HPLC 法测定防芷鼻炎片中芍药苷的含量

2012-04-19梁可文

中国民族民间医药 2012年16期

梁可文龙云施丹

广西健丰药业有限公司，广西南宁 530104

防芷鼻炎片由苍耳子、白芷、防风、白芍、甘草等10味药组成的复方制剂，功能清热消炎，祛风通窍。用于治疗慢性鼻炎引起的喷嚏、鼻塞、头痛、过敏性鼻炎、慢性鼻窦炎等。白芍为本方中有效成分之一，而白芍主要成分为芍药苷，因此测定本品中芍药苷的含量，可作为本品质量控制的指标之一。为了更好的控制该制剂的质量，保证药品使用安全、有效，本文参考有关文献［1－3］，采用HPLC法测定了芍药苷的含量。

1 仪器与试药

日本岛津LC－10A高效液相色谱仪，日本岛津UV－10A紫外检测器，威玛龙色谱工作站;AICHROM柱 (C18，4.6×250mm，5μm);kh－250db型超声处理器 (昆山禾创超声仪器有限公司)。

芍药苷对照品中国药品生物制品检定所提供，批号:110736－200220，供含量测定用。防芷鼻炎片 (A厂提供，共3批，批号:20100302、20100506、20100808)，乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性

色谱柱 AICHROM 柱 (C18，4.6mm ×250mm，5μm)，流动相:乙腈－0.05mol·L－1磷酸二氢钾溶液 (12:88);流速:1.0 mL· min－1，检测波长:230nm，进样量为10μl，柱温为室温。理论塔板数按芍药苷峰计算均在2000以上。色谱图见图1。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含芍药苷30μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

图1 高效液相色谱图

取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理60分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。

2.4 测定法

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，以上述色谱条件测定，根据芍药苷峰面积，以外标法计算供试品中芍药苷的含量。

2.5 线性关系考察

精密称取芍药苷对照品10.4mg，置于100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，制成104.0μg· ml－1对照品溶液，备用。分别精密吸取上述对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，进样测定。以对照品进样浓度为横坐标(X)，峰面积积分值为纵坐标 (Y)绘制标准曲线，回归方程为:Y=13273X－3224，r=0.9998。结果表明:芍药苷在进样浓度10.4～52.0μg· ml－1范围内，进样浓度与芍药苷峰面积呈良好的线形关系。

2.6 精密度试验

精密吸取对照品溶液 (31.2μg· ml－1)10μl，注入液相色谱仪，连续进样6次，测定芍药苷峰面积。结果，芍药苷对照品峰面积RSD=1.80%，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性试验

精密吸取供试品溶液 (批号:20100302)10μl，分别于0、2、4、6、8、10h测定峰面积。结果，RSD=0.98%(n=6)，表明供试品溶液在10小时内稳定性良好。

2.8 干扰试验

按上述色谱条件，精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μl，分别注入色谱仪，记录色谱图。结果，阴性对照在芍药苷色谱峰位置上无干扰，表明本方法专属性良好。

2.9 重复性试验

取同一批样品 (批号:20100302)适量，精密称取6份，按供试品溶液项下的方法制备，测定。结果，RSD=1.54%(n=6)，表明本方法的重复性良好。

2.10 加样回收率试验

取已知含量的本品 (批号:20100302)，含量:0.1608mg/片，平均片重:0.3549g/片)，除去糖衣，研细，取约0.8g，精密称定，精密加入芍药苷对照品溶液104.0μg· ml－1(精密称取芍药苷对照品10.4mg，置于100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得)3.5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理60分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，测定，结果见表1。