血清IL-6和IL-8检测在化疗卵巢癌患者预后评估中的价值

吴建军，刘继斌

(1.海门市第五人民医院，江苏 海门 226131;2.南通市肿瘤医院，江苏 南通 226361)

卵巢癌是恶性程度极高的妇科肿瘤，发病率居妇科肿瘤的第5位，死亡率居首位，对女性生命造成严重的威胁。由于多数患者确诊时已是发展期，因此寻找灵敏而可靠的指标对卵巢癌诊治及预后评估是亟待解决的问题。白介素－6(IL-6)是一种多功能细胞因子，其除参与免疫应答、炎性反应以及淋巴细胞成熟和分化外，还与某些恶性肿瘤的形成和发展有关;白介素－8(IL-8)是免疫效应细胞生长刺激因子。有研究［1－6］报道IL-6、IL-8在卵巢癌中高表达 ，同时还影响对化疗的敏感性。作者应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定卵巢癌患者、卵巢良性疾病患者和健康体检者血清中IL-6和IL-8水平，探讨其与临床病理、化疗疗效以及预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择南通市肿瘤医院2009年月1月至2010年1月收治的40例卵巢上皮性恶性肿瘤(包括浆液性肿瘤，黏液性肿瘤，子宫内膜样肿瘤)患者，年龄35～68岁，平均年龄52岁;均经病理证实且手术前未经过化疗、放疗、内分泌及生物治疗。手术病理分期按FIGO(2006)标准，Ⅰ、Ⅱ期3例，Ⅲ、Ⅳ期37例。患者入院后均接受肿瘤细胞减灭手术+铂类为主的化疗。40例卵巢上皮性恶性肿瘤患者为卵巢癌组;40例卵巢良性疾病患者为卵巢良性疾病组，年龄36～69岁，平均年龄51岁;同时选择健康体检者40例作为对照组，年龄33～66岁，平均年龄49岁。3组患者的年龄、地区来源等具有可比性。所有研究对象近半年内未服用过免疫调节剂和激素类药物。

1.2 标本收集及主要试剂 所有受试人员均晨起空腹抽取外周静脉血，其中手术患者在术后2周留取第2次血清标本，化疗患者在第2疗程结束留取第2次血清标本，3000 r·min－1离心5～10 min ，分离血清，－80℃低温冰箱冻存，供检测用。IL-6和IL-8检测均采用ELISA法，试剂购自上海信然生物技术有限公司，操作严格按说明书进行。

1.3 操作步骤 IL-6和IL-8检测步骤类似，操作过程如下:1)加入稀释好后的标准品50 μL、待测样品50 μL于反应孔内，立即加入50 μL的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45 min;2)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30 s，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加1次;3)每孔加入100 μL的亲和链酶素－HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30 min;4)同步骤2);5)每孔加入底物A、B各50 μL，轻轻振荡混匀，37℃温育5 min。避免光照;6)取出酶标板，迅速加入50 μL终止液，立即测定结果;7)在450 nm波长处测定各孔的OD值。

1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0进行数据分析，数据用表示，比较用t检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 3组患者血清IL-6、IL-8水平比较 对照组、卵巢良性疾病组及卵巢癌组患者血清IL-6水平分别为(49.96 ± 9.35)ng·L－1、(61.45 ± 10.53)ng·L－1、(161.57 ±6.87)ng·L－1，总体比较差异有统计学意义(P＜0.05);对照组、卵巢良性疾病组及卵巢癌组患者血清 IL-8 水平分别为 (53.56±11.59)ng·L－1、(78.58 ±9.67)ng·L－1、(222.52 ± 11.87)ng·L－1，总体比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 3组血清IL-6、IL-8水平化比较 ng·L－1

2.2 卵巢癌血清IL-6、IL-8水平与临床分期的关系 卵巢癌患者血清IL-6、IL-8水平随临床分期增加而逐渐升高，各分期间的IL-6、IL-8水平比较差异均有统计学意义(P均＜0.05)。见表2。

表2 卵巢癌患者血清IL-6、IL-8水平与临床分期的关系ng·L－1

2.3 血清IL-6、IL-8水平检测与卵巢癌患者预后关系 40例卵巢癌患者中，16例复发或转移。复发或转移患者与稳定患者血清IL-6、IL-8水平比较差异均有统计学意义(P均＜0.05)。见表3。

表3 卵巢癌患者血清IL-6、IL-8水平与复发、转移的关系ng·L－1

2.4 卵巢癌患者化疗前后血清IL-6、IL-8水平变化 卵巢癌患者化疗前IL-6、IL-8水平明显高于化疗后(P ＜0.05)。见表4。

表4 卵巢癌患者化疗前后血清IL-6、IL-8水平ng·L－1

3 讨论

卵巢癌的病因以及发病机制并不十分清楚，细胞因子的异常表达在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用成为目前研究的热点，有研究［1］认为卵巢癌与细胞因子失调关系密切。卵巢癌患者高表达IL-6和IL-8，IL-6水平升高与卵巢癌的预后不良有关，而IL-6和IL-8水平的同时升高则与化疗初敏感性差有关。IL-6体外可阻止顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡，但不能改变抗凋亡Bcl-2蛋白的表达［7］。IL-6和IL-8均是细胞因子网络中的多效应炎性介质，对相关细胞的生长、分化或基因表达都有一定影响。IL-6和IL-8等细胞因子对肿瘤转移及肿瘤血管新生有作用，在许多肿瘤组织都已证实IL-6和IL-8基因表达活跃，各种因子分泌增加［8］。肿瘤细胞在自身生长过程中可直接刺激细胞分泌IL-6和IL-8［9］，IL-6还可增加卵巢癌细胞的黏附性、趋化性和(或)化学促进性以及总的侵袭力［10］。

Yamada等［11］发现IL-6水平的上升与疾病预后不良关系密切。肿瘤细胞能产生IL-8，刺激肿瘤新生血管生成，从而加速肿瘤的生长［12］。本文结果显示，卵巢良性疾病组与对照组相比较lL-6和IL-8水平也明显的增高;卵巢癌组较对照组以及卵巢良性疾病组lL-6和IL-8水平增高更明显。卵巢癌血清IL-6、IL-8水平随临床分期而逐渐升高。复发或转移者与稳定者相比血清IL-6、IL-8水平也有明显的差异。Chan等［6］研究发现，多酚化合物可增加卵巢癌细胞CAOV-3对顺铂的敏感性，这种细胞产生高水平的IL-6，对顺铂的敏感性较差，多酚化合物可抑制CAOV-3细胞产生IL-6，提示顺铂与多酚化合物协同作用的可能机制是减少内源性IL-6的产生。本文结果显示，卵巢癌患者化疗前IL-6和IL-8水平明显高于化疗后(P＜0.05)。总之IL-6和IL-8在卵巢癌中高表达，在卵巢癌的发生、发展中起重要作用，同时还影响其对化疗的敏感性。

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