血府逐瘀颗粒薄层色谱鉴别方法的研究*

刘征辉 ，叶挺祥 ，赵琳琳 ，郭永泽 ，程 奕 ，罗国安

（1.天津海世达检测技术有限公司，天津 300381；2.天津市现代中药质量检验中心，天津 300381；3.清华大学化学系，北京 100084）

血府逐瘀颗粒薄层色谱鉴别方法的研究*

刘征辉1，2，叶挺祥1，2，赵琳琳1，2，郭永泽1，2，程 奕1，2，罗国安3

（1.天津海世达检测技术有限公司，天津 300381；2.天津市现代中药质量检验中心，天津 300381；3.清华大学化学系，北京 100084）

[目的]研究改进血府逐瘀颗粒的薄层色谱鉴别方法。[方法]采用薄层色谱法对成药中的当归、川芎、甘草、牛膝、枳壳进行定性鉴别。[结果]薄层色谱鉴别的色谱斑点清晰，阴性空白无干扰。[结论]所建立的鉴别方法专属性强，方法可靠，可作为血府逐瘀颗粒的定性控制方法。

当归；川芎；甘草；牛膝；枳壳；薄层色谱法

血府逐瘀颗粒由柴胡、当归、生地、桃仁、红花、赤芍、枳壳、桔梗、牛膝、川芎、甘草等11味药组成，具有活血化瘀，行气止痛功效。用于治疗瘀血内阻引起的头痛、胸痛、内热憋闷、失眠多梦、心悸、怔忡、急躁易怒等症[1]。现行部颁标准由天津市药检所起草，只有橙皮苷定性鉴别及芍药苷含量测定，为了提高标准，研究建立了当归﹑川芎﹑甘草﹑牛膝﹑枳壳的薄层鉴别方法[2-5]，以期实现该中药质量的可控性。

1 仪器与试药

1.1 仪器 瑞士CAMAG Linomat5半自动点样仪；CAMAG ADC2薄层展开系统；CAMAG Reprostar3数码成像系统；CAMAG TLC Scanner3薄层色谱扫描仪。

1.2 试剂 硅胶G高效板10.0 cm×10.0 cm（批号：100613，青岛海洋化工厂），甲醇（批号：LOT NO.106535，色谱纯，Fisher Scientific公司），乙腈（批号：LOTNO.105743，色谱纯，Fisher Scientific公司），磷酸（批号：2010年4月29日，色谱纯，天津市光复精细化工研究所），水为MilliQ超纯水，0.22μm微孔滤膜。其他试剂均为分析纯。

1.3 药品 当归对照药材（批号：120927-200512，供TLC鉴别用）、川芎对照药材（批号：120918-200507，供TLC鉴别用）、牛膝对照药材（批号：121066-200504，供TLC鉴别用）、甘草对照药材（批号：120904-200511，供TLC鉴别用），以上对照品均购于中国药品生物制品检定所。血府逐瘀颗粒（批号：090413、090614、090619，江苏晨牌药业有限公司）。

2 定性鉴别

2.1 当归、川芎的TLC鉴别 取本品内容物1.0 g，加乙醚20mL，超声处理10min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。另取当归和川芎对照药材各0.5 g，同法制成对照药材溶液。再按供试品溶液制备方法制得阴性空白对照溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VIB）实验，吸取上述溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光（366 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，且阴性无干扰，结果见图1。

2.2 甘草的TLC鉴别 取本品内容物2.0 g，加乙醚40mL，加热回流1 h，滤过，弃去滤液；取残渣加甲醇30mL加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水40mL使溶解，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20mL，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为对照品溶液。另取甘草对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。再按供试品溶液制备方法制得阴性空白对照溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2010版一部附录VI B）实验，吸取上述两种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，在另槽加入等体积的浓氨试液，预饱和15min后，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外灯光（366 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且阴性无干扰，结果见图2。

2.3 牛膝的TLC鉴别 取本品内容物2.0 g，加甲醇20mL，加热回流40min，静置，取上清液10mL，加盐酸1mL，加热回流1 h，浓缩至约5mL，加水10mL，用石油醚（60～90℃）20mL提取，提取液蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品，加乙醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。再按供试品溶液制备方法制得阴性空白对照溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）实验，吸取上述3种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（40∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在110℃加热至斑点显色清晰，置紫外灯光（366 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的蓝色斑点，且阴性无干扰，结果见图3。

2.4 枳壳的TLC鉴别 取本品内容物1.0 g，加甲醇20mL，超声处理15min，滤过，滤液浓缩至2mL，作为供试品溶液。另取枳壳对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。再取柚皮苷对照品加甲醇制成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。再按供试品溶液制备方法制得阴性空白对照溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）实验，吸取上述3种溶液各1μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1）为展开剂，在另槽加入等体积的浓氨试液，预饱和15min后，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外灯光（366 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性无干扰，结果见图4。

3 讨论

TLC鉴别实验中，因枳壳《中国药典》药材项下中无薄层鉴别方法，本研究借鉴了陈皮的薄层鉴别方法，以枳壳的指标成分柚皮苷做为对照品进行鉴别方法考察。原方法为甲醇加热回流提取，本实验改用超声处理，结果表明超声方法简便易行，效果好。斑点偶有拖尾现象，本实验采用浓氨试液饱和15min，目的是用浓氨的碱性预饱和硅胶薄层板的弱酸性，使样品斑点得到了很好的分离，目标斑点也很清晰。

鉴于方中药味较多，为了达到全面控制药品质量的目的，本实验选取了5味药材进行鉴别能够多指标综合反应药品的内在质量，并为该处方的研究开发提供科学依据。该实验所提供的鉴别方法具有简便易行，重复性好，专属性强的特点。

[1]中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国典一部[S].北京:中国医药科技出版社，2010.

[2]王桂英，王 齐，谢希钧，等.血府逐瘀胶囊方解及功效[J].天津药学，1997，9（1）：37－38.

[3]中华人民共和国药典委员会.《中华人民共和国卫生部药品标准》（中成药第十五册）[S].北京：中华人民共和国药典委员会，1997.

[4]周 娟，王 颖，伍丕娥，等.血府逐瘀软胶囊中药材的鉴别及芍药苷的含量测定[J].华西药学杂志，2006，21（5）：475－477.

[5]李 丹.血府逐瘀丸质量控制方法和金属元素测定研究[D].沈阳：沈阳药科大学，2008.

Identification of Xuefu Zhuyu granulewith TLCmethod

LIUZheng-hui1,2,YETing-xiang1,2,ZHAO Lin-lin1,2,GUOYong-ze1,2,CHENGYi1,2,LUOGuo-an3
（1.Tianjin Highshida Quality Testing Limited Company，Tianjin 300381,China；2.Tianjin Center forQuality Testingof TCM，Tianjin 300381,China； 3.DepartmentofChemistry,Qinghua University,Beijing 100084,Chin a）

[Objective]To improve the differentiatingmethod of Xuefu Zhuyu granulewith TLC.[Methods]Radix Angelica Sinensis,Rhizoma Chuanxiong,RadixGlycyrrhiza,Radix Achyranthis Bidentatae,Fructusaurantiiin Xuefu Zhuyu granulewere identified by TLC.[Results]The developed TLC spotswerequite clearand the negative blank solution had no interference.[Conclusion]Themethod of identification isspecific,reliable,and can beaquality-controllingmethod for thisgranule.

Radix Angelica Sinensis;Rhizoma Chuanxiong;Radix Glycyrrhiza;Radix AchyranthisBidentatae;Fructusaurantii;TLC

R284.1

A

1672-1519（2012）03-0292-03

天津市科技发展计划项目（05SYSYGX25000）。

刘征辉（1982-），男，研究实习员，主要从事中药质量控制及化学计量学方面的研究。

2012-02-24）