HPLC法测定维吾尔药理血奇朗糖浆中没食子酸的含量

2012-09-12朱敏辉苏来曼哈力克

中国民族医药杂志 2012年10期

鱼洋朱敏辉苏来曼·哈力克

(1.新疆医科大学第一附属医院，新疆乌鲁木齐 830011;2.新疆吐鲁番地区药品检验所，新疆吐鲁番 838002;3.新疆维吾尔自治区食品药品检验所，新疆乌鲁木齐 830004)

理血奇朗糖浆是有大枣、天山堇菜、睡莲花、玫瑰花等五味药材组成的维吾尔医常用成方制剂，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准－维吾尔药分册》［1］，根据维吾尔医药理论，该糖浆具有理血，养肝，降热，祛痰的功效，临床用于发烧，头疼，热性咳嗽，高血压等症。目前该标准只有两项试管鉴别，无含量测定项。为了更好的控制制剂的质量，保证临床用药安全、有效，采用高效液相色谱法测定了其中总没食子酸的含量。

1 仪器、试剂与样品

日本岛津LC－20AT高效液相色谱仪，色谱柱为Waters Symmetry VP－ODS柱(4.6mm ×250mm，5μm)，KLZ －UP超纯水仪(台湾艾柯成都康宁实验专用纯水设备厂)。没食子酸对照品(批号:110831－200302，购于中国药品生物制品检定所);乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯。理血奇朗糖浆(批号:20110730、20110809、20110813)由新疆维吾尔自治区维吾尔医医院提供。

2 方法与结果

文献报道理血奇朗糖浆中玫瑰花含挥发油、黄酮类、没食子酸等成分［2－3］，睡莲花也含没食子酸，因此采用高效液相色谱法对理血奇朗糖浆中总没食子酸进行了测定，以作为质量控制指标。

2.1 色谱条件选择色谱柱为VP－ODS(4.6mm×250mm，5μm);流动相为 0.4% 磷酸:乙腈(97∶3);检测波长270nm;流速 1mL·min－1;柱温;40℃。

2.2 对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的没食子酸对照品6.40mg，置25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)过滤，即得，40μg·mL－1对照品溶液。见图1。

2.3 供试品溶液的制备精密量取理血奇朗糖浆3mL，置50mL的量瓶中，加流动相稀释定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)过滤，作为供试品溶液。

2.4 系统适应性试验取供试品，按上述色谱条件测定，计算柱效，分离度，理论板数及拖尾因子，结果在选定的色谱条件下，没食子酸和供试品中其它组分色谱峰可达到基线分离，没食子酸色谱峰的分离度符合要求。见图2。

图2 理血奇朗糖浆供试品色谱图

图3 缺睡莲花、玫瑰花阴性对照溶液色谱图

2.5 缺睡莲花、玫瑰花阴性对照供试品溶液的制备取理血奇朗糖浆处方中的大枣、天山堇菜、倒提壶三味药材原处方量的1/10(缺睡莲花、玫瑰花药材)，即大枣6g，天山堇菜2.8g，倒提壶 2.8 g，按制备工艺，加水 250mL，煮沸 1h，过滤，药渣加水150mL，煮沸0.5h，合并滤液，定容至100mL，即得理血奇朗糖浆阴性对照溶液。精密量取该溶液3 mL，加流动相20mL溶解，定容于50mL的容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)过滤，即得缺睡莲花、玫瑰花阴性对照供试品。分别吸取供试品溶液，对照品溶液及阴性对照溶液10μL进样，结果阴性对照溶液无干扰。见图3。

2.6 线性范围的考察精密称取没食子酸对照品适量，加甲醇适量溶解，摇匀，制成50μg.mL－1的没食子酸对照品溶液，分别吸取 1、5、10、15、20μL 注入高效液相色谱仪中，记录峰面积。以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得线性回归方程:Y=3E+0.6X+12082(r=0.9999)。结果表明，没食子酸在 0.0506μg～0.4060μg 范围内呈良好的线性关系。

2.7 精密度试验精密吸取理血奇朗糖浆3.0mL，照上述方法制备供试品溶液，进样10μL，连续进样6次，记录峰面积，计算含量。结果平均含量为 0.748mg.mL－1，RSD=0.88%，精密度良好。

2.8 稳定性实验取室温下放置的理血奇朗糖浆供试品，精密吸取3.0mL，按上述方法供试品溶液，每隔一段时间，分别在 0.0、2.0、4.0、10、12h 进样 10μL，记录峰面积。结果显示样品溶液在室温下12h内稳定。

2.9 加样回收率试验分别精密量取1.5mL理血奇朗糖浆9 份，分别加 0.256mg·mL－1的没食子酸对照品溶液 3.5、4.5、5.5mL，各 3 份，置 50mL 的量瓶中，加流动相稀释定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)过滤后进样10μL，计算回收率。结果平均回收率为100.95%(n=9，RSD=3.40%)。见表1。