HPLC－MS／MS法测定茶叶中灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留量

蔡亚萍

（福州市工业产品生产许可证审查技术中心，福建 福州 350000）

灭多威为氨基甲酸酯类内吸型广谱杀虫剂，其稳定性较差，尤其在通风、日光或较高温度下会迅速分解；灭多威代谢物为灭多威肟，化学分子式为C3H7NOS，相对分子量为105，其稳定性比较高［1－2］。除虫脲的化学分子式为 C14H9ClF2N2O2，是属于苯甲酰脲类农药，能够抑制昆虫几丁质合成，使昆虫变态受阻，不能蜕皮而致死［3］。杀螟丹化学名称为1，3－二－ （氨基甲酰硫）－2－二甲基氨基丙烷，是杀蚕毒素类杀虫剂，具有内吸、胃毒、触杀等多种作用，效果迅速，持效期长，杀虫谱广，对鞘翅目、半翅目、直翅目、蓟马等害虫均有很好的防治效果［4－5］。随着人们对食品中农药残留的意识也逐渐加强，农药残留的监测也日益受到重视。我国关于茶叶中灭多威的残留量限量是3 mg／kg，除虫脲的限量是20mg／kg，杀螟丹的限量是20mg／kg。

目前在土壤、蔬菜和水果等基质比较简单的样品中对灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留分析较多，而相对于基质比较复杂的茶叶中对灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留分析方法报道较少［6－19］。本研究采用HPLC－MS／MS法对茶叶中灭多威、除虫脲和杀螟丹的残留进行分析，该方法具有快速、简便、灵敏、准确等优点，并在实际样品检测应用中结果良好，能满足日常茶叶中有机磷农药残留的分析测定要求。

1 材料与方法

1．1 仪器与试剂

试验采用Agilent1200LC／6410MS色谱－串联四级杆质谱联用仪。所用试剂均为色谱纯，水为超纯水。灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准工作溶液（1μg／mL）：分别准确称取1．0010g、1．0013g和1．0027g，用甲醇溶解定容10mL，再分别准确量取10μL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容，得到1μg／mL混合标准工作溶液，置于冰箱于4℃下保存。

1．2 色谱－质谱条件

色谱条件：Agilengt Zorbax XDB C18色谱柱（2．1mm×50mm，3．5μm）；流动相：乙腈－1‰甲酸水，流速：200μL／min，进样量10μL。

质谱条件：灭多威、杀螟丹以电喷雾 （ESI）正离子电离模式；除虫脲以负离子模式电离。电喷雾电压4000V；干燥气 （氮气）温度350℃，流量9．00L／min；雾化气 （氮气）压力275．8kPa；多反应监测 （MRM）模式检测，质谱分析参数见表1。

1．3 试验方法

称取粉碎茶样约5g于50mL具塞三角瓶中，加25mL乙腈提取液，于 （43±2）℃的震荡器中震荡提取45min，冷却后转移至具塞试管或离心管静置澄清。以5mL乙腈＋甲苯 （3∶1）预洗Cleanet TPT小柱，弃去淋洗液。加入2mL提取液，用25mL乙腈＋甲苯 （3∶1）洗脱液洗脱，KD瓶收集以上洗脱液。于45℃水浴上氮吹至干，加2mL甲醇溶解，过0．2μm滤膜，上机检测。

表1 灭多威、除虫脲和杀螟丹的质谱分析参数

2 结果与讨论

2．1 萃取溶剂的选择

灭多威、除虫脲和杀螟丹均属于有机磷类农药。乙腈对极性物质的提取效率比较好，从基体中提取的共提干扰物较少，相对于乙酸乙酯和正己烷等萃取溶剂来说，选用乙腈作为萃取溶剂，对灭多威、除虫脲和杀螟丹的提取效率较为理想。

2．2 净化条件的选择

对于茶叶样品，考虑到样品的极性及提取液中色素等大量复杂成分的存在，试验选用了Cleanet TPT小柱，以进一步除去样品中的复杂干扰物质，达到较好的净化效果。使用不同比例的乙腈、甲苯混合溶液作为洗脱溶剂时，当乙腈、甲苯比例为3∶1能达到最好的洗脱效果，因此选择乙腈＋甲苯（3∶1）溶液为洗脱液。

2．3 仪器条件的选择

2．3．1 液相色谱条件的选择 为了能更好实现3种农药的同步分离，对色谱方法的流动相做了优化。对比了乙腈＋甲酸水溶液、甲醇＋乙酸铵水溶液、甲醇＋甲酸水溶液、乙腈＋乙酸铵水溶液等4种流动相的色谱效果。试验表明，用乙腈－1‰甲酸水进行梯度洗脱时，能达到较好分离效果。最终优化的仪器条件为：色谱柱C18柱， （3．5μm，50mm×2．1mm）；流动相： （A）1‰ 甲酸水溶液， （B）乙腈 （表2）；柱温：30℃；流速：200 μL／min；进样量10μL。

2．3．2质谱条件的选择 灭多威、杀螟丹以电喷雾（ESI）正离子电离模式，除虫脲以负离子模式电离，实现3种农药的定性定量分析。

2．4 标准曲线和检出限

在仪器工作条件下对灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准溶液系列进行测定，以标准物质的质量浓度对其峰面积进行线性回归，结果 （表3）表明：3种农药的质量浓度在0．1～10μg／mL范围内呈线性。

2．5 方法的回收率

取6份茶叶各5．00g，分别加入适量的灭多威、除虫脲和杀螟丹混合标准溶液，按试验方法处理后测定灭多威、除虫脲和杀螟丹的含量，结果见表4。

表3 回收试验结果 （n＝6）

表4 回收试验结果 （n＝6）

3 小结

本试验建立了HPLC－MS／MS检测茶叶中的灭多威、除虫脲和杀螟丹的方法，采用乙腈－1‰甲酸水作为流动相，进行梯度洗脱，方法重现性好，操作简便，并且灵敏度、准确度、精密度均符合农药残留技术测定要求，适用于茶叶的日常检测。

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