黄杨水提取物的抑菌活性研究

张宏萌

山东中医药大学实验中心，山东 济南 250355

黄杨 Buxus sinica(Rehd.et.Wils)Cheng为黄杨科黄杨属植物。在我国主要分布在南方各省。黄杨自古以来就是一种重要的药用植物，主要有祛湿通络、解毒消肿等功效［1］。黄杨主要的化学成分为三萜类、如无羁萜 (friedelin)，表无羁萜醇 (epifriedelanol)和无羁萜醇 (friedelanol);黄酮类，如槲皮素－3－β－D－葡萄糖－7－α－L－鼠李糖甙、山柰酚－3－β－D－葡萄糖－7－β－L－鼠李糖甙等;生物碱类等［2－4］。

1 材料和方法

1.1 黄杨水提取物制备

取干燥的黄杨的叶片，加5倍量蒸馏水于100℃30min后用纱布过滤，重复上述实验步骤，合并两次滤液，加热蒸发浓缩至每ml含生药1g，高压灭菌后于冰箱内备用。

实验所采用的金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 (分离)、绿脓杆菌、变形杆菌等由山东中医药大学基础医学院微生物学实验室提供。

1.2 黄杨水提取物的抗菌活性测定

用纸片扩散法进行试验，培养基和药敏纸片的制备按照参考文献［8］的方法进行。将黄杨水提取物配成 50 mg.ml－1的供试液，取制备好的纸片 (直径为6 mm)放入供试液中浸泡2 h，然后取出纸片置于40℃烘箱中烘干;将菌液浓度为106 ml－1的金黄色葡萄球菌 (分离)、痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌分别均匀涂抹在普通琼脂培养基上。最后，再将制备好的药敏片均匀贴于培养基的3个位点，然后置于37℃恒温箱中培养18 h，分别测定各自的抑菌圈直径。取3个重复的平均值为最终结果。依同样方法测定水提取物的抑菌活性。

1.3 最低抑菌 (MIC)浓度测定

采用试管比浊法［5－6］配制系列肉汤培养基，分别加入50 μL细菌悬液，最后一管补加50 μL肉汤。对各管进行比浊。将未见细菌生长的管内肉汤转接到普通琼脂培养皿上，再于37℃条件下培养18～24 h。将琼脂平皿上未见细菌生长的最低药物浓度最为最低杀菌浓度 (MIC)。

2 结果

黄杨水提物的抑菌活性如表1显示。

黄杨水提物对除绿脓杆菌、痢疾杆菌之外的四种细菌均具有抗菌活性，抑菌圈直径:大肠杆菌﹥变形杆菌﹥金黄色葡萄球菌﹥金黄色葡萄球菌 (分离)。

最低抑菌浓度时抑菌圈直径:痢疾杆菌﹥大肠杆菌=变形杆菌=金黄色葡萄球菌=金黄色葡萄球菌 (分离)。半抑菌浓度时只对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌 (分离)有抑菌作用。

表1 黄杨水提物的抑菌活性

3 讨论

黄杨作为药用植物早已记载于《本草纲目》:“叶苦平无毒”，主要有行气活血、祛湿通络、清热解毒、祛风、止血等功能。民间用以治疗疟疾、梅毒、风湿、皮炎和狂犬病，而黄杨木粉还是民间流传治疗“心病“的有效药物［7］。实验显示，黄杨水提取物的MIC为50μg.ml－1，显示了该类植物水提物的较好的抑菌效果。由于黄杨中含有多种化学成分，如黄酮类、β－谷甾醇类、生物碱等，据此推测黄酮类和生物碱类是黄杨水提物的重要活性成分。和其他抗菌中药［15］相比，黄杨的最低抑菌浓度要低很多，所以黄杨在临床抗菌消炎方面具有极大优势。不过实验还显示，黄杨水提物抑菌的选择性较强，如对痢疾杆菌、绿脓杆菌等活性的作用较小。除此之外，黄杨还有其他重要的药用功效以及良好的观赏价值。因此，黄杨的综合开发价值较高。

［1］吴征镒.新华本草纲要 (第一卷)［M］.上海:上海人民出版社，1988:316.

［2］林云良，邱明华，李忠荣，等.黄杨中的非生物碱化学成分［J］.云南植物研究，2006，28(4):429－432.

［3］梁军，苏小建，徐庆，等.小叶黄杨石油醚部位化学成分［J］.中药材，2009，32(7):1062－1064.

［4］邱明华，聂瑞麟.黄杨生物碱及其植物资源［J］.天然产物研究与开发，1992，4(4):41－57.

［5］吴国娟，张中文，李焕荣，等.中草药对奶牛乳房炎6种致病菌的抑茵效果观察［J］.北京农学院学报，2003，18(3):195－198.

［6］李健强，李六金.兽医微生物学实验实习指导［M］.西安:陕西科学技术出版社，1998.

［7］李进喜等.黄杨宁双盲法治疗冠心病的疗效观察［J］.中成药研究，1984，(5):15.

［8］邱明华.黄杨科植物生理活性生物碱成分［D］.北京大学博士研究生论文，1996:1－120.