猪Dlx5基因多态性及其与猪体尺和胸椎数的关系

邢晋祎 戈新 王建华 孙力

摘要：为探讨猪远端缺失基因５（ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５，Ｄｌｘ５）的多态性、群体分布特性及其与体尺和胸椎数的关系，采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法检测了猪Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位点在６个中外猪品种中的多态性分布，并分析了该位点与猪体尺和胸椎数的关系。检测结果表明，经ＨｈａⅠ酶切后在６个猪品种群体均发现了ＣＣ、ＣＴ和ＴＴ ３种基因型，其中Ｃ等位基因在莱芜黑猪中为优势等位基因，而Ｔ等位基因在里岔黑猪、鲁莱黑猪、杜洛克猪、大约克猪和长白猪中占优势。在该多态性位点，莱芜黑猪、里岔黑猪、鲁莱黑猪、杜洛克和长白猪群体均处于哈代—温伯格平衡（Ｐ＞０．０５），而大约克猪群体偏离平衡状态（Ｐ＜０．０５）；基因型在群体间的分布差异极显著（Ｐ＜０．０１）。群体遗传特性分析表明，有效等位基因数在１．２５４～１．９９１之间；杜洛克猪的多态信息含量为０．１８２，属于低度多态，其余品种均在０．２５４～０．３７４之间，属于中度多态。关联分析结果表明，该多态性位点对莱芜黑猪体长、体高、屠前活重、腹围、胸围、腿臀围和胸椎数以及里岔黑猪胸椎数的影响均不显著（Ｐ＞０．０５）。Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位点在猪群中存在多态，基因型分布在莱芜黑猪与其他猪种间不同，与猪体尺和胸椎数无显著关联。

关键词：猪；远端缺失基因５（ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５，Ｄｌｘ５）；多态性；体尺；胸椎

中图分类号：Ｓ８２８．８＋９文献标识码： Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）03－0552-04

Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ Ｄｉｓｔａｌ－lｅｓｓ Ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ （Ｄlx５） Ｇｅｎｅ ｉｎ Ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｂｏｄｙ Ｓｉｚｅｓ ａｎｄ Ｔｈｏｒａｃｉｃ Ｓｐｉｎｅ Ｎｕｍｂｅｒｓ

ＸＩＮＧ Ｊｉｎ－ｙｉ１，ＧＥ Ｘｉｎ２，ＷＡＮＧ Ｊｉａｎ－ｈｕａ２，ＳＵＮ Ｌｉ３

（１． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｌｉｎｙｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｌｉｎｙｉ ２７６００５， Ｓｈａｎｄｏｎｇ， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ of Qingdao， Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６１００，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ； ３． Ｓｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅof Qingdao， Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０７１，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ， ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ ｇｅｎｅ （Ｄlx５） ｉｎ ｐｉｇｓ ａｎｄ ｉｔｓ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｌｏｃｉ． ｉｎ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｅ ｏｆ ６ ｂｒｅｅｄｓ ｏｆ ｐｉｇｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｎｄ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ were ｔｈｒｅｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｓｕｃｈ ａｓ ＣＣ， ＴＣ ａｎｄ ＴＴ ｉｎ ｔｈｅ ６ ｐｉｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ found ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｏｆ ＨｈａⅠ． Ａｌｌｅｌｅ Ｃ ｗａｓ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， ａｎｄ ａｌｌｅｌｅ Ｔ ｗａｓ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｕｌａｉ ｐｉｇｓ， Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ， Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｌａｎｄｒａｃｅ ｐｉｇｓ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａ ｃｈｉ－ｓｑｕａｒｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｌｏｃｉ． ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｕｌａｉ Ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｌａｎｄｒａｃｅ ｐｉｇｓ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎ Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ （Ｐ＞０．０５）， ｗｈｅｒｅａｓ ｗａｓ ｎｏｔ ｉｎ Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ ｐｉｇｓ （Ｐ＜０．０５）． Ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣ， ＴＣ ａｎｄ ＴＴ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （Ｐ＜０．０１） ａｍｏｎｇ ｓｉｘ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ． Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ａｌｌｅｌｅｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ １．２５４ ｔｏ １．９９１． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ （ＰＩＣ）ｉｎ Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ ｗａｓ ０．１８２ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｉｎ ｌｏｗ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ， ｗｈｉｌｅ ｉｔ ｗａｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．２５４～０．３７４ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ｐｉｇｓ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｉｎ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ． Ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ Ｄｌｘ５ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂｏｄｙ ｌｅｎｇｔｈ， ｈｅｉｇｈｔ ａｔ ｗｉｔｈｅｒｓ， ｌｉｖｅ ｗｅｉｇｈｔ， ａｂｄｏｍｉｎａｌ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ， ｃｈｅｓｔ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ， ｈｉｐ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｏｆ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ ａｎｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｏｆ Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ（Ｐ＞０．０５）． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｔｈｅ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｌｏｃｉ ｉｎ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｅ ｗｅｒｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｘ ｐｉｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｗｉｔｈ ｏｔｈｅｒ ｂｒｅｅｄｓ． Ａｎｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｌｏｃｉ. ａｎｄ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ｉｎ ｐｉｇｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： pｉｇ； dｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ ｇｅｎｅ； pｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ； bｏｄｙ ｓｉｚｅｓ； tｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ

远端缺失基因（Ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ，Ｄｌｘ）主要调控动物远近轴的发育。其中，脊椎动物Ｄｌｘ基因编码一种保守性较高的转录因子，在软骨和骨骼的形成中可能发挥一定作用。Ｄｌｘ５在骨骼发育的早期开始表达，能直接激活骨骼形成和间接激活骨骼吸收以及促进骨折愈合，是骨骼更新的重要调控子［１，２］。研究发现，猪Ｄｌｘ５基因外显子１存在一个单核苷酸多态性（ＳＮＰ）（ＥＵ１６８２７２： ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ），猪群中存在ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ ３种基因型，与猪的部分胴体性状有关［３］。但该多态位点与胸椎数及其相关性状的关系未见报道。因此，本研究分析了该多态性位点在６个中外猪种中的多态性，并分析了其与莱芜黑猪体尺和胸椎数以及与里岔黑猪胸椎数的关系，以期为阐明Ｄｌｘ５在猪重要经济性状形成中的作用奠定基础，为发掘地方猪种的基因资源及培育新品系提供理论依据。

１材料与方法

１．１试验材料

本试验所用的３个山东地方／培育猪种，分别为莱芜黑猪２６头和鲁莱黑猪（大约克♂×莱芜黑猪 ♀）３０头（采自山东省莱芜黑猪原种猪场），里岔黑猪７５头（采自山东省胶州市里岔黑猪育种中心）。３个引进猪种分别为杜洛克猪７０头、大约克猪６２头和长白猪３９头（采自山东省农业科学院畜牧研究所良种猪育种中心）。所有试验猪饲喂同一日粮、自由采食，饲养管理、防疫措施一致。采集猪耳组织放入７０％乙醇中，－２０ ℃保存。

１．２试验方法

１．２．１ＤＮＡ提取猪耳组织中基因组ＤＮＡ提取按常规苯酚／氯仿方法进行，０．８％琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测基因组的浓度和纯度，－２０ ℃保存。

１．２．２性能测定对达到３６５日龄的２６头莱芜黑猪测定体长、屠前活体质量、腹围、胸围、腿臀围和胸椎数，测定方法根据《种猪测定原理与方法》进行［４］。对达到１００ ｋｇ左右的７５头里岔黑猪屠宰，记录胸椎数。

１．２．３ＰＣＲ扩增引物参照Ｃｈｅｎｇ等［３］序列，由上海生工生物工程技术有限公司合成。引物序列为：Ｆ：５′－ＧＣＣＡＣＣＧＣＣＡＧＴＧＡＡＴＧＡ－３′，Ｒ：５′－ＴＡＴＣＴＧＴＣＣＣＣＡＣＣＣＣＣＡＣ－３′。ＰＣＲ反应体系：１０×ＰＣＲ Bｕｆｆｅｒ ２．５ μＬ，ＭｇＣｌ２（２５ ｍｍｏｌ／Ｌ）２ μＬ，ｄＮＴＰｓ（各２．５ ｍｍｏｌ／Ｌ）２ μＬ（ＴａＫａＲａ），上下游引物（２５ μｍｏｌ／Ｌ）各０．４ μＬ，ｒＴａｑ ＤＮＡ聚合酶（５ Ｕ／μＬ）０．２ μＬ（ＴａＫａＲａ），基因组ＤＮＡ（５０～１００ ｎｇ／μＬ）１ μＬ，灭菌超纯水加至２５ μＬ。ＰＣＲ扩增程序：９４ ℃ ４ ｍｉｎ，然后９４ ℃ ３０ ｓ，６０ ℃ ３０ ｓ，７２ ℃ ４０ ｓ，进行３５个循环，７２ ℃ １０ ｍｉｎ。ＰＣＲ产物用１．５％琼脂糖凝胶电泳检测。

１．２．４ＰＣＲ－ＲＦＬＰ在４ μＬ ＰＣＲ产物中加入４ Ｕ的ＨｈａⅠ内切酶（ＴａＫａＲａ），１０×M Bｕｆｆｅｒ １ μＬ，灭菌超纯水加至１０ μＬ，３７ ℃水浴消化６ ｈ，１．５％琼脂糖凝胶电泳检测，观察和记录酶切结果，判断个体的基因型。

１．２．５ＰＣＲ产物测序经ＨｈａⅠ内切酶酶切后，对不同基因型个体的ＰＣＲ产物用柱式胶回收试剂盒回收纯化，回收后的ＰＣＲ产物送上海生工生物工程技术服务公司直接测序。

１．３统计分析

统计ＨｈａⅠ酶切后的各种基因型，用ＰｏｐＧｅｎ３２软件计算基因频率、遗传纯合度（Ｈ０）、遗传杂合度（Ｈｅ）、有效等位基因数（Ｎｅ），并作χ２适合性和独立性检验；用软件ＰＩＣ＿Ｃａｌｃ ０．６计算多态信息含量（ＰＩＣ）。根据固定效应模型，用ＳＡＳ ８．２软件ＧＬＭ程序对莱芜黑猪不同基因型个体体尺和胸椎数以及里岔黑猪胸椎数的最小二乘均值进行估计和显著性检验。统计分析模型为：Ｙｉｊ＝μ＋Ｇｉ＋Ｓｊ＋ｅｉｊ，其中Ｙｉｊ为性状表型值，μ为群体平均值，Ｇｉ为基因型效应，Ｓｊ为性别效应，ｅｉｊ为残差效应。

２结果与分析

２．１Ｄｌｘ５基因ＰＣＲ扩增和ＨｈａⅠ酶切结果

以猪耳组织ＤＮＡ为模板，经ＰＣＲ扩增，得到１条３９９ ｂｐ的特异性条带（图１），与根据ＧｅｎＢａｎｋ登录序列计算的片段大小相同。ＰＣＲ产物经ＨｈａⅠ限制性内切酶酶切后，得到３种基因型（图１），分别为ＴＴ（３９９ ｂｐ），ＴＣ（３９９／２２２／１７７ ｂｐ），ＣＣ（２２２／１７７ ｂｐ）。

２．２不同基因型的序列差别

测序结果表明，猪Ｄｌｘ５基因３９４位碱基Ｃ→Ｔ，通过与人、小鼠、大鼠和鸡Ｄｌｘ５基因比对发现，这些物种在该位点均为Ｃ，３种基因型测序结果如图２所示。

２．３不同猪种Ｄｌｘ５基因的基因型和基因频率及群体χ２检验

根据ＨｈａⅠ内切酶酶切结果，统计６个猪群的基因型和基因频率分布见表１。从表１可知，每个群体均检测到３种基因型，在莱芜黑猪中Ｃ为优势等位基因，而鲁莱黑猪Ｔ为优势等位基因，ＴＣ在这两个猪种中均为优势基因型；在里岔黑猪、杜洛克猪和大约克猪中Ｔ为优势等位基因，ＴＴ为优势基因型；在长白猪中也是Ｔ为优势等位基因，ＴＴ和ＴＣ均为优势基因型，其基因型频率均为０．４３６。

经χ２适合性检验发现，除了大约克猪外，其余群体基因型分布均达到了哈代—温伯格平衡（Ｐ＞０．０５）（表１）。经χ２独立性检验，不同基因型在群体间的分布差异极显著（Ｐ＜０．０１，χ２＝６１．６６＞χ２０．０１（１０）＝２３．２０９）（表２）。由表２可知，莱芜黑猪与里岔黑猪、杜洛克猪、大约克猪差异极显著（Ｐ＜０．０１）；里岔黑猪与鲁莱黑猪、杜洛克猪和大约克猪差异极显著（Ｐ＜０．０１）；鲁莱黑猪与杜洛克猪差异极显著（Ｐ＜０．０１），与大约克猪差异显著（Ｐ＜０．０５）；杜洛克猪与大约克猪和长白猪差异极显著（Ｐ＜０．０１）；大约克猪与长白猪之间差异极显著（Ｐ＜０．０１），其余猪种之间差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。

２．４Ｄｌｘ５基因的遗传特性分析

Ｄｌｘ５基因在６个猪群的遗传特性分析见表３。结果表明，所检测各群体的杂合度（Ｈｅ）较大，杂合度由低到高依次为杜洛克、里岔黑猪、大约克猪、长白猪、鲁莱黑猪、莱芜黑猪。多态信息含量（ＰＩＣ）分析结果表明，除杜洛克猪ＰＩＣ＜０．２５０，处于低度多态外，其余各群体ＰＩＣ均在０．２５0～０．５０0之间，表明该位点在这５个猪种中均处于中度多态。

２．５Ｄｌｘ５基因不同基因型与莱芜黑猪体尺和胸椎数的关联分析

在对莱芜黑猪Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位点多态性检测的基础上，对２６头莱芜黑猪体尺和胸椎数与该位点多态性的关系进行了分析（表４）。结果显示，３种基因型ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ对莱芜黑猪体尺和胸椎数影响均不显著（Ｐ＞０．０５）。

２．６Ｄｌｘ５基因不同基因型与里岔黑猪胸椎数的关联分析

对７５头里岔黑猪胸椎数关联分析结果表明（表5），ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ ３种基因型对里岔黑猪胸椎数影响同样未达到差异显著的水平（Ｐ＞０．０５）。

３讨论

３．１Ｄｌｘ５基因多态性在不同猪群中的遗传分析

研究表明Ｄｌｘ５基因的失活可以使小鼠颅面骨、中轴骨和附肢骨骼异常，导致围产期小鼠死亡［５］，所以Ｄｌｘ５基因对于调节哺乳动物肢体的发育起着非常重要的作用。本研究对同源盒基因Ｄｌｘ５外显子１的多态性在不同猪群中的分布进行了检测，在所检测的６个猪群中均发现了３种基因型，但等位基因Ｔ和Ｃ在不同猪群存在一定差异。在莱芜黑猪中Ｃ等位基因占优势，但在其他猪种中均是Ｔ等位基因占优势，而Ｃｈｅｎｇ等［３］在所检测的３１０头大约克猪×梅山猪的杂交Ｆ２代中却是Ｃ等位基因占优势。经序列分析发现在人（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿００５２２１．５）、小鼠（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿１９８８５４．１，ＮＭ＿０１００５６．２）、大鼠（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿０１２９４３．１）和鸡（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ： ＮＭ＿２０４１５９．１）Ｄｌｘ５基因的该位点也是Ｃ等位基因占优势。本研究之所以与上述研究和其他动物Ｄｌｘ５基因在该位点存在差异，可能与动物品种有关。

３．２Ｄｌｘ５基因多态性与莱芜黑猪体尺和胸椎数的关系

研究表明，Ｄｌｘ５基因能直接调节谷氨酸脱氢酶的表达和促进ＧＡＢＡｅｒｇｉｃ（ｇ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｅｒｇｉｃ）神经元的分化［６］，并且已经证明Ｄｌｘ５在人类淋巴母细胞核和大脑组织中具有印记效应［７］，但Ｋｉｍｕｒａ等［８］认为在小鼠脑中不存在印记效应。最近的研究表明，Ｄｌｘ５基因在杂交猪的骨骼肌、脂肪、肺、胃和小肠中呈母性表达，而在心、肝、肾、子宫、卵巢、睾丸或者垂体中不存在印记效应［３］。而印记基因在调控哺乳动物胎儿生长、发育和胎盘的功能以及出生后的行为方面具有重要的功能。Ｄｌｘ５基因外显子１Ｃ→Ｔ的突变导致丙氨酸变为缬氨酸，这可能改变蛋白质的结构，而蛋白质结构的变化可能影响到骨骼的发育和生长激素的分泌［３］。

猪体长与胸椎和腰椎的数量有关，其胸腰椎骨数一般在２０枚左右，一般每增加１枚椎骨数，体长可以增加１．８４ ｃｍ。猪椎骨数的遗传力为０．７５，胴体长与椎骨数有强的遗传相关［９］。本试验中莱芜黑猪ＴＣ基因型个体胸椎数多于ＴＴ和ＣＣ基因型个体，而里岔黑猪ＴＴ基因型胸椎数稍多于ＴＣ基因型，但均未达到差异显著水平（Ｐ＞０．０５），是否ＴＴ或者ＴＣ基因型对猪的脊椎发育起着一定的作用，尚需进一步研究。此前，Ｃｈｅｎｇ等［３］发现杂交猪（大白猪×梅山猪）Ｆ２代资源家系的不同基因型胴体长、骨骼百分比、平均背膘厚等性状呈极显著差异，而本研究不同基因型其体尺差异却不显著，可能与样本含量较少有关。另外，最近研究发现ＢＭＰ－２蛋白能促进Ｄｌｘ５ ｍＲＮＡ表达水平增高［１０］，而属于ＢＭＰｓ亚家族的ＧＤＦ１１基因在确立骨骼模式中起着重要作用，ＧＤＦ１１基因缺失的小鼠表现为胸腰脊椎数增加［１１，１２］。猪ＢＭＰ－２、ＧＤＦ１１与Ｄｌｘ５间的关系值得进一步探讨。

致谢：在试验过程中得到２００９届毕业生王留强和胡刘岩同学以及２００８级生物技术专业贾坤航同学的帮助，在此表示感谢！

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［１２］ ＭＣＰＨＥＲＲＯＮ Ａ Ｃ， ＬＡＷＬＥＲ Ａ Ｍ， ＬＥＥ Ｓ Ｊ． Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｅｒｉｏｒ／ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ａｘｉａｌ ｓｋｅｌｅｔｏｎ ｂｙ ｇｒｏｗｔｈ ／ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ １１ ［Ｊ］． Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ，１９９９，２２（３）：２６０－２６４．

（责任编辑曾德芳）

收稿日期：２０１１－０７－０７

基金项目：山东省青岛市基础研究计划项目（０９－１－３－６４－ｊｃｈ）；临沂大学博士启动基金项目（ＢＳ０８０１９）

作者简介：邢晋祎（１９６８－），男，山东曹县人，副教授，博士，主要从事动物分子遗传研究，（电话）１５８６４９９２８０７（电子信箱）ｊｙｘｉｎｇ０２＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ；

通讯作者，戈新（１９５７－），研究员，主要从事畜禽育种与技术推广工作，（电话）１５５０５３２１６３９（电子信箱）ｑｄｘｇ１９９３＠１２６．ｃｏｍ。