氧化鱼油对蛋鸡生产性能、蛋品质及血清抗氧化指标的影响

周建川 赵丽红 黄 薇 冯光德 计 成 马秋刚*

(1.中国农业大学动物科技学院，动物营养学国家重点实验室，北京 100193；2.铁骑力士集团，绵阳 621006)

鱼油中含有功能性的营养成分二十碳五烯酸(eicosapntemacnioc acid，EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenic acid，DHA)等多不饱和脂肪酸(PUFA)，具有促进体内饱和脂肪酸代谢等独特的生物学功能。由于鱼油的不饱和程度高，在贮存过程中，尤其是在高温高湿的环境条件容易被氧化，产生有害的初级、次级氧化物，发生酸败导致饲料品质下降，直接影响着动物对其利用的效果，过分酸败会影响饲料安全［1］。近年来，有关于氧化鱼油对仔猪［2－3］、育肥猪［4］、种鸡［5］、肉鸡［1］和鱼［6－8］生长性能方面研究报道较多。前人研究表明，动物饲粮中添加鱼油可改善动物的生产性能，通过调控饲粮中n－3与n－6型PUFA保持适当的比例，可以不同程度地改善动物对疾病和异物的抵抗能力，增强机体健康。鱼油被氧化后，会不同程度地对动物生长性能和机体抗氧化能力产生一定的负面影响，降低动物对疾病的抵抗力，降低动物产品品质。目前尚没有发现有关氧化鱼油对蛋鸡生产性能和蛋品质影响的相关报道。且现行的饲料标准中还没有鱼油质量标准可供参考，许多饲料生产企业对于鱼油的质量控制往往自定标准或参考其他行业的标准，标准参差不齐，导致许多酸败鱼油应用于饲料生产中。油脂氧化后对蛋鸡生产性能及鸡蛋品质的相关研究极为匮乏，而氧化鱼油对蛋鸡机体抗氧化酶活性的影响很少见报道。本文以氧化鱼油为研究对象，探讨不同氧化程度的鱼油对蛋鸡生产性能、蛋品质及机体抗氧化能力的影响，为蛋鸡饲料生产中鱼油的质量控制提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 氧化鱼油的制备

在 鱼 油 中 添 加 Fe2+30mg/kg、Cu2+15 mg/kg、H2O2600 mg/kg和0.3%的水、充分混合后，于37℃条件下通氧搅拌氧化168 h，获取过氧化物值(POV)为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油，制好后的氧化鱼油于20℃条件下储存，饲喂前一周取样配制。

1.2 试验设计及试验饲粮

试验选择720只体重相近的38周龄海兰灰蛋鸡，随机分为4个组，每组6个重复，每个重复30只鸡。将新鲜鱼油和POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油按不同比例分别加入基础饲粮中，组成新鲜鱼油组(未添加氧化鱼油，FFO组)、0.25%氧化鱼油组(OFO1组)、0.50%氧化鱼油组(OFO2组)和1.00%氧化鱼油组(OFO3组)。

以玉米－豆粕为基础配制饲粮，将POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油分别按12.5%、25.0%和50.0%的比例与新鲜鱼油(POV为0.40 meq O2/kg)进行混合，再将新鲜鱼油和混合鱼油按2%的比例分别加入到玉米－豆粕型基础饲粮中。试验开始时先混合好除鱼油外的其他组分。在每周开始时按要求加入已经配制好的新鲜或氧化鱼油，混合均匀制成试验饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表1。

1.3 饲养管理

试验采用双层镀锌鸡笼饲养，每个重复为一笼。每天光照16 h，自由采食，自由饮水。温度、免疫程序按常规进行，试验期为4周。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 氧化鱼油指标测定

油脂氧化程度的评价通常用酸价(AV)、POV、皂化价(SV)、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)和碘价(IV)指标。POV、AV、SV和IV测定方法分别参照 GB/T 5538—2005、GB/T 5530—998、GB/T 5534—1995 和 GB/T 5532—1995的方法，TBARS 测定方法按黄伟坤［9］的方法。

1.4.2 生产性能

每日以重复为单位记录产蛋数、破蛋数、产蛋量、鸡只死亡数和耗料量，试验结束时计算入舍母鸡产蛋率、平均蛋重、平均日采食量、死淘率。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air－dry basis) %

1.4.3 蛋品质

蛋壳颜色:蛋壳颜色用3个指标进行表示。L值:亮度值，由白色到黑色的程度；a*值:红度值，由红色到绿色的程度；b*值:黄度值，由黄色到蓝色的程度。

蛋黄颜色:蛋黄色泽用罗氏比色扇(Roche yolk color fan，rycf)测定。

蛋白高度:用蛋白高度测定仪测量蛋黄边缘与浓蛋白边缘的中点的蛋白高度，避开系带，测量成正三角型的3个点，取平均值。

哈氏单位:哈氏单位=100×log(H－1.7×W×0.37+7.57)，式中H为蛋白高度(mm)，W为蛋重(g)。

1.4.4 抗氧化指标

试验结束时，每重复随机取3只鸡，颈静脉取血抗凝，用试剂盒测定全血中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)的含量，试剂盒购自南京建成生物功能研究所。

1.5 数据分析

使用SPSS 10.0统计软件ANOVA对各指标进行方差分析，LSD进行多重比较，以P＜0.05为显著平准。

2 结果

2.1 氧化鱼油对蛋鸡生产性能的影响

试验制作的氧化鱼油各指标测定结果见表2，测定结果表明本试验新鲜鱼油氧化168 h后其POV 为1 200.10 meq O2/kg。

表2 氧化鱼油各指标测定结果Table 2 Results of antioxidant indices in oxidized fish oil

氧化鱼油对蛋鸡生产性能的影响见表3。饲喂氧化鱼油第1、2、3、4周后，随氧化鱼油添加量的增加，平均蛋重有下降的趋势，其中OFO3组平均蛋重显著低于FFO组(P＜0.05)。试验全期，OFO1、OFO2和OFO3组平均蛋重比FFO组分别降低了0.9%、0.9%和1.7%(P＜0.05)。氧化鱼油对蛋鸡产蛋率、平均日采食量和料蛋比均没有显著影响(P＞0.05)。

2.2 氧化鱼油对蛋品质的影响

由表4可见，氧化鱼油对鸡蛋蛋黄颜色有一定影响，随着氧化鱼油添加量的增加蛋黄颜色下降，其中OFO3组蛋黄颜色显著低于FFO组(P＜0.05)。与FFO组相比，OFO1、OFO2和 OFO3组鸡蛋哈氏单位显著低于FFO组(P＜0.05)，但各氧化鱼油组鸡蛋哈氏单位差异不显著(P＞0.05)。氧化鱼油对蛋壳L值、a*值和b*值以及蛋白高度没有显著影响(P＞0.05)。

2.3 氧化鱼油对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

由表5可知，与 FFO组相比，OFO1、OFO2、OFO3组蛋鸡血清 GSH－Px活性分别降低了2.01%、4.56%和12.88%，其中OFO3组显著低于其他各组(P＜0.05)。氧化鱼油提高了蛋鸡血清MDA含量，其中OFO3组MDA含量显著高于其他各组(P＜0.05)。氧化鱼油对蛋鸡血清SOD和CAT活性没有显著影响(P＞0.05)。

3 讨论

鱼油的氧化程度对动物生产性能的影响已有一些学者进行了研究，多数研究表明氧化油脂损害动物的生产性能、降低营养物质的消化吸收利用率。袁施彬等［10］研究发现，在断奶仔猪饲粮中添加3%的POV为1 065.74 meq O2/kg的氧化鱼油可诱导氧化应激，引起生产性能和养分利用率的下降，氧化应激效应明显，使仔猪平均日增重降低了8.16%，料重比提高了9.22%，粗蛋白质表观消化率和表观利用率下降了21.91%和30.55%，干物质和粗脂肪表观消化率分别降低了13.05%和35.18%。任泽林等［11］研究氧化鱼油对鲤鱼生产性能和肌肉组织结构的影响，表明氧化鱼油损害鲤鱼生产性能，即降低了鲤鱼增重率及增加饲料系数。本试验研究结果也表明，蛋鸡饲粮中添加1%的POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油显著降低了平均蛋重，分析其主要原因是氧化应激降低了动物对养分的利用率，最终导致生产性能下降。

蛋黄颜色反映了母鸡体内抗氧化的能力。本试验发现饲粮氧化鱼油对蛋鸡蛋黄颜色有一定影响，随着饲粮氧化鱼油添加量的增加蛋黄颜色降低，蛋鸡饲粮中添加1%的POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油显著降低蛋黄颜色，分析其原因可能是由于氧化鱼油降低了机体内抗氧化酶的活性，加速叶黄素被氧化，从而降低了色素的沉积［12］。哈氏单位是衡量鸡蛋蛋白质品质的重要指标。哈氏单位值越大说明蛋白质越黏稠，品质越好。本试验研究不同浓度的氧化鱼油对鸡蛋哈氏单位的影响，与新鲜鱼油组相比不同浓度的氧化鱼油组显著降低了鸡蛋哈氏单位。也有研究表明饲料中添加抗氧化剂对蛋壳颜色有显著改善作用，原因是抗氧化剂保护饲料中的维生素A、D和E，并且减少脂肪氧化降低自由基对机体的生物膜的氧化损伤，从而提高蛋壳颜色。

表3 氧化鱼油对蛋鸡生产性能的影响Table 3 Effects of oxidized fish oil on performance of laying hens

表4 氧化鱼油对饲喂4周后蛋鸡蛋品质的影响Table 4 Effects of oxidized fish oil on egg quality of laying hens after feeding 4 weeks

表5 氧化鱼油对饲喂4周后蛋鸡血清抗氧化指标的影响Table 5 Effects of oxidized fish oil on serum antioxidant indexes of laying hens after feeding 4 weeks

体内抗氧化酶的活力可以反映机体氧化－抗氧化状态，从侧面体现动物的健康状态。细胞在需氧代谢过程中，产生大量的活性氧族(ROS)，如O2－、H2O2、OH等。正常情况下机体内部的氧化与抗氧化能力保持动态平衡［13］。如果动物机体的抗氧化体系不能及时清除ROS，就会产生氧化应激，破坏生物大分子，引起细胞结构和功能的异常［14］。在许多对ROS敏感的物质中，PUFA的敏感性高于其他物质，通常认为脂质过氧化是细胞过氧化损伤的主要原因［15］。脂质过氧化最普遍的检测指标是醛过氧化产物MDA的含量。研究表明，给试验动物饲喂氧化鱼油可使动物机体ROS大量产生，MDA含量增加，体内SOD、GSH－Px等活性降低，诱导氧化应激［16］。本试验研究发现，蛋鸡饲粮中添加1%的氧化鱼油显著提高了血清MDA含量，降低了GSH－Px活性。袁施彬等［17］研究5%氧化鱼油(过氧化值为786.50 meq O2/kg)对断奶仔猪肝脏抗氧化酶活性的影响，发现氧化鱼油可以对断奶仔猪造成不同程度的氧化应激，降低了试验猪肝脏抗氧化酶活性和提高了MDA含量。氧化鱼油使抗氧化酶的活性降低的原因可能是氧化鱼油导致细胞膜损伤，细胞中氧自由基等生物活性物质的浓度降低，降低了抗氧化酶反应底物的浓度，进而降低GSH－Px的活性。刘雯雯等［4］在育肥猪饲粮中添加氧化鱼油及硒和维生素E研究氧化鱼油对育肥猪后期生产性能和冷藏生猪肉肉质的影响以及硒和维生素E的抗氧化作用，研究发现油脂在平均日增重、滴水损失、肉色a*值、SOD和GSH－Px活性上表现显著的互作效应，这与本试验结果类似。

4 结论

①饲料中添加1%的POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油显著降低鸡蛋的平均蛋重，降低蛋黄颜色和哈氏单位，使蛋品质变差。

②饲料中添加1%的POV为1 200.10 meq O2/kg的氧化鱼油显著降低蛋鸡血清GSH－Px活性，著提高了血清中MDA含量，使机体抗氧化能力降低，抵抗疾病的能力下降。

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