氰胺化钙对温室土壤生物的影响

陈云峰　王秀徽　曹志平

摘要：为了探讨氰胺化钙对土壤生物的影响，２００５～２００７年，在山东省寿光市研究了温室条件下施用氰胺化钙对番茄土壤微生物量Ｃ、微生物量Ｎ、原生动物和线虫丰度的影响。结果表明，施用氰胺化钙后，番茄生长早期和中期微生物量Ｃ显著提高，平均较对照处理高５０．８％；除个别月份外，微生物量Ｎ在整个番茄生育期均高于对照处理，平均高１３．7％；原生动物中，优势类群鞭毛虫在番茄后期得到促进，其丰度高于对照处理８．７倍，稀有类群肉足虫在整个生育期也得到一定的促进；线虫总数下降８８．５％，其中食细菌线虫下降８７．６％，植食性线虫下降９９．3％。总之，氰胺化钙消毒对土壤生物具有促进和抑制双重作用，对微生物和原生动物表现为促进作用，对线虫则为抑制作用。

关键词：氰胺化钙；温室土壤；微生物量C；微生物量N；微型动物丰度

中图分类号：Ｓ１５４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）24－5633-05

氰胺化钙（ＣａＣＮ２）又名石灰氮，兼具肥料和土壤消毒作用，一般用来防治土传病害、改良土壤、调节植物生长［１］。氰胺化钙对土壤生物的影响，主要集中在对病原微生物和根结线虫的防治上，如Ｂｏｕｒｂｏｓ等［２］发现氰胺化钙消毒能降低茄病镰刀菌瓜类专化型９９％以上，Ｓｈｉ等［３］发现氰胺化钙消毒１５ｄ后能降低尖孢镰刀菌黄瓜专化型９２．２％，刘志明等［４］、崔国庆等［５］认为氰胺化钙消毒对控制温室番茄根结线虫有较好的效果。氰胺化钙对土壤微生物、原生动物、线虫群落的影响仅有少量报道，如Ｓｈｉ等［３］、Ｔｉａｎ等［６］报道了氰胺化钙对土壤微生物量和群落结构的影响。在土壤中，微生物直接调节和控制着土壤养分的转化、供给以及植物对养分的吸收［７］，原生动物和线虫统称为微型土壤动物，在改变微生物群落结构、加速微生物周转、驱动微生物多样性和功能稳定性、促进养分和激素释放、调控有机碳积累和稳定性以及通过食物网最终影响植物群落及地上部的更高营养级生物方面起着重要作用［８，９］。氰胺化钙的施用如果影响到这些土壤生物的丰度，将会影响到它们的生态功能，进而影响土壤养分矿化等过程。为此，２００５～２００７年，在山东省寿光市研究了番茄温室施用氰胺化钙对土壤微生物量Ｃ、微生物量Ｎ、原生动物、线虫动态的影响，以期为氰胺化钙的施用提供土壤生态学上的支持。

１ 材料与方法

１．１ 试验点概况

试验地点选在山东省寿光市，当地年平均气温１２．４℃，年均降雨量６０８ｍｍ，年均无霜期１９５ｄ。大棚土壤理化性质为含水量１１．３％，ｐＨ７．１，有机质１３．６ｇ／ｋｇ，全氮１．３ｇ／ｋｇ，碱解氮１０９．３ｍｇ／ｋｇ，有效磷２２２．４ｍｇ／ｋｇ，有效钾４３５．０ｍｇ／ｋｇ。

１．２ 试验设计

试验在２００５～２００６年和２００６～２００７年番茄生长季中进行，２００５～２００６年调查施用氰胺化钙对土壤微生物量Ｃ、Ｎ及原生动物的影响，２００６～２００７年调查施用氰胺化钙对线虫群落的影响。

１．２．１ ２００５～２００６年试验 设不施氰胺化钙（ＣＫ）和施氰胺化钙（ＣａＣＮ２）２个处理，３次重复。小区面积为３４ｍ２，供试作物为番茄（ＬｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍＭｉｌｌ），品种为ＦＡ１８９，每小区种植１１４株番茄。２００５年８月１３日施入稻壳１０．５ｔ／ｈｍ２，施入氰胺化钙７５０ｋｇ／ｈｍ２。将稻壳和氰胺化钙均匀施入土壤表层，旋耕土壤，起垄，覆膜，膜下灌足量的水，等待２０～２５ｄ，揭去地膜，疏松土壤，待土壤晾透后再播种定植。

分别于２００５年９月２５日、１１月６日、１２月１８日、２００６年２月７日、３月１４日、４月２３日、６月６日取样。每小区取１５钻土，土钻直径３ｃｍ，深度为２０ｃｍ，混合均匀作为１个土样，带回实验室在４℃冰箱保存，进行微生物量Ｃ、Ｎ及原生动物测定。

土壤微生物量Ｃ采用熏蒸提取－容量分析法测定，微生物量Ｎ采用熏蒸提取－茚三酮比色法测定［１０］。采用０．５ｍｏｌ／ＬＫ２ＳＯ４浸提经氯仿和未经氯仿熏蒸的土壤，浸提液中有机碳的测定采用重铬酸钾容量法，氮的测定采用水合茚三酮比色法。微生物量Ｃ＝２．６４×（熏蒸后的有机碳－熏蒸前的有机碳），微生物量Ｎ＝５×（熏蒸后的氮－熏蒸前的氮）。

土壤原生动物测定采用最大或然数（Ｍｏｓｔｐｒｏｂａｂｌｅｎｕｍｂｅｒ，ＭＰＮ）法测定［１１］。试验中，稀释梯度为１０－２～１０－４，个别样品为１０－３～１０－５。培养后第４、７和１１天在１００×显微镜下根据观察到的形态及运动状态将原生动物鉴定至鞭毛虫、纤毛虫及肉足虫，根据每个样品中空环数查最大或然数表得出各类群丰度（以每克干土中原生动物数量表示）。

１．２．２ ２００６～２００７年试验 ２００６～２００７年试验也设不施氰胺化钙（ＣＫ）和施氰胺化钙（ＣａＣＮ２）２个处理，４次重复，小区面积为３８ｍ２，供试作物为番茄，品种为ＦＡ１８９。２００６年７月１８日施入稻壳１１．１ｔ／ｈｍ２，施入氰胺化钙１１１１ｋｇ／ｈｍ２。由于该试验温室病虫害情况与２００５～２００６年有所不同，因此氰胺化钙用量有所增加，但都在氰胺化钙施用量范围以内，相应地稻壳的用量也有所增加。稻壳和氰胺化钙施用方法与２００５～２００６年试验相同。分别于２００６年９月２日、１１月３日，２００７年１月３日、３月３日取样。取样方法同上。采用淘洗－离心－漂浮法［１２］分离线虫。在解剖镜下统计线虫数量，线虫总数用每１００ｇ干土线虫的数量表示。将线虫按食性分为4个营养类群：食细菌线虫、食真菌线虫、植食性线虫、杂食-捕食性线虫［１３，１４］。

１．３ 数据处理

采用ｔ检验法检验处理间微生物量Ｃ、微生物量Ｎ、鞭毛虫、纤毛虫、肉足虫、原生动物总和、食细菌线虫、植食性线虫及线虫总数之间差异。若统计数据不满足齐次性假设，则在分析之前采用平方根、倒数、ｌｎ（ｘ＋１）或ｌｇ（ｘ＋１）等方式进行转换，如若转换后仍不满足齐次性要求，采用Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ非参数检验。采用双因素方差分析（取样日期×处理）比较处理效应和时间效应及两者的交互作用。所有统计均采用ＳＰＳＳ１１．５完成。

２ 结果与分析

２．１ 氰胺化钙对土壤微生物量Ｃ、Ｎ的影响

２．２ 氰胺化钙对土壤原生动物的影响

２．３ 氰胺化钙对土壤线虫群落的影响

３ 小结与讨论

氰胺化钙作为一种药肥性土壤处理剂，主要成分为氰胺基化钙、氧化钙和碳素等，ｐＨ１２［５］。在土壤中与水反应生成氢氧化钙和氰胺，氰胺可进一步聚合形成双氰胺，氰胺和双氰胺都具有抑制硝化、消毒和灭虫防病的作用，同时氰胺化钙提供的氮源促进土壤微生物的生长［１］。因此，氰胺化钙对土壤生物既有抑制又有促进作用。Ｓｈｉ等［３］的盆栽试验表明，氰胺化钙对微生物群落的影响主要是短期效应，施用氰胺化钙３ｄ后，微生物数量显著下降，但１５ｄ后即恢复到对照水平。此次大田试验中，施用氰胺化钙总体增加了土壤微生物量Ｃ、微生物量Ｎ，这表明在土壤中氰胺化钙对土壤微生物的促进作用占据主要地位。陈云峰［１５］研究表明，施用氰胺化钙后土壤中的矿化氮含量显著降低，这从另一方面印证了施用氰胺化钙能促进土壤微生物对氮素的吸收。Ｔｉａｎ等［６］研究结果也表明，在两茬番茄间隙施用氰胺化钙后，第二季番茄收获后微生物量Ｃ、微生物量Ｎ、细菌、真菌及放线菌均有显著提高，这也表明氰胺化钙对土壤微生物以促进作用为主。

试验中，原生动物丰度为４１２～１２９２９５ｉｎｄ／ｇ，鞭毛虫、肉足虫、纤毛虫的丰度分别占总丰度的９３．６％、３．８％、２．６％，这种群落结构模式与冯伟松等［１６］测定的广东省韶关市凡口铅锌矿湿地处理系统中原生动物群落结构类似，也与Ｆｉｎｌａｙ等［１７］在苏格兰高山草地的研究结果类似，但与曹志平等［１８］测定的华北平原高产农田的原生动物群落结构显著不同，其鞭毛虫、纤毛虫和肉足虫丰度分别占原生动物总丰度的３９．５％、１．３％和５９．２％。氰胺化钙对原生动物的影响与对微生物的影响类似，尤其是对肉足虫的促进作用与微生物量Ｎ几乎是同步的。由于鞭毛虫与肉足虫主要取食细菌［１９］，推测微生物量的增加主要是细菌生物量的增加。在氰胺化钙使用过程中，秸秆等有机物的施用、灌水及高温等条件均能促进细菌的繁殖，进而促进了原生动物的丰度。

氰胺化钙对根结线虫有良好的防效［４，２０，２１］，此次研究最初目的也是探讨氰胺化钙对根结线虫病的控制效果。结果表明，氰胺化钙较好地抑制了以根结线虫二龄幼虫为主的植食性线虫数量，这与刘志明［４］研究的结果相同。但氰胺化钙的消毒作用是没有选择性的，有益的食细菌线虫［２２］也被抑制，这主要是因为氰胺化钙分解产生的氰胺和双氰胺对土壤生物的抑制是没有选择性的。此外，氰胺化钙消毒过程中，需要覆膜闷棚，相当于太阳能消毒，棚内温度较高，最高可达４７℃［２３］，这对根结线虫二龄幼虫也有一定的抑制作用。与自然生态系统线虫丰度［２4］相比，试验对照处理的线虫丰度较低，与Ｃａｏ等［２５］的研究结果类似。施用氰胺化钙抑制线虫丰度，这与氰胺化钙对微生物和原生动物以促进作用为主的影响不同，可能是微生物、原生动物和线虫对氰胺化钙的响应时间不同。微生物个体小，群落的恢复极快，并很快就超过了原来的生物量，原生动物群落在６个月以后才恢复，线虫由于个体远较微生物和原生动物大［２６］，群落恢复更慢。Ｂｌｏｅｍ等［２７］的研究结果也证实了这一点。

综上所述，氰胺化钙消毒时表现出对土壤生物既有促进又有抑制的双重作用，对微生物和原生动物的影响主要是促进作用占优势，对线虫的影响则是抑制作用占优势。

参考文献：

［１］马军伟，王卫平．石灰氮在农业上的应用［Ｊ］．中国农技推广，２００３，19（３）：４３－４４．

［２］ＢＯＵＲＢＯＳＶＡ，ＳＫＯＵＤＲＩＤＡＫＩＳＭＴ，ＤＡＲＡＫＩＳＧＡ，ｅｔａｌ．ＣａｌｃｉｕｍｃｙａｎａｍｉｄｅａｎｄｓｏｉｌｓｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｏｆＦｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉｆ．ｓｐ．ｃｕｃｕｒｂｉｔａｅｉｎｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅｃｕｃｕｍｂｅｒ［Ｊ］．ＣｒｏｐＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，１９９７，１６（４）：３８３－３８６．

［３］ＳＨＩＫ，ＷＡＮＧＬ，ＺＨＯＵＹＨ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｃａｌｃｉｕｍｃｙａｎａｍｉｄｅｏｎｓｏｉｌｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓａｎｄＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．ｃｕｃｕｍｂｅｒｉｎｕｍ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２００９，７５（７）：８７２－８７７．

［４］刘志明，白先进，秦碧霞，等．石灰氮防治番茄根结线虫盆栽试验［Ｊ］．植物保护，２００６，３２（２）：１０５－１０６．

［５］崔国庆，刘朝贵．黄瓜根结线虫的发生及氰胺化钙土壤消毒技术［Ｊ］．现代农业科技，２００６（３）：３６，４７．

［６］ＴＩＡＮＹＱ，ＺＨＡＮＧＸＹ，ＬＩＵＪ，ｅｔａｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅｓｏｉｌｓａｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｒｏｔａｔｉｏｎ，ｇｒａｆｔｉｎｇ，ａｎｄｓｏｉｌｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｉｎｔｅｎｓｉｖｅｖｅｇｅｔａｂｌｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．ＳｃｉｅｎｔｉａＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２００９，１２３（２）：１３９－１４７.

［７］林启美．土壤微生物量研究方法综述［Ｊ］．中国农业大学学报，１９９７，２（增刊）：１－１１．

［８］ＳＴＯＣＫＤＡＬＥＥＡ，ＷＡＴＳＯＮＣＡ，ＢＬＡＣＫＨＩＪ，ｅｔａｌ．Ｄｏｆａｒｍｍａｎａｇｅｍｅｎｔｐｒａｃｔｉｃｅｓａｌｔｅｒｂｅｌｏｗ－ｇｒｏｕｎｄｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｅｃｏｓｙｓｔｅｍｆｕｎｃｔｉｏｎ？Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅｌａｎｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（ＪＮＣＣＲｅｐｏｒｔＮｏ．３６４）［Ｒ］．Ａｂｅｒｄｅｅｎ，ＵｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍ：ＪＮＣＣ，２００６．

［９］陈小云，刘满强，胡 锋，等．根际微型土壤动物——原生动物和线虫的生态功能［Ｊ］．生态学报，２００７，２７（８）：３１３２－３１４３．

［１０］吴金水，林启美，黄巧云，等．土壤微生物生物量测定方法及其应用［Ｍ］．北京：气象出版社，２００６．５７－６０．

［１１］沈韫芬．原生动物的鉴定技术与方法［Ａ］．尹文英．中国亚热带土壤动物［Ｃ］．北京：科学出版社，１９９２．８３－８７．

［１２］ＢＵＬＬＵＣＫＬＲ，ＢＡＲＫＥＲＫＲ，ＲＩＳＴＡＩＮＯＪＢ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓｏｆｏｒｇａｎｉｃａｎｄｓｙｎｔｈｅｔｉｃｓｏｉｌｆｅｒｔｉｌｉｔｙａｍｅｎｄｍｅｎｔｓｏｎｎｅｍａｔｏｄｅｔｒｏｐｈｉｃｇｒｏｕｐｓａｎｄｃｏｍｍｕｎｉｔｙｄｙｎａｍｉｃｓｕｎｄｅｒｔｏｍａｔｏｅｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄＳｏｉｌＥｃｏｌｏｇｙ，２００２，２１（３）：２３３－２５０．

［１３］ＹＥＡＴＥＳＧＷ，ＢＯＮＧＥＲＳＴ，ＤＥＧＯＥＤＥＲＧＭ，ｅｔａｌ．Ｆｅｅｄｉｎｇｈａｂｉｔｓｉｎｓｏｉｌｎｅｍａｔｏｄｅｆａｍｉｌｉｅｓａｎｄｇｅｎｅｒａ－Ａｎｏｕｔｌｉｎｅｆｏｒｓｏｉｌｅｃｏｌｏｇｉｓｔｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１９９３，２５（３）：３１５－３３１．

［１４］ＹＡＲＤＩＭＥＮ，ＥＤＷＡＲＤＳＣＡ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｐｅｓｔ，ｄｉｓｅａｓｅａｎｄｗｅｅｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔｐｒａｃｔｉｃｅｓｏｎｔｈｅｔｒｏｐｈｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｎｅｍａｔｏｄｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｉｎｔｏｍａｔｏａｇｒｏｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄＳｏｉｌＥｃｏｌｏｇｙ，１９９８，７（２）：１３７－１４７．

［１５］陈云峰．北方蔬菜温室土壤食物网研究［Ｄ］．北京：中国农业大学，２００７．

［１６］冯伟松，杨 军，叶志鸿，等．凡口铅锌矿湿地处理系统的土壤原生动物［Ｊ］．动物学杂志，２００４，３９（１）：２－１１．

［１７］ＦＩＮＬＡＹＢＪ，ＦＥＮＣＨＥＬＴ．Ｐｒｏｔｏｚｏａｎｃｏｍｍｕｎｉｔｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎａｆｒａｃｔａｌｓｏｉｌｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｉｓｔ，２００１，１５２（３）：２０３－２１８．

［１８］曹志平，陈国康，张 凯，等．不同土壤培肥措施对华北高产农田原生动物丰度的影响［Ｊ］．生态学报，２００５，２５（１１）：２９９２－２９９６．

［１９］ＢＥＲＧＭ，ＤＥＲＵＩＴＥＲＰＣ，ＤＩＤＤＥＮＷ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙｆｏｏｄｗｅｂ，ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｍｉｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎｉｎａｓｔｒａｔｉｆｉｅｄＳｃｏｔｓｐｉｎｅｆｏｒｅｓｔｓｏｉｌ［Ｊ］．Ｏｉｋｏｓ，２００１，９４（１）：１３０－１４２．

［２０］李 林，齐军山，李长松，等．氰胺化钙－太阳能消毒土壤防治蔬菜根结线虫病研究［Ｊ］．莱阳农学院学报，２００４，２１（２）：１２２－１２４．

［２１］王玉江，翟乃军，孙东文，等．日光温室番茄根结线虫无公害综合防治技术［Ｊ］．农业工程学报，２００５，２１（增刊）：２３５－２３７．

［２２］ＵＬＲＩＣＨＺ，ＲＯＬＡＮＤＮＰ．Ｎｅｍａｔｏｄｅｓ：ｈａｒｍｆｕｌａｎｄｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｏｒｇａｎｉｓｍｓ［Ａ］．ＢＥＮＣＫＩＳＥＲＧ．Ｆａｕｎａｉｎｓｏｉｌｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ：ｒｅｃｙｃｌｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，ｎｕｔｒｉｅｎｔｆｌｕｘｅｓ，ａｎｄａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［C］．ＮｅｗＹｏｒｋ：ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ，１９９７．８５－１３３．

［２３］ＨＡＮＸＭ，ＣＡＯＺＰ，ＣＨＥＮＹＦ，ｅｔａｌ．Ｇｒａｆｔｉｎｇ，ｍｅｔｈａｍｓｏｄｉｕｍ，ｓｏｉｌｓｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｖｉｒｔｕａｌｌｙｉｍｐｅｒｍｅａｂｌｅｆｉｌｍｓａｓａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｔｏｍｅｔｈｙｌｂｒｏｍｉｄｅｆｏｒＣｈｉｎｅｓｅｐｒｏｔｅｃｔｅｄｔｏｍａｔｏｅｓ［Ｊ］．ＥｃｏｌｏｇｉｃＥｃｏｎｏｍｙ，２００９，５（２）：１７７－１８６．

［２４］ＢＥＲＮＡＲＤＥＣ．Ｓｏｉｌｎｅｍａｔｏｄｅｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ［Ｊ］．ＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＦｅｒｔｉｌｉｔｙｏｆＳｏｉｌ，１９９２，１４（２）：９９－１０３．

［２５］ＣＡＯＺＰ，ＣＨＥＮＧＫ，ＣＨＥＮＹＦ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｎｅｍａｔｏｄｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｒｏｏｔｓｔｏｃｋａｎｄｎｏｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏｍａｔｏｃｕｌｔｉｖａｒｓｏｎｓｏｉｌｂｉｏｔａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｌｌｅｌｏｐａｔｈｙ，２００５，１５（１）：８５－９４．

［２６］梁文举，闻大中．土壤生物及其对土壤生态学发展的影响［Ｊ］．应用生态学报，２００１，１２（１）：１３７－１４０．

［２７］ＢＬＯＥＭＪ，ＬＥＢＢＩＮＫＧ，ＺＷＡＲＴＫＢ，ｅｔａｌ．Ｄｙｎａｍｉｃｓｏｆｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ，ｍｉｃｒｏｂｉｖｏｒｅｓａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｍｉｎｅｒａｌｉｓａｔｉｏｎｉｎｗｉｎｔｅｒｗｈｅａｔｆｉｅｌｄｓｕｎｄｅｒｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌａｎｄｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔ［Ｊ］．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＥｃｏｓｙｓｔｅｍｓａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，１９９４，５１（１－２）：１２９－１４３．