丹参酮对大鼠放射性肝损伤保护作用的研究

苑兰惠，史鸿云，李志刚，杨会彬，盖晓惠，张戈妹

（河北大学附属医院放疗科，河北保定 071000）

·论 著·

丹参酮对大鼠放射性肝损伤保护作用的研究

苑兰惠，史鸿云，李志刚，杨会彬，盖晓惠，张戈妹

（河北大学附属医院放疗科，河北保定 071000）

目的研究丹参酮对大鼠放射性急性肝损伤的保护作用。方法健康成年SD大鼠42只，雌雄各半，随机分为正常组（14只）、模型组（14只）、实验组（14只）。实验组于照射前3d起每天给予腹腔注射丹参酮ⅡA磺酸钠15mg/kg，模型组和正常组同时腹腔注射等量生理盐水。对模型组、实验组应用医科达加速器6Mv-X线照射上腹部，总剂量20Gy，单次照射法造成大鼠放射性急性肝损伤。测定大鼠血丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）含量。结果正常组和模型组、正常组和实验组、实验组和模型组的ALT、MDA、TGF-β1比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论丹参酮对大鼠放射性肝损伤具有一定的保护作用，作用机制之一可能与其抗氧化活性有关。

肝肿瘤；丹参酮；放射疗法；大鼠

三维适形放射治疗为中晚期原发性肝癌患者提供了一条新的治疗途径［1］。在放射治疗的同时，放射性肝病是其最主要的并发症之一，也是影响放射耐受量的最主要因素［1］。本研究通过采用6Mv-X射线照射法建立大鼠放射性急性肝损伤模型，应用丹参酮ⅡA治疗一定时间后，考察丹参酮ⅡA对大鼠血丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平的变化情况来探讨丹参酮对放射性肝损伤的治疗保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组：健康成年SD大鼠42只，体质量160～180g，雌雄各半，随机分为正常组（14只）、模型组（14只）、实验组（14只）。

1.2 大鼠肝损伤模型的建立：所有SD大鼠饲养温度（23±2）℃，照明时间为12h/d，饲养1周后进行实验。实验组于照射前3d起每天给予腹腔注射丹参酮ⅡA磺酸钠15mg/kg，模型组和正常组同时腹腔注射等量生理盐水。对模型组、实验组应用医科达加速器6Mv-X线照射上腹部。照射范围，采用1 000kV/25mA状态CT下定位，大鼠仰卧于体模固定板上给予乌拉坦麻醉（浓度25%，500mg/kg），四足固定，上界至膈顶、下界至肝下缘，左、右侧界至腹外侧壁，范围约2cm×4cm，剂量率为1 000 cGy/min，源皮距100cm，计算点深度为3cm，总单次量20Gy。

1.3 数据采集：实验组和模型组照射后72h，全部大鼠脱颈椎处死后开腹，抽取腹主动脉血约3m L，应用自动生化分析仪检测ALT、比色法检测血清MDA，应用酶联免疫法检测血清TGF-β1，具体操作严格按试剂盒说明书。

1.4 统计学方法：应用SPSS10.0统计软件包进行统计分析，计量资料以±s表示，两两比较采用LSD-t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

与正常组相比，模型组经照射后ALT活性明显增高，MDA和TGF-β1水平增高，差异有统计学意义（P＜0.05），造模成功，出现肝放射损伤。实验组ALT活性、MDA和TGF-β1水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），应用丹参酮后虽减轻肝损伤，但未达到正常水平。见表1。

与模型组相比，实验组应用丹参酮治疗后，ALT活性明显下降，MDA和TGF-β1水平下降，差异有统计学意义（P＜0.05），肝损伤程度减轻，治疗有效，见表1。

表1 3组ALT、MDA、TGF-β1的比较

3 讨 论

肝组织中含有丰富的ALT，在肝组织受到损害或坏死时，血清ALT活性明显升高。在本研究中模型组造模成功，能达到肝脏明显损伤，应用丹参酮腹腔注射后可明显降低ALT的水平，可减轻肝损伤程度，可达到保护作用。

丹参酮ⅡA是从活血化瘀中药丹参中提取的脂溶性有效成分，丹参酮类化合物通过与自由基结合生成高稳定性的复合物，降低自由基活性，从而发挥抗氧化作用。Niu等［2］研究认为丹参酮ⅡA能够有效防止低密度脂蛋白的氧化和抑制细胞脂质过氧化。续洁琨等［3］研究发现丹参酮类化合物对应激负荷等原因引起肝损伤的保护作用，可能与其清除自由基、减少氧自由基介导的细胞损害，抑制脂质过氧化损伤的过程有关。本研究模型组大鼠ALT水平显著升高，脂质过氧化产物MDA含量显著增高，肝脏受损明显。而实验组ALT、MDA含量降低，差异有统计学意义，可见丹参酮能阻止自由基对肝细胞膜中不饱和脂肪酸的氧化损伤，保护了肝细胞，减少了ALT、MDA的释放。刘永刚等［4］在考察丹参酮ⅡA对CCl4和D-半乳糖胺引起的小鼠肝损伤的保护作用时也证明丹参酮ⅡA能显著降低血清ALT水平和肝组织匀浆MDA含量。王宇等［5］研究丹参对原位肝移植肝脏的缺血再灌注损伤有保护作用，从而减轻氧自由基及脂质过氧化，保护细胞膜，改善肝功能。

TGF-β1是公认的致肝纤维化的最主要的细胞因子之一［6］，它与肝组织损伤密切相关。Seong等［7］观察正常肝组织照射后受损伤肝组织表达TGF-β1mRNA早期升高。本研究中，模型组TGF-β1明显高于正常组，而实验组的TGF-β1水平明显下降，结果表明在放射反应中丹参酮可降低TGF-β1的水平，减轻肝损伤的程度，对治疗过程中的辐射损伤具有一定作用。

电离辐射对肝脏损伤的主要并发症是放射性肝炎及纤维化，其发生机制尚未完全阐明。它不仅限制了治疗的实施，也降低了患者疗效和生存质量。本研究初步得出丹参酮对放射性肝损伤有一定的治疗保护作用，希望能进一步应用于临床，使患者从中受益。

［1］ 曾昭冲.肝细胞癌的放射治疗［J］.实用肿瘤杂志，2007，22（5）：380-384

［2］ NIU XL，ICHIMORIK，YANG X，et al.TanshinoneⅡA inhibits low density lipoprotein oxidation in vitro［J］.Free Radic Res，2000，33（1）：305-312.

［3］ 续洁琨，栗原博，郑洁静等丹参酮类化合物对小鼠应激性肝损伤的保护作用［J］药学学报，2006，41（7）：631-635.

［4］ 刘永刚，陈厚昌，蒋义平.丹参酮对小鼠肝损伤的保护作用［J］中药材，2001，24（8）：588.

［5］ 王宇，周杰，蒋晓青.丹参对原位肝移植大鼠供肝冷保存再灌注损伤的保护作用［J］.中国组织工程研究与临床康复，2008，12（5）：801-804.

［6］ ZHANG LJ，YU P，LI D，et al.Effect of cytokines on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrogenesis in rat［J］.World J Gastroeaterol，2004，10（1）：77-81.

［7］ SEONG J，KIM SH，CHUNG EJ，et al.Early alteration in TGF-beta mRNA expression in irradiated rat liver［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2000，46（3）：639-643.

（本文编辑：赵丽洁）

R735.7

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1007-3205（2012）03-0339-02

2011-09-26；

2011-10-31

苑兰惠（1973-），女，河北保定人，河北大学附属医院副主任医师，医学硕士，从事肿瘤放射治疗研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.03.038