浅析通过胎盘感染猪瘟

2012-08-15周升绪山东省诸城市畜牧局262200

山东畜牧兽医 2012年6期

周升绪（山东省诸城市畜牧局 262200）

怀孕母猪注射猪瘟弱毒疫苗对胎儿有不良的副作用，可引起新生仔猪特征性胸腔、腹腔液增加，以及局部和全身水肿。发生猪瘟的猪场带毒母猪所产猪仔出现死胎、畸形胎和仔猪持久性病毒血症。笔者在某一猪场的猪群中发现许多母猪空怀、早产、产死胎、畸形胎以及产出3d内死亡的弱胎，个别初生仔猪全身或局部水肿，皮肤蜡黄色，叫声嘶哑，不吸乳，发抖点头。剖检可见胸、腹腔积液，心外膜、心肌出血，肾点状出血，脾边缘梗死，膀胱、喉头也可见出血点。经猪瘟荧光抗体检查，兔体交互免疫实验，以及电子显微镜下超薄切片复染对病毒粒子的观察，确定为猪瘟胎盘感染。现将发病情况报告如下。

1 猪场的基本情况

该猪场每年有存栏猪3000余头，母猪360多头，基本上自繁自养。平均每月产仔78窝，仔猪30～35日龄断奶，5～6月出栏。母猪在配种前1月，仔猪在35日龄断乳时分别接种猪瘟兔化弱毒疫苗2ml。全场有比较稳定的饲养管理措施，及卫生防疫制度。但饮水为场前一条途经上游村庄水河边池塘。

1.1 往年猪瘟发生情况该猪场建于1996年，1999年首次发生猪瘟流行，死亡大小猪共380余头；2001年第2次暴发猪瘟，死亡大小猪200余头；2次猪瘟流行均在断乳后的仔猪级架子猪群中发生。该场于3月26日及4月28日先后对母猪及架子猪用猪瘟兔化弱毒苗实行紧急预防接种，但病情未能得到控制，5月份仔猪死亡123头，随机抽取3头死亡仔猪的肝、脾、淋巴结匀浆，取无菌上清液与猪瘟兔化弱毒在兔体内进行交互免疫试验，确诊为猪瘟。因此，从5月25日是对所生的仔猪用猪瘟兔化弱毒苗实行吮乳前2h的超前免疫，仔猪注射疫苗1ml/头，6月份死亡仔猪89头，6～8月未出现仔猪死亡，但在9～10月，在断乳猪群中又零星出现仔猪死亡，症状与病变均似猪瘟，该场又于10月24日起对所有空怀母猪注射4头份猪瘟兔化弱毒苗。12月15日流行形势出现新的变化，在母猪群中发现流产、产死胎、畸形胎以及产后3d内死亡的弱胎仔。

1.2 2003年猪群产死胎及弱仔猪的情况全场共有生产母猪245头，配种506次，共产仔猪496窝；68窝出现早产、产死胎及产出3d内死亡的弱胎仔占产仔总数的20.66%；全年共产仔猪4860头，死胎及产出后3d内死亡的弱子猪共545头，占所产仔猪的11.2%，而实际存活只有4102头。

1.3 各猪舍之间的发病情况该猪场共有10栋母猪舍，猪舍之间纵向排列相距25m，横向之间相距8m。2001年全场6栋母猪舍都受到猪瘟的侵袭，但各舍之间母猪出现的空怀率、产死胎及弱胎的窝数及仔猪死亡数都有差异，空怀率在7.81%～21.13%，产死胎及产弱仔猪的窝数在2.27%～32.13%；仔猪死亡率在2.23%～34.61%之间。

1.4 病的发生与季节的关系该猪场出现早产，产死胎及产后3d内死亡弱猪仔的现象一年四季都存在，但1～4和11～12月发生率高，在这6个月中，产死胎、产弱仔猪窝数及仔猪死亡的头数平均每月占总窝数的27.22%、产子头数的20.56%，而夏秋温暖季节发生率较低，平均每月为10.12%和14.29%。

1.5 病的发生与年龄的关系该猪场有1岁的母猪，也有大6岁的老母猪，各种年龄母猪中均有发生死胎及产弱仔猪的现象，但母猪、断奶前后的仔猪、架子猪以及成年猪群中未见呈猪瘟症状以及病变死亡的猪。在产死胎及弱胎仔的母猪中，有106头母猪发生过1次，17头发生2次，1头连续发生3胎。出现2次产死胎及弱胎的母猪常在2胎之间能产生一胎存活的仔猪。

2 情况分析

疾病主要表现母猪空怀、胎儿早产、死胎、畸形胎及生后3d内死亡的弱仔。而母猪、断奶前后仔猪、架子猪以及肥猪群中均未发现猪瘟流行。这可能是由于猪瘟疫苗按时接种，猪体内猪瘟抗体水平高的缘故。母猪虽然有较高的抗体水平保护自身，但抗体不能进入胎盘保护胎儿，因而出现胎盘的感染。该猪场持续出现严重的猪瘟胎盘感染，主要原因有2个：一是猪场用水严重污染，猪群的饮用水为河边脏水，使猪瘟病毒又进入猪群这一恶性循环。二是这个猪场留种母猪大都是从本场母猪所产猪仔中选留母猪，形成了猪瘟胎盘感染→母猪繁殖障碍→亚临床感染→胎盘感染又一恶性循环。近些时期陆续又有同样的情况出现于其他大型猪场中，这在具有高水平抗体的母猪体内，猪瘟病毒经胎盘感染胎儿的现象。

3 实验室诊断

为了对本病做出确实的诊断进行了猪瘟、衣原体病、细小病毒病、布氏杆菌病以及猪弓形体病检查，细菌分离培养等工作。

3.1 猪瘟荧光抗体检查（1）采濒临死前仔猪的扁桃体、肾制作冰冻切片，用猪瘟荧光抗体染色，在荧光显微镜下观察；（2）采死胎及出生的弱仔猪脾、淋巴、扁桃体匀浆，取无菌上清液接种于加有盖玻片的PK15细胞，培养48至120h，取出盖玻片，用猪瘟荧光抗体染色，在荧光显微镜下检查；（3）去濒临死前仔猪肾细胞带毒培养，染色检查。

3.2 兔体交互免疫试验分别用死胎及出生的弱仔猪脾、淋巴、扁桃体匀浆制作的无菌上清液和单层细胞培养液分别接种家兔，9d后用100个兔体反应量疫苗接种家兔，测量体温反应。

3.3 抗体效价检测（1）取4批共170份(母猪共126份，60日龄仔猪44份)血清分别用PPA-ELISA药盒、衣原体间接血凝诊断液、猪弓形体间接血凝诊断液、布氏杆菌虎红平板抗原，分别在40孔酶联反应板，96孔微量血凝反应板以及平板上检测猪瘟、衣原体、猪弓形体和布氏杆菌抗体效价。（2）取90份母猪血清用PPV(1)型诊断盒在40孔酶联反应板上检测细小病毒抗体效价。

3.4 弓形体检查取3批死胎和出生的弱仔猪脾、淋巴结、肺脑组织匀浆，取无菌上清液分别接种4只小白鼠，每批盲传3代，检查弓形体。

3.5 致病试验（1）取8～9和10～11日龄鸡胚，用单层细胞培养物进行卵黄囊及绒毛尿囊膜接种。（2）取死亡仔猪及濒死仔猪脑组织制成无菌悬浮液，接种2批共8只家兔，逐日观查是否发病。

3.6 细菌培养检查取死亡仔猪及濒死仔猪的心、肝、脾、脑分别在鲜血斜面、马丁肉汤、厌氧肝汤培养基中做细菌培养检查。

4 结果

（1）多次采取濒死仔猪的扁桃体制作冰冻切片，接种病料的PK15细胞盖玻片及带毒肾细胞盖玻片用猪瘟荧光抗体染色检查均可见到亮绿色荧光，而未接毒对照细胞盖玻片经猪瘟荧光抗体染色后看不到荧光。接种病料的单层细胞培养不产生细胞病变。（2）在兔体交互免疫实验中，无论接仔猪病料组还是接种单层细胞培养物组，9d后再接种猪瘟犊睾细胞弱毒，兔体均不出现热反应，而对照组出现定型热反应。（3）3批仔猪病料接种小白鼠，盲传3代，检查其腹水、脑组织均未发现弓形体。（4）接种病料的单层细胞超薄切片和病毒培养物复染电镜观察均可看到大小不等、带有二层囊膜的病毒粒子、囊膜表面有絮状纤突，超薄切片可看到病毒粒子位于胞浆内，这与有关学者对猪瘟病毒粒子的观察结果一致。（5）鸡胚卵黄囊和绒毛尿囊膜接种不能致死鸡胚，迫杀鸡胚液和单层细胞培养液与鸡红细胞进行血细胞凝集试验，不能凝集鸡红细胞。（6）死亡仔猪和濒死仔猪脑组织接种家兔，连续观察3周，未见发病。（7）以死亡和濒死仔猪的实质脏器在鲜血斜面、马丁肉汤、厌氧肝汤培养基上均未分离到细菌。