全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成t－PA、PAI－1的影响1）

赵检英，石 雕，谭 茜，徐爱良，彭延古

心脑血管疾病已成为人类健康的最大威胁之一［1］。组织型纤溶酶原激活物（t－PA）、纤溶酶原活化物抑制剂（PAI－1）是纤溶系统中重要的活性物质，它们均由血管内皮细胞产生。在诸多因素中，纤溶系统功能失衡是造成血管事件发生的决定性因素［2］。正常情况下血浆t－PA和PAI－1处于动态平衡状态，t－PA的血液含量及活性可预测血栓形成的危险度［3］，PAI－1水平升高则与心脑血管病变的形成关系密切［4，5］。研究表明［6］，血浆t－PA和PAI－1水平与血管内皮稳定性密切相关，

监测t－PA和PAI－1这两项指标，在心脑血管事件的预防和治疗方面，有简便易行、可反复测定和经济实用的特点。本研究旨在观察全蝎纯化液对家兔颈总动脉血栓形成血浆t－PA、PAI－1的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 新西兰白兔50只，1.8kg～2.1kg，雌雄各半，购自长沙市东创实验动物有限公司卫生防疫动物中心，动物许可证号：SCXK（湘）2009－0012。

1.1.2 药物 全蝎购自湖南省医药有限公司，经水煮醇沉［7］、凝胶层析和离子交换层析等分离纯化过程将其制备，真空冷冻干燥成粉末，－20℃保存备用，鉴定为肽类物质。

1.2 方法 将50只新西兰白兔采用随机数字表法分为5组，空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组（20mg／kg）、全蝎纯化液中剂量组（10mg／kg）和全蝎纯化液小剂量组（5mg／kg）。全蝎纯化液各剂量组耳缘静脉注射全蝎纯化液，空白组、模型组给予同等体积的生理盐水。注射后模型组和全蝎纯化液大、中、小剂量组按邓常青模型制备方法［8］分离两侧颈总动脉和股动脉，以两个动脉夹夹闭一侧颈总动脉两端，夹间距离为2.5cm；用4号针头刺入动脉并固定，迅速抽出动脉段内残留血液，并以生理盐水反复冲洗3次至动脉段内无残血，然后用0.4mL 10%H2O2分3次～4次注入动脉段内连续作用10min，再以生理盐水冲洗2次，并用ZT医用胶粘合针孔以止血，最后再放开血流。2h后剪下颈总动脉称质量，以另外一侧等长的颈总动脉作为对照，两者质量差即为血栓质量。造模2h后股动脉取血，采用酶联免疫吸附法测t－PA、PAI－1的含量，试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司，按说明书操作步骤进行。以直接计数法测定血小板计数（Pt）。

1.3 统计学处理 采用SPSS 16.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，组间比较用t检验。

2 结 果

与空白组比较，模型组t－PA明显降低，PAI－1明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型组比较，全蝎大、中、小各剂量组t－PA的含量均增高，PAI－1含量均降低，差异均有统计学意义（P＜0.01），而各组的血小板计数差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

表1 全蝎抗凝活性成分对t－PA、PAI－1的影响（±s）

表1 全蝎抗凝活性成分对t－PA、PAI－1的影响（±s）

组别 只数 t－PA（kU／L） PAI－1（kAU／L） Pt（×109／L）空白组10 2.38±0.68 3.32±1.12 76.1±10.3模型组 10 1.65±0.451） 7.89±1.231） 71.2±9.8全蝎纯化液大剂量组 10 6.59±0.911）2） 2.02±0.982） 79.8±7.9全蝎纯化液中剂量组 10 4.98±0.761）2） 2.98±0.842） 73.3±8.2全蝎纯化液小剂量组 10 3.52±0.891）2） 3.78±1.102） 75.6±6.8与空白组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01

3 讨 论

血栓性疾病主要是指动脉血栓性疾病与静脉血栓性疾病，已成为我国与西方国家人口死亡与致残的主要原因，是中老年人易发的疾病之一，而且目前青年病人的数量也在上升。按世界卫生组织的统计，每年大概有1 800万人死于各种心脑血管疾病。动脉血栓形成是心脑血管疾病的重要病理基础之一，探讨血栓形成的病因病理，寻找抗血栓形成的药物对于心脑血管疾病的防治具有重要意义。血管内皮细胞结构和功能的完整是机体维持血管张力、调节血压、调节止血与抗血栓形成平衡的主要环节。在动脉血栓栓塞性疾病中，血栓形成大多在血管内皮细胞受损、动脉粥样斑块破裂的基础上发生的［9］。大量研究表明，活性氧能破坏血管组织，使血管内皮受损。H2O2为活性氧的一种，与其他自由基一样也能损害各种组织［10］。该实验中使用高浓度H2O2溶液通过损伤血管内膜，建立家兔颈总动脉血栓模型，经实验证明，所有家兔均有血栓形成。当家兔动脉血管内皮用H2O2损伤后，血小板黏附于受损血管处暴露的内皮下组织，进而聚集、分泌、释放血栓素A2（TXA2），使血小板进一步活化，同时激活凝血系统，凝血酶促使纤维蛋白形成，最终形成附壁的血栓。血栓疾病与纤溶系统功能有着密切的关系，纤溶系统主要由PLg、纤溶酶原激活物和激活物抑制剂、纤溶酶和纤溶酶抑制剂组成。纤溶活性低下或纤溶抑制物活性增高，是血栓形成的一个促进因素。近年来研究显示，t－PA、PAI－1在纤维蛋白溶解过程中起着重要作用，t－PA是纤溶系统主要的生理性激活剂，它能在纤维蛋白凝块上高效地激活纤溶酶原生成纤溶酶使纤维蛋白降解。PAI－1能快速作用于t－PA而形成复合物使t－PA灭活。t－PA和PAI－1主要由血管内皮细胞产生，t－PA能使纤溶酶原激活为纤溶酶，继而使纤维蛋白水解，PAI－1为此反应过程的抑制剂。当血栓形成时，t－PA选择性地与血栓中的纤维蛋白结合，激活纤溶酶以溶解血栓。PAI－1作为一种重要的纤溶酶原激活物抑制物，主要在血小板活化释放的同时被释放到血液中抑制纤溶酶原激活物的活性［11］，其与t－PA是调节纤溶系统活性的重要成分，两者功能的平衡是防止血栓形成的重要条件［12］。本实验结果表明，全蝎纯化液能增强t－PA的活性，降低PAI－1的活性，提示全蝎纯化液抗栓、溶栓机制可能与其影响t－PA和PAI－1的分泌有关，通过增强t－PA的活性、降低PAI－1的活性，从而增强纤溶系统活性，呈现出纤溶作用，进而抑制血栓形成，使血栓溶解。全蝎纯化液通过调节t－PA和PAI－1这两种平衡物质，来维持机体纤溶功能的平衡稳定，防止血栓形成。故全蝎纯化液有可能发展成为一类新型的抗血栓药物，为肝素治疗无效的血栓患者开辟新的、有效的治疗方案提供新的思路。

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