5)组观察到小肠前段肠道内有水样的内容物，粘膜表面可见针尖大的出血点，初步确定为早熟艾美耳球虫。

第(6)组观察小肠前段无特别明显的症状，可能有和缓艾美耳球虫。

3.4 刮取各个部位粘液进行二次镜检的结果

通过对比表1的六种球虫形态特征，刮取实验雏鸡肠道病变部位粘液进行二次镜检发现的鸡球虫均与初次镜检的球虫基本相同，最后确定球虫种类分别是柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和和缓艾美耳球虫。

3.5 统计球虫混合感染的结果

统计镜检结果中混合感染球虫的鸡粪样品数详见下表(表2)。

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由表2可知，贺州市鸡球虫感染流行的情况是混合感染六种球虫为主，占总感染鸡粪份数(31)58.1%。说明该地区的球虫病是由多种球虫引起的，而不是单纯由一种或两种艾美耳球虫引起的。所以防治球虫病时不能单一的添加治疗某一种球虫的抗球虫药，而是按不同比例调配出混合抗球虫药进行投药。

3.6 球虫致病优势种问题分析

由表1中感染率说明柔嫩艾美耳球虫(74.1%)和毒害艾美耳球虫(51.6%)为优势种，其中柔嫩艾美耳球虫感染率最高，危害性最大。其次到毒害(51.6%)、堆型(45.1%)、巨型(41.9%)、和缓(35.4%)和早熟艾美耳球虫(35.4%)，其危害性依次降低。据黄兵等［5］14－16调查发现，上海地区流行的优势球虫为变位艾美耳球虫(出现率为83%);李铭等［6］41－42、刘振湘等［7］26调查结果显示均有柔嫩艾美耳球虫这一优势种，后者检出率为94.3%。与黄兵的结果不同可能是因为上海地区防治柔嫩艾美耳球虫措施效果好;而与李铭、刘振湘的结果相同，说明贺州市在防治柔嫩艾美耳球虫的措施不足，应该加强防治柔嫩和毒害艾美耳球虫的措施。因此，在不同地理区域的环境下检测出球虫优势种是不尽相同的，防治球虫病的措施也必须因地制宜。

3.7 球虫种类的差异性分析

本次调查的球虫种类特征与索勋［1］的描述基本一致，个别虫种的卵囊在形态上存在较大差异，如观察发现一个球虫卵囊比巨型艾美耳球虫的卵囊大，对于该球虫卵囊的鉴定有待进一步研究。

3.8 贺州市鸡球虫的感染情况分析

对表1中的感染率算法及结果做个说明，因为实验条件的限制及镜检拍照时照片不能全面覆盖整个样品，只是局域画面。因此统计含每一种球虫种类的样品数而非统计每个样品中含有每种球虫个数来表示感染率，前者统计方法虽然过于笼统，但是目前笔者尚未找到有关文献对感染率的标准公式。对于感染率计算结果的意义在于代表性高于客观性，但可以说明贺州市感染了该种球虫而且实际感染率会高于本文的感染率。由表2可知为球虫混合感染，应引起我们的重视，做好防治鸡球虫病宣传工作，运用科学的综合性预防措施防范该地区的球虫病。

4 结 论

综上所述，本次对贺州市鸡球虫种类调查的结论是共检测出6种艾美耳球虫，总感染率为51.6%。6种虫分别是柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和和缓艾美耳球虫。其中，柔嫩和毒害艾美耳球虫为优势种，感染率分别为74.1%、51.6%，感染方式为混合感染。

5 展 望

由于本次调查范围存在一定的区域局限性，加上人为因素的影响，造成调查研究结果不是十分全面，可能在贺州市还存在着其他种类的球虫，如布氏、哈氏、变位艾美耳球虫。因此，需要今后的学者不断对贺州的鸡球虫进行调查研究，完善该地区球虫种类的统计，为防治球虫病做出贡献。

注释:

①安健.球虫病与鸡球虫抗药性［M］.北京:中国农业出版社，2011.左仰贤．球虫学—畜禽和人的球虫与球虫病［M］.天津:天津科学技术出版社，1992:5．张保祥，张友三，郭海竣等.陕西鸡球虫病的研究［J］.畜牧兽医杂志－1986(6):26－27．白启.兰州和广州地区鸡球虫种调查［J］.兽医科技杂志，1981(12):18－24．黄兵，史天卫，吴薛忠等.巨型艾美耳球虫纯种的初步确定和致病性研究［J］.中国兽医寄生虫病，1995(4):l2－l4．

［1］索勋，李国清.鸡球虫病学［M］.北京:中国农业大学出版社出版，1998．

［2］香港大方西药公司.防治鸡球虫病的新措施［J］.禽业科技，1995(1).

［3］刘贤勇，索勋.鸡球虫病及其控制策略［J］.中国农业科技导报，2006(5)．

［4］闫鸿斌，田广孚，贾万忠等．鸡球虫疫苗1号的免疫效果研究［J］.中国兽医科学，2006(4)．

［5］黄兵，赵其平，陈燕军，等．2002上海地区鸡球虫病情情况调查与防治对策［J］.中国兽医寄生虫，2002(2)．

［6］李铭，荆安，黄和等.重庆市江滨地区鸡球虫种类调查［J］.中国兽医寄生虫病，2002(1)．

［7］刘振湘，唐晓玲.湖南省衡阳市鸡球虫病病原种类及流行情况调查［J］.中国兽医寄生虫病，2001(2)．