小青龙颗粒提取工艺研究

朱燕萍 李小妮 陕西中医学院附属医院药剂科（咸阳 712083）

小青龙颗粒别名小青龙冲剂，是传统名方小青龙汤的现代剂型之一，由麻黄、桂枝、白芍、干姜、细辛、五味子等组成。具有解表化饮，止咳平喘功效。用于风寒水饮，恶寒发热，无汗，喘咳痰稀。现代药理研究表明，小青龙汤具有明显的平喘、祛痰、抗炎等治疗哮喘的作用。临床用于支气管哮喘、急、慢性支气管炎、喘息型肺炎等呼吸系统疾病有良好疗效，加用西药控制感染和解除支气管痉挛，可以提高疗效；对过敏性鼻炎的流涕、鼻塞、嗅觉障碍、鼻黏膜充血肿胀等症状有明显改善作用[1，2]；此外，还可用于风湿痹痛、水肿、失音、泄泻等。该剂型早已载入药典，但其提取工艺系统化研究尚未见报道。为了降低成本，优化工艺参数，同时保证产品质量 ，我们在旧工艺基础上，选择盐酸麻黄碱为考察指标，对该制剂工艺中溶剂的用量、提取次数、提取时间等参数进行考察，筛选出可靠而稳定的提取工艺，为其工艺改革提供依据。

1 仪器与试药 LC2010-CHT液相色谱仪（Shimadzu），LCsolution化学工作站；C18柱（250mm×4.6mm ，5μm），流动相：乙腈-0.1%磷酸（12∶88），以三乙胺调节pH＝4.5，检测波长207nm，流速1mL／min，柱温25℃；BS110S电子分析天平。盐酸麻黄碱标准品（中国生物制品检定所）；色谱分析用乙腈购自MERCK公司，其余试剂均为分析纯。

药物提取 ：按处方比例称取麻黄、芍药、细辛、干姜、甘草、桂枝、半夏和五味子8味药，共9份，加65%乙醇提取，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩定容测定麻黄碱含量，药材均购自西安万寿路药材市场，全部符合2010版《中国药典》一部对应药材项下规定。

2 方 法

2.1 指标选择 复方中麻黄为君药，该药含量测定方法成熟，提取物中盐酸麻黄碱的含量可用高效液相色谱法测定，故此选为质量控制指标。

2.2 盐酸麻黄碱含量测定方法 标准溶液制备：精密称取盐酸麻黄碱对照品5.03mg于50mL容量瓶中，甲醇定容，摇匀，精密吸取2mL于25mL量瓶中，甲醇定容，作为标准工作液。

供试品制备：精密量取复方提取液适量（约相当于麻黄生药0.2g），置于干燥锥形瓶中挥干，以25mL甲醇溶解，称重，超声处理45min，放冷，称重，加甲醇补足减少量，摇匀，滤过，精密量取续液1mL，置中性氧化铝柱（100～20目，内径1cm，1.5g）上，以50%甲醇洗脱，收集洗脱液约9mL于量瓶中，加磷酸1滴，以50%甲醇定容摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液备用[3，4]。

标准曲线绘制：分别吸取盐酸麻黄碱标准工作液1，2，4，8，16，32μL进样，测定并绘制标准曲线。得回归曲线Y＝1524.1X＋31.121，R2＝0.9998，盐酸麻黄碱在0.008～0.256μg间线性良好。

2.3 正交试验 为了筛选出最佳工艺，选用65%乙醇作为提取溶剂，采用正交设计优选提取条件：选择了对提取效率影响最主要的三个因素：溶剂量A、提取时间B、提取次数C，每个因素选取3个水平（见表1），按L9（34）正交表进行试验并进行方差分析，确定优化工艺（见表2，3）。

表1 因素水平表

表2 L9（34）正交设计表

表3 麻黄碱方差分析表

3 讨 论 对盐酸麻黄碱的转移率考察，方差分析结果显示，三个因素对转移率影响的主次关系为B＞A＞C，尤其前两个因素的影响具有非常显著性意义（P＜0.01），而C因素的影响无显著性意义（P＞0.05），考虑到C2和C3相差不大，从节能省工时的角度来说可以选择A3B2C2，即加12倍量的溶剂，每次提取时间1.5h，提取2次为最佳工艺。此工艺以盐酸麻黄碱为指标，确保了药物的疗效。

本研究是在以往工艺的基础上进行研究的，文献研究可知小青龙汤回流提取优于渗漉法，提取溶剂在60%-70%乙醇[3－5]，故此选定65%乙醇作为提取溶剂，不做进一步考察；测定条件文献显示一般有机相和水相比例为10：90[3，4]，本研究经反复试验，确定流动相为乙腈-0.1% 磷酸溶液（12∶88），样品分离良好，并减少酸性溶液对仪器和色谱柱的损害。

[1]李雅琴.《伤寒论》小青龙汤的临床应用[J].中华中医药学刊，2008，26（1）：46-48.

[2]易桂生.小青龙汤的临床新用[J].陕西中医，2008，29（4）：294.

[3]赖庆宽，尹蓉莉，杨宗锟.小青龙汤复方提取工艺比较研究[J].时珍国医国药，2008，19（7）：1622-1624.

[4]潘 玲，台小华，韩建伟.正交设计法优选小青龙贴膏提取工艺的研究[J].中国实验方剂学杂志，2008，14（11）：20-22.

[5]李 宁，柴清河，董保国.小青龙胶囊的制备工艺研究[J].医药产业资讯，2006，3（1）：106-107.