三苦滴丸活血化瘀作用的实验研究
2012-04-25刘岳松张永和
刘岳松,张永和
(1.长春中医药大学,吉林 长春 130117;2.长春中医药大学附属医院,吉林 长春 130021)
三苦滴丸是通过三七、苦碟子分别提取精制,得到三七总皂苷、苦碟子总黄酮2个有效部位,制成滴丸剂,用于中医胸痹(冠心病心绞痛)心血瘀阻证[1-3]的治疗。本实验旨在通过动物实验进一步探讨三苦滴丸活血化瘀作用机制。
1 实验材料
1.1 实验药品 三苦滴丸:长春中医药大学研发中心提供,规格:0.3 g/粒,含生药7.5 g,批号:030310。复方丹参滴丸:规格:27 mg/粒,天津天士力制药股份有限公司,批准文号:国药准字Z10950111,批号:100309。盐酸异丙肾上腺素注射液:上海禾丰制药有限公司,批号:100201。肝素:上海生物化学制药厂,批号:072010。乌拉坦:中国医药(集团)上海化学试剂公司,批号:080412。
1.2 实验动物 Wistar大鼠,雌雄兼用,体质量250~270 g。由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。合格证号:SCXK-(吉)2007-0003。
1.3 实验仪器 MP120-1电子称:上海第二天秤仪器厂;TYXN-96多功能血液凝集仪,上海通用机电技术研究所;血液流变仪,北京泰诺德BV-100型;小动物血栓生成仪,YLS-14B,山东省医学科学院设备站。
2 实验方法
2.1 血瘀证模型动物血液流变学实验方法 血瘀证模型的复制:于末次给药后30 min造模,按1 mg/kg盐酸肾上腺素对除空白组以外的动物进行皮下注射。注射给药2 h后,将所有组别的动物放入冰水中(4 ℃)浸泡5 min,然后将其捞出,2 h后再次注射相同剂量的盐酸肾上腺素。禁食不禁水20 h后,20%乌拉坦溶液(5 mL/kg体质量)麻醉后经腹主动脉穿刺取血,肝素抗凝。采用血液流变仪测试不同切变率下的全血黏度。
2.2 大鼠颈动脉刺激法 选用Wistar大鼠50只,随机将其分为对照组、阳性药(复方丹参滴丸250 mg/kg体质量)对照组,三苦滴丸高剂量组1.48 g/kg体质量、中剂量组0.74 g/kg体质量、低剂量组0.37 g/kg体质量,分笼饲养,每组10只。1次/d,连续灌胃1周。模型组给予蒸馏水1 mL/100 g。于末次给药30 min后腹腔注射麻醉。切开颈部皮肤,剥离左侧颈总动脉,用YSL-14B小动物血栓生成仪电刺激颈主动脉,观察主动脉血流变化率(%)。
2.3 动-静脉旁路血栓模型 给药剂量方法同上,末次给药30 min后,对大鼠注射腹腔给药麻醉。在颈部正中切口,首先做气管插管,确保在手术过程中大鼠呼吸顺畅、剥离右侧颈总动脉以及左侧颈外静脉。先将插管(插入前管内充满肝素生理盐水)一端插入静脉,插入后从插管注射肝素5 u/kg,另一端插入颈动脉。手术完成后开启动脉夹,血流由动脉端流入颈静脉15 min后中断,立刻取出插管中的丝线,滤纸吸干后采用微量电子天秤称取其血栓湿重(mg),总重量减去丝线重量即为血栓湿重(mg),烘干24 h后称血栓干重。
3 实验结果
3.1 三苦滴丸对血瘀证模型动物全血黏度的影响 见表1。
3.2 三苦滴丸对大鼠动脉血栓形成后血流变化率的影响 见表2。
表1 三苦滴丸对血瘀证模型动物全血黏度的影响±s,n=10)
表2 三苦滴丸对大鼠动脉血栓形成后血流变化率的影响±s,n=10)
3.3 三苦滴丸对大鼠血栓模型动物血栓形成的影响 见表3。
表3 实验各组大鼠动脉血栓重量的比较±s,n=10)
4 讨论
采用大鼠血瘀证模型实验证明低切变率下三苦滴丸高剂量组动物的全血黏度降低(P<0.05),中、低剂量组也有下降趋势,表明三苦滴丸对瘀血证大鼠不同切变率下的全血黏度均有明显的改善作用,说明了三苦滴丸能有效的改善心肌损伤部位的红细胞聚集程度,对局部心肌损伤具有一定保护作用。通过采用电刺激大鼠颈总动脉血栓形成法造成血管壁损伤,产生血栓形成,结果发现三苦滴丸高、中剂量组能明显延长大鼠颈总动脉血栓形成(堵塞动脉程度)时间。采用动-静脉旁路血栓形成模型发现三苦滴丸高剂量组和中剂量组动物静脉血栓湿重和干重量均有明显减少[4-5]。
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