老年慢性乙型肝炎患者乙肝病毒大蛋白与HBV DNA的相关性

郑 兰 汪 洁 张为元

(上海市奉贤区古华医院感染科，上海 201100)

乙型肝炎是一个全球性严重的公共卫生问题，我国约有9.75%的人群为乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)阳性〔1〕。近年来，随着对乙肝表面抗原大蛋白研究的不断深入，对于其在乙肝发病机制、病毒感染及复制等过程中的作用日益受到关注〔2〕。本文通过检测老年慢性乙型肝炎患者乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)及HBV DNA，探讨两者之前的关系，以期为慢性乙型肝炎的诊断和治疗提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 我科2007年6月至2010年6月诊治的慢性乙型肝炎患者60例，其中男性38例，女22例，年龄62～72岁，平均(68.5±7.9)岁，所有患者均经肝组织病理活检确诊为慢性乙型病毒性肝炎。排除合并严重肝脏、肾脏功能不全及合并其他肝炎病毒感染的患者。将本组60例患者作为观察组，同时选取60例在我院健康体检无乙型肝炎及其他相关疾病的健康人群作为对照组，两组患者资料无显著差异，有可比性。

1.2 检测方法 采用酶联免疫吸附试验进行HBV-LP检测。ETI-max3000全自动酶免分析仪(德国 Diasorin公司产品)，PE5700自动荧光PCR仪(美国PerKin Elmer公司产品)，HBVLP酶联免疫吸附试验定量检测试剂盒(北京热景生物技术有限公司产品)。采用荧光定量法检测HBV DNA，检测试剂盒采用深圳匹基生物工程公司产品，阳性为≥1×103copies/ml，阴性时取实测拷贝值，低于5.0×102copies/ml(灵敏度)时作零拷贝处理。乙肝两对半标志物采用时间分辨免疫荧光法(江苏新波公司ANYTEST-NZ)检测。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计学处理，数据以x±s表示，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，单因素相关性分析采用秩检验。

2 结果

本组60例HBsAg阳性患者，40例(66.67%)HBV-LP阳性，38例(63.33%)HBV DNA阳性，两种血清标志物检测阳性率无显著差异(χ2=0.146，P＞0.05)。其中大三阳组28例，小三阳组32例，两组HBV-LP 差异显著(χ2=16.21，P ＜0.05)，两组HBV DNA差异显著(χ2=15.23，P＜0.05)，对照组人群血清中检测不到HBV-LP与HBV DNA的存在。采取相关性检验，HBV-LP与HBV DNA呈正相关(r=0.356，P＜0.05)。见表1。

表1 两组研究对象HBV-LP与HBV DNA检测结果〔n(%)〕

3 讨论

老年乙肝患者较中青年患者而言，其发病特点有其自身的特殊性，发病迟缓、自觉症状轻，但病情发展迅速，发生肝衰竭的比例明显升高，而且易产生肝性脑病，严重威胁患者的生命安全。外周血HBV DNA检测是用来判定乙型肝炎患者和HBV携带者有无传染性的最直接，同时也是最可靠的指标〔3〕。研究表明，HBV感染者血清中有直径22 nm的小球形颗粒、直径22 nm和长度100～1 000 nm的管状颗粒、Dane颗粒等三种不同形态的病毒颗粒;而HBV外膜包括主蛋白(HBsAg)、中蛋白(M蛋白)和大蛋白(L蛋白)，这三种蛋白在三种不同颗粒表面表达情况不同。在病毒非复制期，血清中HBV-LP水平很低甚至没有，主要分布于肝细胞中。因此，临床上可通过检测血清中有无HBV-LP或其血清含量来判断患者体内HBV病毒是否处于复制状态〔4〕。

本文研究结果显示，大三阳组与小三阳组HBV DNA与HBV-LP检测率均有显著差异，而且相关性检验提示，HBV DNA与HBV-LP相关性很好。过去常将HBeAg的存在作为判断HBV复制与否的参考依据，认为HBeAg阴转是HBV复制减弱、传染性降低及预后良好的象征〔5〕。但多年的临床实践及各种文献报道表明，即使HBeAg转阴后，患者体内仍有HBV复制，而且这些仍在体内活跃复制的HBV可采用荧光定量PCR法检测到，目前认为引起这一现象的原因为免疫清除不全或HBV前C区末端发生变异，而且此类患者常为慢性乙肝患者;且有相关研究证实，此类患者更易发生肝硬化及肝癌，预后差〔6〕。本研究结果发现，对于小三阳患者检测HBV-LP可以更准确地判断患者体内HBV复制情况;而且，本文还发现在健康人群中未能检测到HBV-LP，提示只有HBV携带者或乙型肝炎患者体内才能检测到HBV-LP。

HBV DNA阳性往往被认为是判断HBV感染及复制的金标准，HBV DNA的出现早于HBV其他血清标志物，其拷贝数可直接反映血清HBV复制与传染状态，因此，PCR定量检测HBV DNA在乙型肝炎的早期诊断中具有重要价值;研究还表明，HBV DNA血清水平可反映病毒复制水平，但是并不能完全反映静息期肝细胞HBV复制情况，HBV DNA阴性并不代表体内HBV被完全清除〔7〕。

综上所述，HBV-LP作为判断患者体内HBV病毒是否复制的重要血清标志物与HBV DNA明显相关，根据两者血清水平可以对患者体内HBV复制及感染等进行评估和判断，有助于采取正确及时的治疗措施，促进患者HBV清除和疾病康复。

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2 毛远丽，李伯安，马洪滨，等.乙肝患者外膜蛋白血清学检测及对于判定HBV DNA复制的意义〔J〕.中华病毒和临床实验学杂志，2006;20(3):276-8.

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4 戴利成，王翠妮，何建方，等.血清乙肝病毒外膜大蛋白检测及其与病毒复制的关系〔J〕.中华实验和临床病毒学杂志，2006;20(3):235-7.

5 魏红山，黄玉波，宋淑静，等.e抗原阴性慢性乙型肝炎患者血清表面抗原大蛋白水平与乙型肝炎病毒DNA之间的关系〔J〕.中华肝脏病杂志，2006;7:543-4.

6 王 宇，杨延敏.乙型肝炎患者检测乙肝表面抗原大蛋白和前S1抗原的区别和临床意义〔J〕.大连医科大学学报，2010;32(6):706-8.

7 童海江，王亚玲，夏伟仁.乙肝病毒大蛋白检测在乙型肝炎诊断及治疗中的意义〔J〕.放射免疫学杂志，2007;20(2):188-90.