常见白细胞五分类技术简介

田亮 陈玲艳

(1.山东省莱芜市人民医院设备科; 2.山东省莱芜市人民医院招标办公室 山东莱芜 271100)

血球计数仪是医院最为常见的检验设备。自上世纪90年代中期以来,国外许多厂家逐步开始研制和推出具有五分类或更多项白细胞分析技术的全自动型血液计数仪。2000年以来随着国内经济发展,各级医院也开始普及五分类的血球计数仪。各厂家实现白细胞五分类的技术各不相同,各有特色。大体有以下几种分类技术:

1 采用VCS探针技术进行白细胞的五分类

这种技术集合3种测定方法于一体,同时对一个细胞进行多参数分析的方法,是库尔特公司的专利技术。其中V探针进行体积测量,采用的是传统的电阻法原理,可将体积大小差异明显的淋巴和粒细胞分开;S探针是检测细胞的高频电导性,该技术可检测细胞内容物的复杂程度,辨别细胞体积相同而内部性质不同的细胞,可将体积大小类似的淋巴细胞和嗜碱性细胞区分开。S探针是采用激光照射细胞。激光可穿透细胞,探测细胞内核分叶状况和颗粒情况,通过分析光散射信息对细胞内颗粒性进行分析,用于单核细胞和3种粒细胞的区分。通过综合处理3个探针检测到的数据,得到白细胞的五分类结果。

2 综合采用阻抗法、激光散射法和荧光染色法进行五分类

这是日本希森美康公司常用的检测方法。直流电阻抗法用于测量细胞体积大小。激光照射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测测白细胞体积大小、细胞内容物的复杂情况,侧向荧光可以反映细胞内部颗粒的复杂性。试剂中增加了针对DNA/RNA染色的荧光染料,激光照射后产生荧光信号,和侧向散射光一道绘制成二维散点图进行白细胞分类。

3 激光散射和细胞化学染色技术

采用该技术的仪器在白细胞分类上采用了双通道设计,白细胞过氧化酶通道和嗜碱细胞通道。在过氧化酶通道内不同的粒细胞过氧化物酶含量不同,嗜酸性细胞具有最强的过氧化物酶,中性粒细胞含有较强的过氧化物酶,嗜碱粒细胞不含此酶。单核细胞含有较弱的过氧化物酶。淋巴细胞不含过氧化物酶。根据激光法散射光强度进行的细胞体积的测量同时也获得了细胞大小的信息,除了嗜碱细胞外每个类型的细胞根据它们的大小及含过氧化酶的强度在散点图上形成分类。在嗜碱细胞通道,采用嗜碱细胞试剂可将除嗜碱细胞以外的其他白细胞膜破坏,仅剩裸核。被激光照射后就可以区分不含过氧化物酶的淋巴细胞与嗜碱粒细胞。

目前各级医院对五分类的血球计数仪要求逐步在提高,保证正常白细胞5项分类结果准确计数、全自动分析网织红细胞等已经成为医院检验科的基本需求。目前在血细胞形态学方面,无论是五分类还是更多的分类,甚至是具有专门幼稚细胞分析通道的仪器,仍然不能根本解决血液细胞形态学的问题,仍然不能完全以仪器分类结果彻底取代人工分类。检验人员在熟练掌握仪器的性能的前提下,仍需要掌握扎实的的显微镜下对血细胞形态学认知的基本功。