树莓组培苗的培养
2012-09-18王禹
王 禹
（黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨150069）
树莓为蔷薇科悬钩子属植物，灌木型果树，果实为聚合浆果，色泽宜人，风味独特，既可鲜食，也可加工成果酱、果汁、果冻及多种食品添加剂［1］。树莓推广种植与产业化开发前景广阔，但传统繁殖方法繁殖质量差，难以满足当前我国大量优质苗木的需求，严重制约着树莓产业的快速发展。植物组织培养是一种可以保持物种特性并能够快速繁殖的一种生物技术手段。试验通过植物组织培养方法筛选出适宜树莓腋芽生长的培养基，为树莓高效繁殖提供试验依据。
1 实验材料及方法
1.1 实验材料
试验树莓品种为哈瑞太兹，将采集的树莓当年生枝条去除叶片及叶柄部分，将枝条剪成带1～2个腋芽的茎段，在流水状态下冲洗10min。消毒程序：75%的酒精30s→0.1%HgCl2中消毒7～8min→无菌水冲洗2～3次。
1.2 试验方法
本试验采用的基本培养基为 MS，生长培养基试验：6－BA 设3种浓度分别为0.5、1、1.5mg／L；IAA设3种浓度分别为0.1、0.2、0.3mg／L；蔗糖浓度分别为20、25、30g／L。
所有培养基都经高压蒸汽灭菌20min（120～125℃，1.0～1.2大气压下），头孢曲松钠经过滤灭菌。
1.3 观察统计方法
每一处理20瓶，每瓶2个外植体。接种25天后观察调查萌芽情况，所得实验数据用SPSS13.0软件进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 适宜生长的培养基
表1 生长培养L9（33）正交研究组合试验结果
表1中以1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖处理组合的萌芽率最高，为86.7%。对表1中个处理组合的萌芽率进一步做方差分析。结果见表2。
表2 生长培养L9（33）正交研究组合方差分析结果
表2方差结果分析表明：哈瑞太兹处理总效应达到5%的显著水平；6－BA浓度、IAA浓度、蔗糖浓度均达到了5%显著水平。均方SIAA＞S蔗糖＞S6－BA，即对萌芽率的影响以IAA为主要因子；蔗糖次之；6－BA最小。对6－BA浓度、IAA浓度、蔗糖浓度因素进行多重比较，筛选适合的水平。结果见表3。
表3 3个因素3水平Duncan＇s检验
由表3中可以看出A因素A1水平平均值最大，为65%；与 A0.5、A1.5水平差异显著。因此，最优组合选 A1水平，即6－BA浓度为1mg／L。B因素 B0.2水平平均值最大，为59.4%；与 B0.3水平差异显著；与 B0.1水平差异不显著，B0.1水平平均值为58.3%。因此，最优组合可选 B0.1水平或 B0.2水平，即IAA 浓度为0.1或0.2mg／L。C因素C30水平平均值最大，为66.1%，与C20、C25水平差异显著。因此，最优组合选C30水平，即蔗糖浓度为30g／L。根据以上分析比较，筛选出的最优生长培养基1mg／L 6－BA＋0.1mg／L IAA＋30g／L蔗糖或1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖（此培养基与表1中的最优组合相同），两个培养基进行培养比较。最后，筛选出的哈瑞太兹最佳生长培养基为 MS＋1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖。
3 结果与讨论
哈瑞太兹最优生长培养基为 MS＋1mg／L 6－BA＋0.2mg／L IAA＋30g／L蔗糖。一般来说，当生长素／细胞分裂素比值高时，有利于长根，低时有利于长芽，中间比值利于愈伤组织的诱导和分化。在具体试验中，二者只有按合适浓度和比例使用时，才能使生长向同一方向协调发展［9］。本试验也证明了生长激素在植物生长期间，起了非常重要的作用，激素组合浓度太高不利于萌芽的发生，蔗糖浓度低也不利于萌芽的发生。
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