VEGF、Flt-1在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达研究

王平 刘丽

PIH存在血管发生和功能障碍。VEGF作为重要血管生长因子之一，与受体Flt-1结合，在调节胎盘血管发育和PIH病中发挥重要的作用，PIH是严重的产科并发症，发病率约为9.4%，是导致母婴发病率和病死率显著增加的重要原因，但其病因和发病机制尚不明确。本研究通过测定孕妇胎盘组织中VEGF和Flt-1表达情况，进一步揭示它们在妊高征发病机制中的作用及二者间是否存在相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2008月12月至2012年2月郑州市中医院妇产科住院的晚期妊娠妇女200例，其中正常妊娠妇女100例(对照组)，年龄(25±5)岁，分娩孕周(38±2)周;PIH患者100例(PIH组)，根据全国高等院校统编教材《妇产科学》(第6版)的分类及定义，再分成3个小组，其中妊娠期高血压1组35例，年龄(25±5)岁，分娩孕周(38±2)周;子痫前期2组30例，年龄(25±5)岁，分娩孕周(38±2)周;子痫3组35例，年龄(25±5)岁，分娩孕周(38±2)周;由专人检测身高、体质量，并计算体质量指数。200例均为第1胎、临产前行剖宫产术的孕妇，并除外糖尿病、高脂血症等其他疾病。各组孕妇年龄、孕周、孕晚期体质量指数、血脂、血糖差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 VEGF和Flt-1表达测定

1.2.1 胎盘组织的取材及制备。胎盘娩出后30min内取胎盘母面中央绒毛组织块约1cm×1cm×1cm，避开钙化区及坏死区，生理盐水充分漂洗后用10%中性福尔马林溶液固定24h以上，常规石蜡包埋4 pure连续切片。

1.2.2 鼠抗人VEGF单克隆抗体(南京博尔迪):鼠抗人Flt-1单克隆抗体(南京博尔迪)，SP9000通用型试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司;磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、氯化钠、氯化钾等化学试剂均为分析纯，由北京益利化学有限公司生产。

1.2.3 免疫组化测定具体步骤按说明书进行。用已知阳性标本做阳性对照，用1%BSA代替一抗做阴性对照。染色以细胞有棕黄色颗粒沉着视为阳性反应;与背景一致为0;胞核或胞浆内可见少量淡黄色颗粒，明显高于背景为1;胞核或胞浆内可见较多深棕色颗粒为2;胞核或胞浆内可见大量深棕色或褐色颗粒为3。阳性细胞百分率:无阳性细胞为0;＜25为1;25%～50%为2;＞50%为3。取以上两项乘积:积分0～1分为(-);2～3分为(+);4～5分为(++);＞5分为(+++)。

1.3 统计学方法 采用SPSS 11.5统计软件包进行统计，计量资料以均数士标准差表示，两两比较采用独立样本t检验，多个样本比较用单因素方差分析;P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

VEGF，Flt-1表达PIH组胎盘组织表达明显低于对照组(P＜0.05)，且随着妊高症病情的加重而水平减低。见表1。

表1 4组胎盘组织的VEGF，Flt-1阳性表达率比较(例，%)

3 讨论

近年来，PIH病因“胎盘浅着床”理论逐渐被多数学者所可，认为滋养细胞对子宫螺旋动脉侵蚀不足致使胎盘植入过浅，血流灌注不足，进而引发系统性血管内皮损伤，导致PIH各种临床症状的出现。在妊娠过程中，胚胎滋养层细胞侵入到母体蜕膜，并侵入其中的螺旋动脉，替代血管内皮细胞，建立母体/胎儿的交互式循环，为胚胎的发育提供营养。VEGF是一种高效特异的内皮细胞有丝分裂原，VEGF与FIt-1结合主要调节肉皮细胞间及内皮细胞与基质问的相互作用，发挥强烈的促血管生长及增加微血管通透性的作用。有学者认为作为重要的血管诱生园子，VEGF在妊娠早期参与胎盘血管网的形成，而在妊娠晚期主要调节血管内皮细胞的通透性.有利于胎儿生长发育。关于VEGF和受体能促进血管生成和胎盘发育可通过基因缺失的小鼠胚胎发育障碍得到直接证实[1，2]，研究表明[3]，MMP-9在滋养细胞植入中起重要作用，并与VEGF，Flt-1表达率呈正相关，本研究发现VEGF，Flt-1在 PIH组胎盘组织表达明显低于对照组，且随着妊高症病情的加重而水平减低，说明VEGF，Flt-1可能共同参与PIH的发生。

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