急性冠脉综合征患者外周血淋巴细胞亚群测定的临床意义

黄鹤飞 陈爱民 刘春霞 钱安斌 俞子东 浙江省新昌县人民医院心内科 新昌 312500

急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）是以冠状动脉粥样硬化斑块不稳定、破裂并继发血栓形成导致的临床综合征，包括不稳定心绞痛（unstable angina，UA）、非 ST 段抬高心肌梗死（NSTEMI）和 ST段抬高心肌梗死（STEMI）。最近研究表明，免疫机制在斑块的破裂和血栓形成中发挥重要作用，淋巴细胞通过抗原-抗体反应以及细胞免疫等机制参与了动脉粥样斑块的形成、破裂和继发血小板聚集等。笔者通过不同ACS类型之间以及与非冠心病患者的外周血淋巴细胞亚群进行比较，探讨淋巴细胞在ACS中的作用，并评价淋巴细胞亚群改变对ACS预后的影响，现报道如下。

1 临床资料

选取2010年1月—2011年5月在我院住院的急性冠脉综合征患者30例，均符合WHO关于急性冠脉综合征的诊断标准。30例中不稳定性心绞痛（UA）12例，男 8例，女 4例，平均年龄（70±6.6）岁；非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）8例，男4例，女4例，平均年龄（68±5.9）岁；ST段抬高心肌梗死（STEMI）10 例，男 8 例，女 2 例，平均年龄（69±7.1）岁。选择同期因非冠心病入住我科的30例患者为对照组，其中男 20例，女 10例，平均年龄（68±5.1）岁。排除严重肝肾功能不全、合并有感染、心力衰竭、自身免疫性疾病、风湿活动、肿瘤性疾病、近期手术和创伤、脑卒中等疾病。

2 方 法

2.1 淋巴细胞亚群检测方法 两组患者均于住院次日空腹采集静脉血2mL，6 h之内作染色处理，使用美国BD公司生产FACSCalibur流式细胞仪，报告CD3+、CD4+、CD8+、B 淋巴细胞 （CD19+）、NK 细胞占总T淋巴细胞的百分比、CD4+/CD8+比值。上述操作所用试剂均由美国BD公司生产。

2.2 HsCRP和cTnI检测 采用定量酶联免疫测定法，按照试剂使用说明书进行试剂的配制和操作。

2.3 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件包进行数据处理，计量资料以（±s）表示，两组间比较用t检验，多样本均数比较采用方差分析,两两比较采用LSD及Dunnetts t检验，如果资料服从双变量正态分布,采用直线相关分析,如果资料不服从双变量正态分布,采用Spearman秩和相关分析。

3 结果

3.1 两组T淋巴细胞亚群测定及血清cTnI、HsCRP浓度比较 ACS组患者外周血CD4+T细胞、CD4+/CD8+值、NK 细胞比例较对照组明显降低（P＜0.05，P＜0.01）；而CD8+T细胞、CD19+B淋巴细胞比例及cT－nI、HsCRP 浓度明显升高（P＜0.05，P＜0.01），见表1。

表1 两组间淋巴细胞亚群、TnI及HsCRP比较（±s）

表1 两组间淋巴细胞亚群、TnI及HsCRP比较（±s）

注：与对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.05

组 别ACS组对照组n/例30 30 CD3+/%54.1±2.9 55.7±3.5 CD4+/%26.7±3.3△△30.3±4.2 CD8+/%27.9±4.7△25.7±3.1 CD19+/%13.9±2.5△△10.7±2.0 NK/%16.9±3.6△18.7±2.3 CD4+/CD8+1.9±1.1△2.6±1.5 TnI/(ng/mL)10.6±4.9△△0 HsCRP/（mg/L）23.0±7.3△△2.6±1.5

3.2 ACS各亚组间淋巴细胞亚群及血清TnI、HsCRP浓度比较 NSTEMI及STEMI组患者外周血CD4+T细胞、CD4+/CD8+值、NK细胞比例较UA组明显降低（P＜0.05）；而CD8+T细胞，CD19+B淋巴细胞比例及cTnI、HsCRP 浓度明显升高（P＜0.05），见表2。

表2 急性冠脉综合征各亚组间淋巴细胞亚群、TnI及HsCRP比较（±s）

表2 急性冠脉综合征各亚组间淋巴细胞亚群、TnI及HsCRP比较（±s）

注：与 UA组比较，△P＜0.05；与 NSTEMI组比较，*P＜0.05

组 别UA组NSTEMI组STEMI组n/例12 8 10 CD3+/%55.2±4.8 54.8±5.9 55.6±5.6 CD4+/%30.0±4.1 23.5±3.9△18.8±2.2△*CD8+/%22.2±4.5 26.5±3.6△31.1±3.7△*CD19+/%9.7±3.1 14.0±3.4△18.2±5.2△*NK/%19.4±4.5 14.7±3.6△9.9±4.9*△CD4+/CD8+2.0±1.4 1.2±0.6△0.6±1.0*△TnI/(ng/mL)0 9.0±2.8△13.3±5.2△*HsCRP/（mg/L）1.8±1.2 12.9±4.5△26.8±6.7△*

3.3 血清TnI浓度与淋巴细胞亚群相关性分析TnI值与CD4+T细胞、CD4+/CD8+值比例负相关，与CD8+T细胞比例正相关，见表3。

表3 TnI与淋巴细胞亚群的相关性

4 讨论

研究表明，炎症和免疫机制在急性冠脉综合征的发生、发展中发挥着重要作用，临床研究发现，动脉粥样硬化斑块内淋巴细胞占有核细胞数的10%～20%[1]。人类淋巴细胞分为T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞，其中T淋巴细胞（CD3+）按照免疫表型主要分为两群：T 辅助/诱导细胞（CD4+）和 T 抑制/细胞毒细胞（CD8+），通常情况下两者相互影响制约使机体免疫处于平衡状态，两者比例失调可导致免疫功能紊乱。研究表明[2]，动脉粥样硬化斑块发展过程中，T淋巴细胞增强局部的免疫应答，促进巨噬细胞的吞噬作用，并分泌细胞因子及生长因子，同时促进血管中层平滑肌细胞的增生、迁移及吞噬。活化的CD4+T细胞产生大量的干扰素γ（INF-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等促炎症细胞因子,最终影响细胞外基质的代谢和内皮细胞的功能[3]。其中CD4+CD28-T细胞具有细胞毒作用，能够在体内杀伤内皮细胞，也可通过表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与病变中表达CCR5的血管平滑肌细胞结合诱导血管平滑肌细胞凋亡[4]；而CD4+CD25+T细胞则可以抑制该类细胞活性，抑制动脉粥样硬化的发生，斑块越不稳定，其CD4+CD25+T细胞含量越低[5]。Terashima等[6]研究显示，T淋巴细胞特别是CD8+细胞的激活可能与冠状动脉痉挛的发生机制有关。并发现心肌梗死后随着梗死面积的增大，CD8+被进一步激活，并可识别和杀死心肌细胞。本研究中，ACS组CD4+T细胞比例和CD4+/CD8+比值较对照组明显降低（P＜0.01）。进一步亚组分析，STEMI组较NSTEMI和UAP组下降更明显（P＜0.05），推测与CD4+CD25+T细胞含量低，CD8+被进一步激活有关。同时Dimitrijevic和Che研究发现，心肌梗死患者发病后血B淋巴细胞比例明显高于对照组，并认为其原因为坏死的心肌组织释放分离抗原，导致B淋巴细胞升高[7-8]。而Jonasson等[9]研究发现,稳定和不稳定的冠心病患者的外周血CD56dim NK细胞大大减少,并伴随NK细胞功能损失，如 INF-γ、TNF-β、IL-10、IL-13 和 GM2-CSF 等相关的免疫调节功能受损,其发展及后果包括增加冠心病的危险,与冠心病关联的炎症可能会进一步降低NK细胞的功能[10]。本文结果与文献相符，ACS症状越重，血B淋巴胞比例越高，而NK细胞比例越低。

已有大量研究证实，血清cTnI、HsCRP水平与ACS患者预后密切相关，Syrjala等[11]研究表明，急性心肌梗死患者CD4+/CD8+比值持续降低者多提示预后较差，故通过检测CD4+/CD8+值可以评价心肌梗死患者预后。Randa S等[12]研究发现，急性心肌梗死患者血清cTnI水平与CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+值显著负相关，同时进一步研究发现，cTnI升高明显者更易发生心房颤动、完全性左束支传导阻滞、肺水肿和再梗死或者死亡。故笔者推测，CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+值可以作为判断心肌梗死患者预后的一个标志物。本组资料血清cTnI水平与CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+值显著负相关，与文献报道相符，但由于未对ACS患者出院后进行有效随访，故尚不能说明CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+值低者预后较差。

总之，免疫反应在急性冠脉综合征的发生、发展中具有重要作用，进行有效的免疫干预治疗能否成为冠心病的治疗方法之一，仍需进一步大规模的临床试验证实和分析。

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