胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质的动态变化

王添敏， 徐士钊， 张 慧， 陈虎彪， 康廷国*

(1.辽宁中医药大学药学院，辽宁大连 116600;2.佳木斯大学药学院，黑龙江佳木斯 154007;3.香港浸会大学中医药学院，香港九龙塘)

胡桃楸Juglans mandshuricaMaxim.又名核桃楸、山核桃，为胡桃科Juglandaceae胡桃属植物，属落叶乔木，主要分布于我国东北及华北地区［1］。《开宝本草》记载胡桃楸有补肾固精、敛肺定喘、抑菌镇咳及抗癌之功效。胡桃楸的树皮、茎枝和果皮在民间用于治疗肿瘤;现代研究表明胡桃楸的茎枝、树皮、根、叶和果皮均具有抗肿瘤作用［2-6］。鞣质是胡桃楸不同药用部位中普遍存在的主要化学成分之一［7-9］，近年来越来越多的研究表明鞣质具有较好的抗肿瘤活性［10-12］。关于胡桃楸中总鞣质的测定研究较少，曾测定了不同产地胡桃楸不同药用部位中含总鞣质的量［13］，本实验考察了不同时间采收的胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质的动态变化，为胡桃楸资源的合理开发利用提供理论依据。

1 材料

U—3010型紫外-可见分光光度计 (日本Hitachi)，AS5150型超声波清洗机 (北京华瑞博远科技发展有限公司)，ALC—110.4型电子分析天平(德国赛多利斯公司)，RE—300型旋转蒸发仪(上海亚荣旋转蒸发仪厂)。没食子酸对照品 (纯度≥98%)购自比利时Acros Organics公司。实验中所用试剂均为市售分析纯试剂。

胡桃楸的茎枝、叶和果实分别于2010年2月—2011年1月期间每月28日在辽宁省普兰店市莲山镇老白山上固定区域采收，受气候、人为因素影响，胡桃楸茎枝采得12个样品，叶采得5、6、7、8月4个样品，胡桃楸果采得6、7月2个样品，经辽宁中医药大学王冰教授鉴定为胡桃楸科植物胡桃楸Juglans mandshuricaMaxim.，凭证标本保存于辽宁中医药大学中药鉴定教研室。

2 方法与结果

2.1 胡桃楸样品的处理 采集的胡桃楸样品在24 h内运回实验室处理。将胡桃楸叶切段，茎枝和果实切成1～2 cm厚的薄片，放入-40℃冰箱中冻存。实验前取出预冻的药材样品放入冷冻干燥仪中在-50℃、6 Pa的条件下冷冻干燥，约40 h后药材干燥完全，取出，粉碎，过40目筛，备用。

2.2 胡桃楸样品中总鞣质的测定［13］取胡桃楸样品粉末0.5 g，精密称定，置于50 mL具塞锥形瓶中，精密加入70%丙酮25 mL，密封，称定质量;超声提取40 min，取出，用70%丙酮补足失质量;摇匀，静置后滤过，精密吸取续滤液5 mL，25℃下减压回收溶剂至无丙酮味，转至25 mL棕色量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，静置后滤过，取续滤液作为供试品溶液。以没食子酸对照品为标准重新绘制标准曲线，得回归方程为Y=4.651 8X-0.046 2，r=0.999 3。采用分光光度法于760 nm处分别测定供试品溶液中总多酚和游离多酚的吸光度，依据标准曲线计算出样品中总鞣质的含有量。

2.3 不同采收期胡桃楸样品中总鞣质的含有量及其动态变化 经测定，胡桃楸12个茎枝、4个叶和2个果实样品中总鞣质的含有量见表1。

表1 不同时间采收的胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质Tab.1 Total tannins content in stem，leaf and fruit ofJuglans mandshurica collected in different months

胡桃楸不同药用部位总鞣质的含有量相差较大，由高到低的顺序为叶＞果实＞茎枝，其中胡桃楸叶中总鞣质的平均质量分数约是胡桃楸茎枝中的2.3倍。胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质的动态变化见图1。不同时间采收的胡桃楸茎枝样品中总鞣质的质量分数变化无一定的规律;胡桃楸叶中总鞣质的质量分数从5月底开始迅速升高，6月底采收的胡桃楸叶样品中总鞣质的质量分数为5月底采收的1.6倍，此后胡桃楸叶中总鞣质的质量分数相对平稳;对于6、7月采收的2个胡桃楸果实样品，7月采收的样品中总鞣质的质量分数约是6月采收的1.5倍。

图1 胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质的动态变化Fig.1 Dynamic variation of total tannins content in the stem，leaf and fruit of Juglans mandshurica

3 讨论

3.1 干燥方法对胡桃楸果实中总鞣质的影响 本实验所测定的胡桃楸茎枝和叶中总鞣质的量与文献［13］的研究结果一致，而果实中总鞣质的平均质量分数 (38.91 mg/g)较文献［13］测得的 (3.58 mg/g)高约10倍。这可能是因为文献［13］采用阴干的方法干燥样品，果实样品在阴干过程中颜色迅速由绿色变为褐色，其中鞣质类成分发生了变化;而本实验采用的样品干燥方法为冷冻干燥，果实干燥后仍保持绿色，其中鞣质类成分未发生变化。该研究结果提示胡桃楸果实中含有较多的鞣质，该成分在阴干过程中易发生变化;而胡桃楸茎枝和叶中鞣质类成分在阴干过程中不易发生变化。

3.2 胡桃楸茎枝、叶和果实中总鞣质的动态变化规律 采集到1～12月12个胡桃楸茎枝样品，其中总鞣质的质量分数在平均值上下波动，其动态变化无一定的规律。胡桃楸叶从5月开始长出，其中总鞣质的质量分数最低;到6月底胡桃楸叶已经逐渐茂盛，其中总鞣质的质量分数迅速增高;此后总鞣质的质量分数趋于平稳。8月胡桃楸果实已经成熟，被人采收，因此本实验只收集到6、7月2个胡桃楸果实样品。胡桃楸果实在6月底初长成，其内果皮没有木质化，全果中总鞣质的质量分数较低;至7月底果实近成熟，其中总鞣质的质量分数也随之增高。综上所述，胡桃楸叶和果实中总鞣质的质量分数与各自的生长周期基本吻合。

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