泌尿生殖道沙眼衣原体检测结果的分析

辛青松 何韶坚 修宁宁 张光辉 陈 杰

1.广东省东莞康华医院，广东 东莞 523080;2.东莞市塘厦医院，广东 东莞 523000

泌尿生殖道沙眼衣原体 (Chlamydia trachomatis，CT)感染是世界范围内一种常见的性传播疾病，其发病率高，流行广泛，已经发展成较为严重的公共卫生问题。女性，其引起的疾病包括宫颈炎、尿道炎、急性输卵管炎、盆腔炎、异位妊娠、不孕不育等后果;男性引起尿道炎、附睾炎、前列腺炎等，往往病情反复，导致不孕不育症［1－2］。当沙眼衣原体侵入生殖道后早期多呈现隐匿感染，表现为无症状或轻微症状而不为病人所重视，其感染在我国有逐渐上升的趋势［3］。为了解本地区CT感染情况，进行了本次调查，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 来自东莞康华医院2010年5月1日至2010年11月30日的泌尿外科、皮肤科、妇产科的标本，共1459例。

1.2 主要试剂和仪器 试剂盒为爱尔兰Trinity公司，批号T016107，有效期20101226，酶标仪为Clinibio 128C，产地:奥地利;洗板机为DEM－III，产地:北京拓普。

1.3 标本采集 ①女性宫颈样本采集:先用清洁拭子，清洁宫颈口周围的分泌物，用拭子插入宫颈管内2～3cm，转动5～10s后取出，放入传送管中，于标记处折除棉签杆，盖紧管盖。②男性尿道样本采集:先用清洁拭子清除尿道口周围分泌物，后用拭子插入男性尿道2～3cm左右，转动拭子后取出，于标记处折除棉签杆，盖紧管盖 (嘱病人采样前一小时内勿小便)。③男性尿液标本:采集5ml初段尿(嘱病人在采样之前一小时内不应小便)。

1.4 操作方法

1.4.1 标本处理 标本及质控物，阳性、阴性对照置于预热板上95～100℃，15min。

1.4.2 主要操作过程 分别将质控物和阳性、阴性对照及标本各100μl加入微孔板置于37±2℃孵育90分钟;洗板:将抗体试剂100μl加入微孔板中，37℃孵育30分钟;洗板。再加入100μl酶结合物，37℃孵育30分钟。

1.4.3 结果判断 分别加入50μlA和B底物;用酶标仪(主波长450～副波长620nm)双波长检测各孔吸光值(A)，S/CO＞1为阳性。

1.5 统计学分析

采用SPSS13.0进行统计学处理，卡方检验。

2 结果

表1 不同科室ELISA法检测的CT阳性率

经卡方检验，皮肤科和泌尿外科高于妇产科，比较差异有统计学意义 (P＜0.01)。

表2 不同性别ELISA法检测的CT阳性率

经卡方检验，男性和女性阳性检出率比较差异有统计学意义 (P＜0.01)。21～30岁和31～40岁年龄组明显高于其它年龄段。

表3 不同年龄段ELISA法检测的CT阳性构成比

3 讨论

3.1 沙眼衣原体在宿主细胞内生长繁殖，是一类专性细胞内寄生，具有特殊的发育周期，能通过细胞滤器的原核细胞型微生物。其特殊发育周期，可观察到两种不同的颗粒结构，一种是原体，具有高度的感染性，其形态多为球形，直径约为0.3μm;一种是网状体，没有感染性，圆形或不规则形，直径约为0.5～1.0μm甚至更大。一般认为网状体在包涵体中以类似普通细菌的二分裂方式增殖，经过若干次分裂之后，网状体浓缩成具有坚韧细胞壁的原体，并从细胞破裂释放，继而感染其他细胞，开始新的发育周期，每个发育周期需要48～72小时［4］。

3.2 本实验CT阳性检出率为9.87%，与国内其他文献报道不一致，王新等报道为 7.2%［5］，王丽等报道为33.67%［6］，这可能是由于检测的试剂盒不同及CT血清型存在地区差异或变异等原因造成［5］。本实验发现不同科室的阳性检出率有明显差异 (x2=35.17，P＜0.01)，皮肤科为25.0%，泌尿外科为17.58%，妇产科为7.60%，皮肤科和泌尿外科远高于妇产科，通过随访临床发现，过来就诊皮肤科和泌尿外科的病人大多都是因为出现有尿道或阴道搔痒等不适症状，就诊目的明确。除去试剂盒敏感性差异、血清型存在地区差异或变异、实验操作原因外，取样的质量对衣原体的检测结果极为重要［5］。例如我院患者做检测时，通常衣原体和支原体同时分别取材送检，由于取第1根拭子时可能已经带走取样部位大部分被感染的细胞，在同样部位取样的第2根拭子会因感染细胞的减少而使阳性率降低。

3.3 本实验发现不同性别的阳性检出率有明显差异，男性为18.46%，女性为7.14%，差异有统计学意义 (x2=38.54，P＜0.05)。本实验与王丽等报道CT阳性检出率女性高于男性［6］不一致，我们经回顾资料分析发现男性标本来自皮肤科和泌尿外科标本量少，提醒我们在以后CT检测中注意收集更多男性资料，再做进一步探究。

3.4 本实验发现不同年龄段的CT阳性构成比有明显差异，主要集中在21～30岁和31～40岁年龄组，与 Araujo的“年龄是泌尿生殖道沙眼衣原体感染的危险因素”［7］相一致，说明沙眼衣原体的感染与年龄有关，特别是21～40岁是性活动频繁时期，CT感染主要通过性传播途径而引起，为有效控制病原体的传染，高危年龄段人群要做到定时体检，尽早发现，及时治疗，不要因为没有症状就拒绝检查和治疗，同时提倡安全套的推广使用。

3.5 目前CT检测中，细胞培养法的敏感性为80～90%，特异性为100%，是确诊沙眼衣原体感染最可靠的方法，是实验室诊断的金标准［3］，但对操作环境及技术要求高，较难在临床实验室推行。酶联免疫法和胶体金法检测衣原体抗原设备要求低，一般实验室即可满足条件，有着前几种方法不可比拟的优点，操作也较简便、快速。尤其是胶体金法时间更短，1h之内便可以出结果。幸彩梅报道，虽然在沙眼衣原体检测方面，胶体金检测卡普遍使用，但方法学上存在灵敏度低的问题，ELISA法较胶体金法敏感度高，对男性标本，阳性检出率较胶体金高［8］。ELISA法敏感度高、快速、操作简便，可以为无症状的就诊病人提供快速检测，更适用于临床检测。

［1］王千秋.重视生殖道沙眼衣原体感染的防治［J］.中华皮肤科杂志，2007，40(5):257－259.

［2］MA.Guven，U.Dilek，O.Pata，S Dilek，P.Ciragil.Prevalance of Chlamydia trachmatis.Ureaplasma urealvticum and Mycoplasma hominis infections in the unexplained infertile women. Arch Gynecol Obstet，2007，276:219－223.

［3］徐丽玲，顾伟鸣，杨阳，等.1996－2003年上海市某医院泌尿生殖道分泌物标本性病检测结果分析［J］.中国艾滋病性病，2005，11(02):121－124.

［4］倪语星，尚红.临床微生物学与检验［M］，第4版，北京:人民卫生出版社，2008:315－329.

［5］王新，韩丽华.581例泌尿生殖道支原体、衣原体感染耐药性分析及对策.中华医院感染学杂志，2007，17(6):752－754.

［6］王丽，王金桃.性病就诊人群非淋球菌性尿道炎病原学的感染特征分析.中国艾滋病性病，2007，13(1):50－51.

［7］Araujo RSC，Guimaraes EMB，Alves MFC，et al.Prevalence and risk factors for Chlamydia trachomatis infection in adolescent females and young women in central Brazil［J］.Eur J Clin Microbiol infect Dis，2006 Jun;25(6):397－400.

［8］幸彩梅.二种沙眼衣原体抗原检测方法比较与评价［J］.海南医学杂志，2009，20(3):92－93.