高效液相色谱法测定蔬菜中邻苯二甲酸二丁酯残留

王少杰 孟雨吟 李秋顺 孙士青 许强 孟令玗

摘要：用高效液相色谱法测定了蔬菜中的邻苯二甲酸二丁酯残留含量。实验色谱条件为色谱柱：ZOR-BAX SB-C18 4.6mm×150mm，5μm；温度：室温(25℃)；检测器：紫外检测器；检测波长：224nm；进样量：10μl；流速：1.0ml/min。检测方法在2～50μg/ml呈线性，最低检出限(3/n)0.025μg/ml，相关系数0.9991。蔬菜中邻苯二甲酸二丁酯含量0.45～7.70mg/kg。实验表明邻苯二甲酸二丁酯在所检测的蔬菜中均有残留，可能与种植土壤污染有关。

关键词：蔬菜；塑化剂；高效液相色谱；邻苯二甲酸酯

中图分类号：0657.7⁺2；X503.231文献标识号：A文章编号：1001-4942(2012)01-0112-03

邻苯二甲酸酯(PAEs)又称酞酸酯、塑化剂，一般为无色透明的油状黏稠液体，难溶于水，不易挥发，凝固点低，易溶于甲醇、乙醇、乙醚等有机溶剂，是大约30种化合物的总称。邻苯二甲酸酯类物质中有6种被美国环境保护署(EPA)列入“优先监测污染物名单”，分别是邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)和邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)。我国将邻苯二甲酸酯类中的DMP、DBP和DOP列入优先控制污染物黑名单。这类物质具有类雌激素作用，影响生物体内激素的正常分泌，可产生致畸、致癌、致突变作用。近来暴发的食品塑化剂事件，使人们对其危害性更加重视。本研究利用高效液相色谱法(HPLC)对几种蔬菜中DBP含量进行测定，从而了解DBP在蔬菜中的残留情况。

1.材料与方法

1.1仪器、试剂与材料

Agilent 1100高效液相色谱仪(配备在线真空脱气机、四元泵、手动进样器、20μl定量环、紫外检测器)、研钵、水浴锅、XW-80A细胞粉碎仪。

甲醇为色谱纯，乙醚、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)均为分析纯。

结球甘蓝、茄子、黄瓜、油麦菜、大葱、大蒜等蔬菜样品购于本地超市。

1.2实验方法

1.2.1前处理称取剪碎的蔬菜样品100.0g于研钵碾碎，加入200ml乙醚超声处理20min，于蒸发皿中40℃蒸气浴蒸发乙醚，蒸发皿冷却后加入甲醇5ml提取DBP。将蒸发皿中的甲醇入10ml容量瓶中，再加入3ml甲醇于蒸发皿中，重复以上提取步骤，倾入10ml容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，0.45μm有机滤膜过滤后，待测。

1.2.2色谱条件参考陈会明等(2004)的方法加以改良。

色谱柱：ZORBAX SB-C18 4.6mm/×150mm，5μm；温度：室温(约25％)；检测器：紫外检测器；检测波长：224nm；进样量：10μl；流速：1.0ml/min。梯度如表1所示。

2.结果与分析

2.1标准曲线与检出限

将DBP用甲醇稀释，分别制成1、5、10、30、50μg/ml系列浓度，按1.2.2色谱条件进行测定，并以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制得标准曲线(图1)。相关系数达到0.99912，按三倍噪声信号计算，最低检测限0.025μg/ml。标准色谱图见图2。

2.2样品测定

将前处理好的样品进行测定，其色谱图见图3。所有蔬菜样品中均有DBP检出，检测结果见表2。

2.3回收率及精密度实验

采用空白标准加入法进行试验。在200ml乙醚中加入一定浓度的DBP标准溶液，超声处理20min，并按1.2.2色谱条件进行测定，重复10次，计算回收率及精密度。结果表明(表3)，该浓度下DBP溶液加标回收率相对标准偏差小于2％符合常量和痕量分析要求。

3.讨论

邻苯二甲酸酯类(PAEs)相对于其他塑化剂而言，毒性不是最大的，但却是存在最为普遍的。目前人们已从成人的尿液、血液、羊水等体液中检测出了邻苯二甲酸酯类，甚至新生儿的尿液中也发现了它们的存在。近几年来，除了对各种邻苯二甲酸酯类化合物的毒性进行了更深入的研究外，邻苯二甲酸单酯对动物和人体的短期快速作用和长期累积作用也引起了相当的关注。这些研究为进一步认识邻苯二甲酸酯类对人类健康的影响，采取预防和保护措施提供了重要参考。

对珠江三角洲地区蔬菜基地毒性有机污染物含量和分布特征的调查结果表明，土壤中有机污染物含量均以PAEs含量最高，美国环保局优控的6种PAEs化合物总含量在3.00～45.67mg/kg，单个化合物以DEHP的含量最高，DBP的含量次之。污灌土壤中PAEs含量相对较高，如北京市工业污灌区土壤中DBP的含量高达59.8mg/kg，DEHP的含量高达16.8mg/kg，是对照土壤的几倍，甚至几十倍。济南郊区塑料大棚菜地也有PAEs检出。土壤中PAEs不仅影响土壤质量、植物的生长和品质，而且还在作物中具有一定的生物累积效应，其慢性毒性对人类的危害相当大，应高度重视。

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